越南槐（Sophora tonkinensis Gagnep.）的干燥根及根莖,是常用中藥,其藥材名為山豆根,山豆根其藥用有效成分苦參堿（Matrime）及氧化苦參堿（Oxymatrime）具有顯著的抗癌和抗真菌效果。醫(yī)藥市場對越南槐原料需求量極大,急需尋找新的替代資源或新的途徑來生產(chǎn)越南槐藥用原料。藥用植物毛狀根具有生長速度快、易于大規(guī)模培養(yǎng)、生產(chǎn)穩(wěn)定、合成次生代謝物含量高等特點(diǎn)。本研究采用共培養(yǎng)法研究發(fā)根農(nóng)桿菌感染越南槐無菌苗誘導(dǎo)產(chǎn)生毛狀根,并在此基礎(chǔ)上從各種不同培養(yǎng)條件（基本培養(yǎng)基、生長調(diào)節(jié)劑）對毛狀根生長的影響方面進(jìn)行研究,探索定向培養(yǎng)越南槐細(xì)胞及器官代替越南槐原藥材的新途徑。主要結(jié)果如下：（1）農(nóng)桿菌R1601、A4和15834都能誘導(dǎo)出越南槐毛狀根,但最適合誘導(dǎo)越南槐毛狀根的菌種為發(fā)根農(nóng)桿菌R1601,其誘導(dǎo)率最高（66.67%）,而且毛狀根較粗壯、生長迅速；子葉與莖段相比更適合作為誘導(dǎo)毛狀根的外植體,子葉的誘導(dǎo)率高達(dá)66.67%,而莖段的誘導(dǎo)率次之（43.33%）,葉片作為外植體未能誘導(dǎo)出毛狀根。（2）越南槐子葉在預(yù)培養(yǎng)后再進(jìn)行誘導(dǎo),誘導(dǎo)率高于用子葉直接浸染菌株進(jìn)行誘導(dǎo),... 

【文章來源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 藥用植物毛狀根的研究進(jìn)展
        1.1.1 藥用植物毛狀根的特點(diǎn)
        1.1.2 藥用植物毛狀根形成的影響因素
        1.1.3 藥用植物毛狀根的轉(zhuǎn)化方法
        1.1.4 藥用植物毛狀根的鑒定
        1.1.5 藥用植物毛狀根在植物次生代謝產(chǎn)物研究中的應(yīng)用
    1.2 研究意義與目的
    1.3 研究技術(shù)路線
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 主要儀器與設(shè)備
        2.1.3 主要藥品與試劑
    2.2 方法
        2.2.1 菌株保藏與活化
        2.2.2 發(fā)根農(nóng)桿菌的生長曲線測定
        2.2.3 發(fā)根農(nóng)桿菌篩選
        2.2.4 外植體篩選
        2.2.5 預(yù)培養(yǎng)時間篩選
        2.2.6 菌液濃度篩選
        2.2.7 侵染時間篩選
        2.2.8 共培養(yǎng)時間篩選
        2.2.9 乙酰丁香酮（AS）濃度篩選
        2.2.10 頭孢噻肟鈉（Cef）濃度對毛狀根抑菌效果篩選
        2.2.11 越南槐毛狀根的PCR鑒定
        2.2.12 越南槐毛狀根生長培養(yǎng)基優(yōu)化
        2.2.13 越南槐毛狀根生物堿含量測定
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 發(fā)根農(nóng)桿菌的活化與篩選
        3.1.1 繪制農(nóng)桿菌生長曲線
        3.1.2 菌株的篩選
    3.2 越南槐毛狀根誘導(dǎo)與鑒定
        3.2.1 不同外植體誘導(dǎo)毛狀根的誘導(dǎo)率比較
        3.2.2 不同預(yù)培養(yǎng)時間對越南槐毛狀根誘導(dǎo)率的影響
        3.2.3 不同菌液濃度對越南槐毛狀根誘導(dǎo)率的影響
        3.2.4 不同侵染時間對越南槐毛狀根誘導(dǎo)率的影響
        3.2.5 不同共培養(yǎng)時間對越南槐毛狀根誘導(dǎo)率的影響
        3.2.6 不同AS濃度對越南槐毛狀根誘導(dǎo)率的影響
        3.2.7 不同頭孢噻肟鈉（Cef）濃度對毛狀根抑菌效果的影響
        3.2.8 越南槐毛狀根的PCR鑒定
    3.3 越南槐毛狀根生長培養(yǎng)基優(yōu)化
        3.3.1 培養(yǎng)基對越南槐毛狀根生長的影響
        3.3.2 不同生長調(diào)節(jié)劑處理對越南槐毛狀根生長的影響
    3.4 越南槐毛狀根生物堿含量的測定
第四章 結(jié)論與討論
    4.1 結(jié)論
    4.2 討論
        4.2.1 越南槐毛狀根的誘導(dǎo)
        4.2.2 越南槐毛狀根的培養(yǎng)
        4.2.3 創(chuàng)新性
        4.2.4 研究展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間論文發(fā)表情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]資源植物毛狀根培育及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 胡瓊,任國平.  北方園藝. 2020(06)



本文編號：3072179