植物在激發(fā)子的誘導處理下,可以產(chǎn)生如下的防衛(wèi)反應:活性氧爆發(fā)、次生代謝產(chǎn)物累積和抗性基因的表達等,這些抗病因素共同抵御病原物的侵入和擴散。由于橡膠樹高大生育期長,其相關基礎性或機理性研究相對滯后。懸浮細胞培養(yǎng)作為植物生物技術中一種研究手段,由于其分散性佳,生長快速,方便控制,已被廣泛用于各個方面的科學研究。因此,研究建立橡膠樹懸浮細胞系有利于加快相關研究進程。本研究通過摸索建立橡膠樹懸浮細胞系,研究核黃素激發(fā)橡膠樹懸浮細胞系的防衛(wèi)反應,為明確橡膠樹抗病防衛(wèi)機制和培育抗病品種提供理論基礎與科學依據(jù)。本實驗主要研究結果如下:1、以橡膠樹品系7-33-97花藥經(jīng)誘導培養(yǎng)基誘導后獲得的胚性愈傷組織為材料,通過對2,4-D、NAA和KT等關鍵激素及主要碳源蔗糖的最適濃度篩選,得到了改良的MS培養(yǎng)基,建立起了穩(wěn)定的懸浮細胞系,作為后面實驗開展的主要材料;結果表明,采用添加1.0mg/L的2,4-D、0.5mg/L的NAA、1.5mg/L的KT、30g/L的蔗糖的MS培養(yǎng)液,在此營養(yǎng)環(huán)境下,得到的懸浮細胞系穩(wěn)定、生長速度佳,為后續(xù)實驗需要大量的實驗材料提供有效的保障;懸浮培養(yǎng)液的pH值變化與細胞生長... 

【文章來源】：海南大學海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３橡膠樹７－３３－９７懸浮細胞系生長曲線??

圖４橡膠樹７－３３－９７懸浮細胞液ｐＨ值的變化??Ｆｉｇ４?Ｔｈｅ?ｃｈａｎｇｅｓ?ｉｎ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｈｅｖｅａ?ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ７－３３－９７?ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ?ｃｅｌｌｓ??結合圖３和圖４我們可以分析得知，懸浮培養(yǎng)液的ｐＨ值變化與細胞生長??速率的快慢有著一定的關聯(lián)。在培養(yǎng)２？８ｄ這個時間段內(nèi)，懸浮培養(yǎng)液的ｐＨ有??一定程度的升高，而此時期正是懸浮細胞處于對數(shù)生長期的時候，懸浮細胞的濕??重和干重均有快速的增長，細胞分裂、增殖處于最佳的時期；在培養(yǎng)８？１２ｄ這個??時間段內(nèi)，懸浮培養(yǎng)液的ｐＨ開始走下降趨勢的時候，此時的懸浮細胞濕重幾乎??無變化，而干重還出現(xiàn)一定程度的下降現(xiàn)象，這說明了此時的細胞生長，分裂緩??慢甚至停滯，或許ｐＨ值的降低還對懸浮細胞的增長產(chǎn)生一定的副作用。??２．?３不同的激素濃度對細胞懸浮系生長的影響??２．?３．１不同濃度的２，４－Ｄ對橡膠樹７－３３－９７懸浮細胞生長的影響??筆者在實驗中分別將穩(wěn)定的橡膠樹品系７－３３－９７懸浮細胞系接種到不同濃度??的２

時候達到了最大量，最大值為〇．１７ｇ，較Ｏｍｇ／Ｌ處懸浮細胞的干重量提升了?０．１２ｇ，??提升了?２．４倍，效果明顯。當２，４－Ｄ濃度為１．２ｍｇ／Ｌ的時候，懸浮細胞的生長出??現(xiàn)了下降的情況（圖５）。由此可知，在其他營養(yǎng)物質(zhì)不變的情況下，應選擇濃??度為ｌｍｇ／Ｌ的２，４－Ｄ，此濃度下的懸浮細胞生長速度最快，更適合大批量的后續(xù)??１５??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：2935553