【摘要】：本文以廣西融水縣貝江河林場1.5代杉木種子園30個無性系為研究對象,分析杉木無性系的球果種實性狀差異,同時篩選了 17對多態(tài)性引物進(jìn)行SSR-PCR擴(kuò)增以分析杉木無性系的SSR標(biāo)記遺傳多樣性,主要研究結(jié)果如下:(1)根據(jù)杉木球果苞鱗形態(tài)特征的不同,可分為為緊包型、松張型、反翹型3種,以松張型比例最大(56.67%),緊包型次之(33.33%),反翹型最小(10.00%),同一無性系的球果類型基本一致,但少數(shù)無性系的球果類型有兩種或以上;30個無性系的平均出籽率為3.56%,緊包型球果的平均出籽率最高,其次是松張型;杉木母樹結(jié)實量存在較明顯的大小年現(xiàn)象,大部分無性系的球果產(chǎn)量受到大小年的影響較大,24號、25號、28號3個無性系的球果產(chǎn)量未受大小年的影響。(2)球果產(chǎn)量、球果形態(tài)特征、種子質(zhì)量性狀等性狀在無性系間存在顯著或極顯著差異;各性狀變異系數(shù)大小排序為:球果產(chǎn)量(55.58%)果體積(51.42%單果重(37.77%)千粒重(20.99%)發(fā)芽率(19.22%)發(fā)芽勢(18.89%)優(yōu)良度(16.44%)球果橫徑(15.43%)球果縱徑(14.18%)果形指數(shù)(8.04%);種實性狀的廣義遺傳力在0.610～0.988,從大到小排序為:千粒重單果重球果橫徑球果縱徑澀粒率果體積優(yōu)良度果形指數(shù)發(fā)芽率發(fā)芽勢球果產(chǎn)量,表明各性狀受到中等及以上遺傳控制。(3)球果產(chǎn)量與球果形態(tài)特征、種子性狀無顯著的相關(guān)關(guān)系;球果形態(tài)特征與千粒重存在極顯著正相關(guān)性;發(fā)芽率與發(fā)芽勢、優(yōu)良度呈極顯著正相關(guān);發(fā)芽勢與優(yōu)良度極顯著正相關(guān),優(yōu)良度與澀粒率呈極顯著負(fù)相關(guān)。(4)表型性狀聚類結(jié)果表明:30個無性系在遺傳距離為13.75時,劃分為5類;用主成分分析法提取4個主成分,累計貢獻(xiàn)率達(dá)85.491%,綜合得分較高的是21號、29號、26號無性系,最低是27號無性系,綜合得分排名前10的種實兼優(yōu)的無性系,可作為高世代種子園的建園材料。(5)提取杉木DNA在質(zhì)量、濃度上均符合SSR-PCR后續(xù)實驗的要求;根據(jù)樣品原始濃度,將30個樣品稀釋至統(tǒng)一濃度(4.875 ng/ul)并分裝保存,以防止反復(fù)凍融而引起降解;在已建立的PCR體系上繼續(xù)對引物退火溫度及循環(huán)數(shù)的優(yōu)化,得到每對引物的最適宜的退火溫度,33個循環(huán)數(shù)的擴(kuò)增效果較好。(6)17對SSR標(biāo)記引物在30份杉木材料中共擴(kuò)增出56個多態(tài)位點,每對引物平均擴(kuò)增出3.2個等位基因,變化范圍在2～6個,平均有效等位基因為2.2,平均多態(tài)信息含量(PIC)為0.5431,變化范圍在0.1285～0.9825,平均Nei's多樣性指數(shù)為0.4755,平均Shannon多樣性指數(shù)為0.8324;表明杉木無性系在分子水平上具有較高的遺傳多樣性,所選用的17對SSR引物具有較高的多態(tài)性。(7)30份杉木材料的遺傳相似數(shù)在0.5357～0.8929之間,平均值為0.6842,表明杉木無性系之間的遺傳背景較復(fù)雜;在以遺傳相似數(shù)0.70為閾值時,可將30個無性系分為6個類群;卡方檢驗結(jié)果顯示表型性狀聚類與分子標(biāo)記聚類結(jié)果相關(guān)不顯著,表明杉木在表型及分子水平上具有豐富的遺傳變異。
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S791.27
【圖文】：

定樣本之間的親疏關(guān)系，將具有相似屬性的事物聚為一類［１Ｃ）Ｉ］。為了進(jìn)一步的對不逡逑木無性系進(jìn)行分類，以１１個種實性狀指標(biāo)為內(nèi)容，對３０個無性系進(jìn)行聚類分析。逡逑行聚類分析前對各性狀測定數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化轉(zhuǎn)換，然后采用歐氏距離為測量間距，逡逑組間連接法進(jìn)行聚類。逡逑由聚類分析結(jié)果（圖２－３）可知，當(dāng)遺傳距離為１３．７５時，可將３０個無性系劃分為逡逑：第一類包括１６個無性系，具體為７號、２３號、４號、２０號、１５號、２４號、５號、逡逑、２２號、１７號、６號、８號、２５號、１９號、１１號、３０號無性系；第二類包括５個逡逑系，具體為２７號、２８號、１６號、１８號、２號無性系；第三類包括１個無性系，具逡逑］０號無性系？，第四類包括７個無性系，具體為３號、１２號、２１號、２６號、１號、逡逑、２９號；第五類包括１個無性系，具體為１４號無性系。在遺傳距離為８．７５時，可逡逑一大類細(xì)分為４個亞群，第一亞群包括７、２３、４、２０、１５、２４、５、９、２２、１７等逡逑無性系，第二亞群包括６、８、２５、１９號等４個無性系，第三亞群為１１號１個無性，逡逑亞群包括３０號１個無性系。第二類群可細(xì)分２個亞群，第一亞群為２７、１８、１６、逡逑等４個無性系，第二亞群為２號１個無性系。第四類群可細(xì)分為２個亞群，第１逡逑可細(xì)分為３、１２、２１、２６、１、１３等６個無性系，第２亞群為２９號１個無性系。逡逑邐逡逑

引起引物與模板錯配，特異性較低，非特異擴(kuò)增條帶較多，影響產(chǎn)物的檢測；較高逡逑的退火溫度會減少引物二聚體和非特異性產(chǎn)物的形成，但會導(dǎo)致引物與模板結(jié)合不夠牢逡逑固。結(jié)果表明：當(dāng)溫度較低是（圖３－２），所得膠圖上非特異性條帶較多，目的條帶比較逡逑模糊。隨著溫度的升高（圖３－３），非特異性條帶逐漸減少，目的條帶逐漸清晰。對引物逡逑的退火溫度進(jìn)行優(yōu)化，得出各引物最佳退火溫度，優(yōu)化后的退火溫度，其ＳＳＲ－ＰＣＲ產(chǎn)逡逑物電泳圖非特異性條帶數(shù)量少、特異條帶清晰、易于判讀。逡逑！邐

本文編號：2735955