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柳杉赤枯病病原菌的分離鑒定及室內(nèi)藥劑篩選

發(fā)布時間:2020-11-06 13:20
   柳杉是我國高山速生用材樹種,目前在四川作為重要的經(jīng)濟(jì)用材樹種被大量種植。柳杉赤枯病發(fā)生比較嚴(yán)重,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本文主要以四川雅安(天全、蘆山)地區(qū)的柳杉為研究對象,觀察柳杉赤枯病病原菌在針葉上的形態(tài)學(xué)特征,按照組織分離法分離純化得到柳杉赤枯病病原菌的純培養(yǎng)菌株。通過病原菌的形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定,確定為污斑擬盤多毛孢(Pestalotiopsis foedans)。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究柳杉赤枯病病原菌的生物學(xué)特性,探討該致病菌適宜生長和產(chǎn)孢條件;在室內(nèi)藥效試驗中選擇相應(yīng)的供試農(nóng)藥,尋找對該病原菌抑制效果較好的化學(xué)農(nóng)藥。研究結(jié)果如下:1采集四川省雅安市天全縣、蘆山縣的柳杉病葉樣本帶回室內(nèi)進(jìn)行分離鑒定,根據(jù)形態(tài)學(xué)特性、致病力測定并通過ITS序列和β-微管蛋白基因序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹的分析,確定柳杉赤枯病是由污斑擬盤多毛孢(Pestalotiopsis foedans)引起。2對病原菌進(jìn)行生物學(xué)特性進(jìn)行相關(guān)研究,結(jié)果表明病原菌的菌絲和分生孢子在pH4-10的范圍內(nèi)均能生長良好和萌發(fā),對生長環(huán)境酸堿度的適應(yīng)性較強(qiáng)。生長和萌發(fā)的最適溫度為25℃。分生孢子的萌發(fā)受濕度影響較大,在濕度90%時大量萌發(fā),萌發(fā)率90%。菌絲在連續(xù)或間斷光照條件下均能生長良好。因此高溫多濕的環(huán)境有助于病原菌的菌絲生長和分生孢子的傳播和萌發(fā),從而使病害的病情加重。3選用5種殺菌劑對供試菌進(jìn)行室內(nèi)毒力測定,結(jié)果表明70%甲基硫酸靈對擬盤多毛孢菌菌絲生長的抑制效果穩(wěn)定且抑制率較高,EC50為6.133 μg/ml,其次是50%多菌靈。75%百菌清和15%三唑酮可濕性粉劑的抑菌效果最差,EC50分別為262.426μg/ml,793.51 μg/ml。
【學(xué)位單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2017
【中圖分類】:S763.7
【部分圖文】:

病原菌,分生孢子,赤枯病


.2?Morphology?of?pathogenic?bacteria?isolated?from?leaves?of?Cryptome早期形態(tài)B菌落輪狀擴(kuò)展C分生孢子堆D、E分生孢子F分生孢ly?appearance?of?the?colony?B?Concentric?expanion?of?the?colony?C?Conipile?D、E?Conidiospore?F?Conidium?germination??菌的分子生物學(xué)鑒定??的柳杉赤枯病病原菌利用通用引物ITS-4和ITS-5進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲瓊脂糖凝膠電泳,得到清晰的條帶,對比可知,PCR產(chǎn)物片段之間。(圖?3)??

微管蛋白,瓊脂凝膠電泳,產(chǎn)物,赤枯病


圖4?(3-微管蛋白PCR擴(kuò)增產(chǎn)物瓊garose?gelelectrophoresis?of?beta-tubl列測序后,得到ITS-rDNA的基因序列長度為541bp,柳杉赤枯。

瓊脂糖凝膠電泳,產(chǎn)物,微管蛋白,瓊脂


3?ITS-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳rose?gelelectrophoresis?of?ITS-PCR?amp病原菌利用引物Bt2a、Bt2b擴(kuò)增p-微電泳,得到清晰的條帶,對比可知,圖4?(3-微管蛋白PCR擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂
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3 向增來,王立功;沿海地區(qū)柳杉赤枯病的發(fā)生與防治[J];江蘇林業(yè)科技;1983年03期


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1 宋琳;柳杉赤枯病病原菌的分離鑒定及室內(nèi)藥劑篩選[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年



本文編號:2873189

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