【摘要】：木材腐朽是指木材因木腐真菌的侵害而引起木材糟爛和解體的現(xiàn)象。近年來我國木材腐朽現(xiàn)象十分普遍,木材腐朽給林業(yè)的加工生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。木材與人類的關(guān)系十分密切,人類的生活和生產(chǎn)中離不開木材的使用,然而隨著我國經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展,森林資源出現(xiàn)嚴(yán)重供不應(yīng)求的現(xiàn)象。為了提高木材質(zhì)量,降低木材腐朽造成的木材損害現(xiàn)象,對于木腐真菌的鑒定和研究就顯得尤為必要。纖維素是一種可再生性的資源,在工業(yè)生產(chǎn)中需要將其降解后才具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值,它的降解主要依賴?yán)w維素酶的催化作用。木腐真菌所分泌的纖維素酶可以較為高效地分解纖維素,因此本文對木腐真菌纖維素酶的活力進(jìn)行了測定,并尋找出最優(yōu)產(chǎn)酶條件。這為有害病原木腐真菌向有益方向進(jìn)行轉(zhuǎn)化,也為提高纖維素的降解率和生物轉(zhuǎn)化方面提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。本文首先從林區(qū)的活立木材上采集木腐真菌子實(shí)體,用分離篩選培養(yǎng)基分離純化菌種,得到兩株活力較好的菌株,并用愈創(chuàng)木酚的方法區(qū)分出木腐真菌的木材腐朽類型。之后提取基因組DNA,運(yùn)用基于PCR的分子生物學(xué)技術(shù)擴(kuò)增DNA序列,對擴(kuò)增產(chǎn)物純化回收,測序結(jié)果登陸Genbank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行序列比對,同時(shí)設(shè)計(jì)7對特異性引物和構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹分析其親緣關(guān)系,對兩株木腐真菌進(jìn)行了分子水平上的鑒定。菌種鑒定結(jié)果顯示,木腐真菌Y1為紅緣擬層孔菌(Fomitopsis pinicola),NCBI登錄號(hào)為KM373236.1。木腐真菌Y2為木蹄層孔菌(Fomes fomentarius),NCBI登陸號(hào)為HM58410.1。同時(shí)結(jié)合傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)鑒定方法,對兩株木腐真菌的子實(shí)體形態(tài)特征,菌落新生區(qū)的形態(tài)、生長速度、菌落顏色、菌絲氣味以及菌絲結(jié)構(gòu)變化等進(jìn)行觀察和記錄。將兩種鑒定方法的結(jié)果進(jìn)行比對,得出兩種鑒定結(jié)果一致。但傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)鑒定方法,是根據(jù)鑒定者以往經(jīng)驗(yàn)和查閱參考書籍對菌種進(jìn)行觀察和鑒定,對同一種培養(yǎng)菌落形態(tài)特征描述可能會(huì)不同,或者一旦子實(shí)體的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征發(fā)生改變,可能得到不同的鑒定結(jié)果,該鑒定方法的準(zhǔn)確性相對較低,并且木腐真菌菌落培養(yǎng)周期和鑒定所需時(shí)間較長。因此對比形態(tài)學(xué)鑒定方法,運(yùn)用基于現(xiàn)代分子生物學(xué)的方法能夠更加快速和準(zhǔn)確的對木腐真菌進(jìn)行鑒定。同時(shí)將兩種鑒定方法相結(jié)合,能夠更加可靠的對木腐真菌進(jìn)行鑒定。本文在鑒定木腐真菌的基礎(chǔ)上,對一株褐腐真菌進(jìn)行纖維素酶活力分析和產(chǎn)酶條件優(yōu)化,發(fā)酵試驗(yàn)表明,在初始pH 6.0、乳糖15 g/L、KH2PO4 0.5g/L、硝酸銨15 g/L、MgSO4 0.5g/L、VB1 0.4g/L,接入菌餅2塊,裝液量為80mL條件下培養(yǎng)5d時(shí),紅緣擬層孔菌的纖維素酶活力最高,內(nèi)切葡聚糖酶(CMCase)為116.94 U/mL,為進(jìn)一步研究褐腐真菌降解纖維素的機(jī)制提供前期基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S782.33
【圖文】：

者淺紅色顯色圈出現(xiàn)的菌落，可以判斷其腐朽類型為木材反之，無顯色圈出現(xiàn)的菌株腐朽類型為木材褐腐。菌形態(tài)學(xué)觀察方法相機(jī)對采集的新鮮木腐真菌子實(shí)體拍照，描述并記錄子實(shí)。將分離篩選備用的菌株接種于 PDA 培養(yǎng)基中，于 25°落長滿平皿所需時(shí)間。挑取培養(yǎng)基上生長良好的菌落菌絲時(shí)載玻片，在高倍顯微鏡下觀察菌落生長形態(tài)、菌落顏色體等宏觀和微觀特征。分析菌的分離結(jié)果多株木腐真菌子實(shí)體分離純化，得到目的菌株 Y1 和 Y2，菌株的子實(shí)體圖片。Y1 侵染紅松活立木，Y2 侵染白樺活養(yǎng)基上顯示，菌株 Y1 無顯色圈出現(xiàn)，判斷菌株 Y1 為木現(xiàn)，為木材白腐菌。

圖 2-2 子實(shí)體 Y2菌形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果化的兩株木腐真菌子實(shí)體進(jìn)行傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法鑒定，分別外部形態(tài)進(jìn)行描述，分別在 25°C 恒溫箱中培養(yǎng)菌落直至和菌落生長狀態(tài)等。果可知，木腐真菌的子實(shí)體 Y1，無柄，側(cè)生在紅松活立山丘型，子實(shí)體邊緣頓圓，菌蓋表面比較光滑，淡黃色膠菌株生長中度較快，3-5 周內(nèi)長滿覆蓋平皿，菌落正反面部均勻生長，菌落邊緣輕微升起呈亞氈狀。具有輕微蘑菇褐色，背面培養(yǎng)基變輕微黃色（圖 2-3 和圖 2-4）。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 汪昭賢,秦晟,翟俊英,張士賢,陳仁文,劉心一,李長生,謝毓芬;耕�！疤阃饶[爛病”病區(qū)霉稻草真菌相及產(chǎn)毒真菌的調(diào)查[J];獸醫(yī)科技雜志;1982年10期

2 趙麗芳;李興閣;;西藏米林林芝地區(qū)部分真菌名錄[J];西南林學(xué)院學(xué)報(bào);1987年01期

3 吳興海;楊偉克;鄧明俊;陳長法;邵秀玲;梁成珠;封立平;;利用PCR技術(shù)快速檢測玉米細(xì)菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii subsp.stewartii)[J];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年05期

4 莫瑾;朱金國;彭梓;朱水芳;趙文軍;劉紅霞;;利用雙重PCR技術(shù)快速檢測水稻細(xì)菌性谷枯病菌[J];植物保護(hù)學(xué)報(bào);2010年03期

5 王璇;蔡一鳴;徐景峨;任榮清;;應(yīng)用PCR技術(shù)快速檢測豬胸膜肺炎放線桿菌[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2010年13期

6 涂納新，張志芳，郭錫杰，吳祥甫;應(yīng)用PCR技術(shù)診斷家蠶核型多角體病毒病[J];蠶業(yè)科學(xué);1994年02期

7 吳金節(jié),劉亞,張志忠;健康貓被毛真菌菌相[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);1999年03期

8 李郁;魏建忠;王桂軍;李春芬;;應(yīng)用PCR技術(shù)調(diào)查市售豬肉產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌[J];中國動(dòng)物檢疫;2006年05期

9 李馨,楊雋;PCR技術(shù)及其在畜牧業(yè)中的應(yīng)用[J];生物技術(shù)通報(bào);1996年05期

10 張華;姜英華;胡白石;劉鳳權(quán);許志剛;;利用PCR技術(shù)專化性檢測水稻細(xì)菌性條斑病菌[J];植物病理學(xué)報(bào);2008年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 馮義國;肖生祥;譚升順;陳慶秀;袁媛;;AP-PCR鑒定真菌的方法建立及雙盲對照的初步研究[A];2001年中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

2 謝媛;李智;許丙根;許閃閃;翁文浩;;巢式PCR和β-D-1,3-葡聚糖試驗(yàn)在胸腹水深部真菌鑒定中的應(yīng)用評價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)管理專業(yè)委員會(huì)第六屆全國臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

3 馬菊元;;痰標(biāo)本中培養(yǎng)出真菌的特點(diǎn)及藥敏分析[A];第九屆西北五�。▍^(qū)）檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

4 種斌;徐小洪;楊超;陳海濤;蔣士君;;利用PCR技術(shù)快速檢測植物青枯菌[A];糧食安全與植保科技創(chuàng)新[C];2009年

5 帖利軍;顧龍君;蔣黎敏;趙金彩;陳靜;潘慈;董璐;陳靜;薛惠良;湯靜燕;王耀平;葉輝;;流式細(xì)胞技術(shù)與PCR技術(shù)聯(lián)用篩選兒童急性淋巴細(xì)胞白血病微量殘留病標(biāo)記[A];西北五�。▍^(qū)）第六屆兒科學(xué)術(shù)交流大會(huì)論文匯編[C];2008年

6 杜濤峰;韓文瑜;;PCR技術(shù)中樣品預(yù)處理方法研究進(jìn)展[A];首屆中國獸藥大會(huì)——獸醫(yī)生物制品學(xué)、獸醫(yī)微生物學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文集（2008）[C];2008年

7 劉雅娟;田義新;王英來;夏端明;崔永柱;張明遠(yuǎn);;紅參貯藏條件的優(yōu)化及感染真菌的種類鑒定[A];全國第9屆天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

8 馬s

本文編號(hào)：2716228