草甘膦是世界銷量最大的除草劑,其在橡膠園噴施除草會影響橡膠樹生長,甚至?xí)䦟?dǎo)致橡膠樹死亡。但橡膠樹草甘膦藥害發(fā)生機制還不清楚。為了研究橡膠樹對草甘膦藥害生理和分子響應(yīng)機制,本文采用植物生理學(xué)、分子生物學(xué)、生物信息學(xué)和轉(zhuǎn)錄組技術(shù)研究草甘膦對橡膠樹藥害的作用機制。采用植物生理學(xué)方法分析草甘膦對橡膠樹葉片的生理指標變化的影響;采用RT-PCR技術(shù)克隆橡膠樹HbEPSPS基因,用生物信息學(xué)分析橡膠樹HbEPSPS結(jié)構(gòu),采用Q-RT-PCR技術(shù)系統(tǒng)地分析HbEPSPS在草甘膦、白粉菌、植物激素和脅迫處理后的表達模式;并對噴施草甘膦的橡膠樹葉片進行轉(zhuǎn)錄組分析。結(jié)果如下:1、噴施170mg·L-1草甘膦導(dǎo)致橡膠樹葉片脫落,引起新生葉片變長、畸形,下一蓬新生葉形狀會部分恢復(fù)。草甘膦導(dǎo)致葉綠素含量下降,可溶性糖含量下降,脯氨酸含量升高,過氧化物酶和超氧化物歧化酶活性增加,但含水量差異不顯著。2、莽草酸積累量在草甘膦噴施橡膠樹葉片前后呈顯著差異,橡膠樹葉片出現(xiàn)半黃半綠表型時莽草酸積累量上升,新生畸形葉和恢復(fù)葉中莽草酸含量下降。噴施草甘膦后各類型葉片生長素和赤霉素的含量均與未噴施前對照葉片差異不顯著,脫落酸和... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２莽草酸標準曲線??Ｆｉｇ．?２?Ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｓｈｉｋｉｍｉｃ?ａｃｉｄ??

圖３?ＩＡＡ、ＧＡ、ＡＢＡ和－ＺＲ－標準齒線??Ｆｉｇ．?３?Ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＩＡＡ，?ＧＡ，ＡＢＡ?ａｎｄ?ＺＲ．??

圖５?４ｃｆｔ‘Ｈ標準曲線??Ｆｉｇ．５?Ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｉＡｃｔｉｎ??草甘膦作用下橡膠樹葉片轉(zhuǎn)錄組測序??１ＲＮＡ?提取??艮據(jù)天根試劑盒說明書分別提取噴施后０?ｄ、１?ｄ、２?ｄ和３?ｄ的橡膠樹葉片總??，用１．２?％瓊脂糖凝膠電泳檢測是否條帶（４條或更多）和用超微量核酸蛋白分??測ＲＮＡ濃度和純度（ＯＤ２６（）／ＯＤ２８〇在１．８－２．１）。??２?ｃＤＮＡ文庫的建立和測序??圖６所示，將檢測合格的橡膠樹葉片總ＲＮＡ樣品，用帶有Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）的??集ｍＲＮＡ。加入ｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｂｕｆｆｅｒ?qū)ⅲ恚遥危链驍喑啥唐危裕恚遥危??板，合成ｃＤＮＡ，經(jīng)過純化并加ＥＢ緩沖液洗脫后做末端修復(fù)，加Ｐｏｌｙ（Ａ）接測序接頭，選擇合適片段進行ＰＣＲ擴增，建好的測序文庫用Ｉｌｌｕｍｉｎａ?ＨｉＳｅｑ測序。??Ａ提�。�?ｍＲＮＡ富集一＞?ｍＲＮＡ片段—ｃＤＮＡ合成—＞?片段篩選和—射??Ｕ?丨?丨?Ｉ?—?Ｉ?Ｉ?ｍｒｎ?ｍ??

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]基于高通量測序技術(shù)的小麥和紫莖澤蘭基因組學(xué)初步研究[D]. 聶小軍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[2]梅花鹿鹿茸頂端組織轉(zhuǎn)錄組分析及不同生長期差異基因篩選[D]. 幺寶金.吉林大學(xué) 2012
[3]越橘果實轉(zhuǎn)錄組文庫Solexa測序及花色素苷合成相關(guān)基因的表達分析[D]. 李曉艷.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]泥蚶高通量轉(zhuǎn)錄組分析及生長相關(guān)基因的克隆與表達研究[D]. 董迎輝.中國海洋大學(xué) 2012

碩士論文
[1]抗草甘膦野生大豆資源篩選鑒定及抗性機理研究[D]. 王迪.河北科技師范學(xué)院 2014
[2]MYC和Myb轉(zhuǎn)錄因子對橡膠生物合成關(guān)鍵酶轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的研究[D]. 包杰.海南大學(xué) 2014
[3]人參根、莖、葉轉(zhuǎn)錄組測序及差異表達基因分析[D]. 林艷玲.長春中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[4]基于RNA-Seq技術(shù)的人轉(zhuǎn)錄組分析研究[D]. 陳超.中南大學(xué) 2011
[5]草甘膦對大豆葉片生理和形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響[D]. 卜貴軍.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[6]棉花epsps基因的克隆及其表達特性研究[D]. 劉東軍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2006



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