發(fā)布時(shí)間：2021-07-14 18:10

　　我國(guó)林木資源豐富,觀賞及藥用林木種類繁多,且基本為多年生植物,抗逆性遠(yuǎn)高于草本植物,其內(nèi)生真菌開發(fā)潛力巨大。目前,林木內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物生物活性的研究受到人們的廣泛關(guān)注,將成為新的天然抑菌藥物的重要來源。本論文對(duì)抗青枯病桉樹品種進(jìn)行了篩選,選擇具有高抗性桉樹品種,分離內(nèi)生真菌并對(duì)其次生代謝產(chǎn)物的抗菌活性和抗氧化活性進(jìn)行了初步研究,取得如下主要結(jié)果。1、用桉樹青枯菌作為供試病原菌,對(duì)檸檬桉、窿緣桉、大葉桉、托里桉、尾葉桉5種華南地區(qū)常見的桉樹品種進(jìn)行抗病能力篩選,發(fā)現(xiàn)5種桉樹抗青枯病能力大小依次為窿緣桉>檸檬桉>托里桉>大葉桉>尾葉桉。因此選取窿緣桉和檸檬桉作為候選植物進(jìn)行內(nèi)生真菌的分離。2、在窿緣桉和檸檬桉中共分離得到45株內(nèi)生真菌,根據(jù)其菌落、菌絲、孢子梗以及分生孢子等形態(tài)特征,合并相同的內(nèi)生真菌菌株,共得形態(tài)差異較為明顯的內(nèi)生真菌菌株21個(gè),其中19株分離自枝條,2株分離自種子。按照形態(tài)學(xué)和rDNA-ITS序列鑒定等方法對(duì)其進(jìn)行鑒定。21株內(nèi)生真菌共有20個(gè)屬,包括莖點(diǎn)霉屬、刺盤孢屬、鐮刀菌屬、扁孔腔菌屬、刺杯毛孢屬、毛殼菌屬、擬盤多毛孢屬、枝狀枝孢屬、彎... 

【文章來源】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線

uell.）、大葉桉（Eucalyptus robusta Smith）、尾葉桉（Eucalyptus urophylla）、托里桉（Eucalyptus torelliana）健康枝條與種子于2014年5月采自華南農(nóng)業(yè)大學(xué)校園。如圖2-1圖 2-1 檸檬桉的枝條與果實(shí)2.1.2 供試細(xì)菌7種供試細(xì)菌：金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，革蘭氏陽性）；枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis，革蘭氏陽性）；桉樹青枯菌（Ralstonia solanacearum，革蘭氏陽性）；溶血葡萄球菌（Staphylococcus haemolyticus，革蘭氏陽性）；番茄瘡痂病菌（Xanthomonas vesicatoria，革蘭氏陰性）；黃瓜角斑病菌（Pseudomonas lachrymans，革蘭氏陰性）；大腸桿菌（Escherichia coli，革蘭氏陰性）。保存于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與風(fēng)景園林學(xué)院森林保護(hù)系病理實(shí)驗(yàn)室。2.1.3 培養(yǎng)基馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基（Potato dextrose agar

薄層板本身顯紫色，從而篩選出活性組分。薄層層析-生物自顯影法具有簡(jiǎn)單、快捷、直觀的特點(diǎn)。內(nèi)生真菌提取物中加入乙酸乙酯、二氯甲烷有機(jī)溶劑，超聲震蕩充分溶解，并點(diǎn)于同一塊薄層硅膠板上，用氯仿：甲醇 15:1 展開，取出晾干后，在將 BHA 點(diǎn)于板上空白處。噴以 0.2 mg/mL 的 DPPH 無水乙醇溶液顯色。105℃加熱干燥 5 min 至斑點(diǎn)清晰，可見光下檢視。通過抗氧化斑點(diǎn)的遷移率（即 Rf值）來初步評(píng)價(jià)樣品中抗氧化化合物的數(shù)量和極性，根據(jù)抗氧化斑點(diǎn)的大小來初步評(píng)價(jià)化合物的活性和含量。Rf值計(jì)算公式同 2.2.3.7。3 結(jié)果與分析3.1 抗青枯病桉樹品種的篩選

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]桉樹常見病害及其防治措施探討[J]. 陳德引.  現(xiàn)代園藝. 2015(07)
[4]桉樹褐斑病和炭疽病病原鑒定與病害分析[J]. 張國(guó)輝,宋盛英,劉德波,范成明,胡贊民.  中國(guó)植保導(dǎo)刊. 2014(12)
[5]桉樹青枯病的研究進(jìn)展[J]. 黃成林,聶珍臻,賀彬.  黑龍江科學(xué). 2014(11)
[6]生物堿類化合物的研究進(jìn)展[J]. 徐智,吳德玲,張偉,馬鳳愛.  廣東化工. 2014(17)
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[9]一株真菌所產(chǎn)環(huán)縮酚酸肽類化合物的分離和鑒定[J]. 張明娥,熊智強(qiáng),劉巧霞,楊迎迎,王勇.  華東理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(01)
[10]3種藥劑對(duì)桉樹紫斑病林間防效試驗(yàn)[J]. 田艷,陳桂芳,楊遠(yuǎn)亮,趙德祥.  農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào). 2014(02)

碩士論文
[1]兩株海洋真菌抗菌活性次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究[D]. 尚卓.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2011
[2]熒光假單胞桿菌防治桉樹焦枯病研究[D]. 劉超洋.中南林學(xué)院 2003



本文編號(hào)：3284633