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東北紅豆杉懸浮細(xì)胞放大培養(yǎng)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-07-15 09:56
  紫杉醇(Paclitaxel,商品名Taxol)是一種有效的抗癌新藥。目前,從紅豆杉樹皮等組織中直接提取以及化學(xué)合成是獲取紫杉醇的主要方法,但這些方法存在資源短缺、紫杉醇產(chǎn)量低等缺點(diǎn)。大規(guī)模培養(yǎng)紅豆杉組織和細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇被認(rèn)為是最有希望解決這一問題的途徑。本文主要對東北紅豆杉懸浮細(xì)胞放大培養(yǎng)進(jìn)行相關(guān)研究,將為實(shí)現(xiàn)東北紅豆杉懸浮細(xì)胞規(guī);a(chǎn)紫杉醇奠定基礎(chǔ)。本研究以東北紅豆杉幼莖為材料,誘導(dǎo)愈傷組織,經(jīng)繼代后建立細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系,并探究B5培養(yǎng)基中維生素含量對懸浮細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的影響;為了解決東北紅豆杉懸浮細(xì)胞在放大培養(yǎng)過程中的變異問題,研究玻璃化超低溫保存東北紅豆杉懸浮細(xì)胞的方法;對東北紅豆杉懸浮細(xì)胞逐步放大培養(yǎng)過程中的特征參數(shù)以及氣升式生物反應(yīng)器中東北紅豆杉懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液的流變特性進(jìn)行研究;對2L氣升式生物反應(yīng)器內(nèi)部兩相流動進(jìn)行CFD數(shù)值模擬,并探究通氣量對氣含率和循環(huán)液速的影響。本文研究結(jié)論如下:1.以東北紅豆杉幼莖為原料,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)和繼代,最終建立了穩(wěn)定的懸浮細(xì)胞系。通過對B5培養(yǎng)基中維生素含量的優(yōu)化,得出適用于東北紅豆杉懸浮細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的最優(yōu)維生素濃度組合為:維生素B1... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:98 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 研究背景
    1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.2.1 紫杉醇藥源途徑
        1.2.2 提高紅豆杉細(xì)胞的紫杉醇產(chǎn)量的方法
        1.2.3 植物種質(zhì)資源超低溫保存
        1.2.4 生物反應(yīng)器及其數(shù)值模擬
        1.2.5 紅豆杉細(xì)胞放大培養(yǎng)
    1.3 本文研究內(nèi)容
        1.3.1 主要內(nèi)容
        1.3.2 技術(shù)路線
第2章 東北紅豆杉懸浮細(xì)胞系建立及產(chǎn)紫杉醇培養(yǎng)基優(yōu)化
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料與儀器
        2.2.2 試驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 紫杉醇標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.3.2 維生素濃度對細(xì)胞生長和紫杉醇單位產(chǎn)量的影響
        2.3.3 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)
    2.4 本章小結(jié)
第3章 東北紅豆杉懸浮細(xì)胞的玻璃化超低溫保存
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料與儀器
        3.2.2 試驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 懸浮培養(yǎng)時(shí)間對細(xì)胞存活率的影響
        3.3.2 預(yù)培養(yǎng)時(shí)間對細(xì)胞存活率的影響
        3.3.3 預(yù)處理時(shí)間對細(xì)胞存活率的影響
        3.3.4 脫水時(shí)間對細(xì)胞存活率的影響
        3.3.5 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)
    3.4 本章小結(jié)
第4章 東北紅豆杉懸浮細(xì)胞放大培養(yǎng)過程的研究
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料與儀器
        4.2.2 試驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 放大培養(yǎng)過程中細(xì)胞生長量的變化
        4.3.2 放大培養(yǎng)過程中紫杉醇合成情況
        4.3.3 放大培養(yǎng)過程中pH值的變化
        4.3.4 放大培養(yǎng)過程中電導(dǎo)率的變化
        4.3.5 通氣量對東北紅豆杉懸浮細(xì)胞的影響
        4.3.6 氣升式反應(yīng)器中東北紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)液的流變特性
    4.4 本章小結(jié)
第5章 2L氣升式生物反應(yīng)器的CFD數(shù)值模擬
    5.1 引言
    5.2 CFD數(shù)值模擬及軟件介紹
        5.2.1 CFD數(shù)值模擬簡介
        5.2.2 FLUENT軟件介紹
    5.3 氣升式生物反應(yīng)器的CFD仿真模型介紹
        5.3.1 求解器
        5.3.2 多相流模型
        5.3.3 湍流模型
    5.4 氣升式生物反應(yīng)器CFD模擬的特性參數(shù)
    5.5 2L氣升式生物反應(yīng)器的CFD仿真
        5.5.1 2L氣升式生物反應(yīng)器的物理模型
        5.5.2 CFD仿真的前處理
        5.5.3 CFD仿真的求解過程
        5.5.4 CFD仿真的結(jié)果及分析
    5.6 本章小結(jié)
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師及作者簡介
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表成果及參與項(xiàng)目
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Effect of elicitors, precursors and metabolic inhibitors on paclitaxel production by Taxus cuspidata cell culture[J]. Shujie Wang,Chun Li,Hujun Wang,Xiangmei Zhong,Jing Zhao,Yueying Tong,Yajun Zhou.  Journal of Forestry Research. 2016(06)
[2]曼地亞紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)條件探索[J]. 柳文靜,閔霞,高雅,衛(wèi)靜麗,史曉昀,鄭冬超.  實(shí)驗(yàn)科學(xué)與技術(shù). 2016(03)
[3]植物細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器的種類特點(diǎn)及展望[J]. 申斕,周愛東,吳小芹.  中國生物工程雜志. 2015(08)
[4]產(chǎn)紫杉醇植物內(nèi)生真菌的研究進(jìn)展[J]. 陳剛,周謙,王旻,顧覺奮.  中國野生植物資源. 2015(04)
[5]不同栽培類型對紅豆杉中紫杉醇含量的影響[J]. 曹云飛,倪慧艷,袁松,葉飛,劉寶華.  藥學(xué)研究. 2015(07)
[6]78.5升氣升式環(huán)流反應(yīng)器內(nèi)構(gòu)件優(yōu)化[J]. 楊志方,杜峰,于清江,郭璐玥,張萍萍.  化工進(jìn)展. 2015(03)
[7]紫杉醇生物合成研究歷史、現(xiàn)狀及展望[J]. 邱德有,張彬,楊艷芳,邵芬娟,滕文靜.  生物技術(shù)通報(bào). 2015(04)
[8]紅豆杉提取紫杉醇工藝技術(shù)研究[J]. 劉志明,王偉,盧娟,李丹.  陜西林業(yè)科技. 2014(05)
[9]紫杉醇提取及分離純化技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 常杰華,張萬忠.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(11)
[10]紅豆杉細(xì)胞反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)氧傳質(zhì)系數(shù)的研究[J]. 張長銀,董艷山,李雅麗,付春華,余龍江.  化學(xué)工程. 2013(08)

博士論文
[1]紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)過程中褐化機(jī)理及其控制[D]. 董艷山.華中科技大學(xué) 2015
[2]地黃試管塊根誘導(dǎo)及莖尖玻璃化法超低溫保存[D]. 薛建平.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[3]柑桔和蘋果等果樹種質(zhì)資源的離體保存及其遺傳變異[D]. 郝玉金.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2000

碩士論文
[1]南方紅豆杉懸浮細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫杉醇及其細(xì)胞培養(yǎng)物的化學(xué)成分研究[D]. 白向陽.暨南大學(xué) 2015
[2]東北紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)高效提取紫杉醇技術(shù)體系研究[D]. 趙晶.吉林大學(xué) 2014
[3]紅豆杉細(xì)胞系種質(zhì)保存及遺傳變異研究[D]. 吳文娟.華中科技大學(xué) 2009
[4]氣升式環(huán)流反應(yīng)器CFD優(yōu)化研究[D]. 張喆.上海交通大學(xué) 2009



本文編號:3285482

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