【摘要】：為了探究非豆科植物泡桐與微生物共生固氮體系,對泡桐根瘤內生細菌的分離培養(yǎng)條件及其系統發(fā)育地位進行初步研究。對從廣西欽州市和南寧市2處地點采集的白花泡桐(Paulownia fortunei(Seem.)Hemsl)根瘤上分離、純化獲得的根瘤內生細菌菌株,進行了傳統生理生化特性、生長適應性、回接試驗,并對16SrDNA全序列以及固氮nifA基因片段序列進行了測定和系統發(fā)育分析。研究結果如下:1.經分離純化共獲得21株泡桐根瘤內生細菌菌株,從菌體的形態(tài)特征來看,除菌株PG-7外,其余菌株均為桿狀,革蘭氏染色均為陰性,所有菌株均無芽孢,有鞭毛,33%的菌株有莢膜,這些菌株的形態(tài)與根瘤菌有許多相似性。從生理生化特征的鑒定來看,不同菌株之間存在著較明顯的差異。3-酮基乳糖試驗均呈陰性,10%的菌株可以水解淀粉,90%的菌株都能利用檸檬酸鹽,33%的菌株能還原硝酸鹽,大部分菌株表現牛肉膏蛋白胨的陽性反應,B.T.B反應試驗中95%的菌株均產酸。多數供試菌株能不同程度地利用KNO3和(NH4)2HPO4兩種氮源,有95%的菌株能利用硝酸鹽,有90%的菌株能利用銨鹽,絕大部分菌株都能在含有碳源的培養(yǎng)基上生長良好。2.泡桐根瘤內生細菌的最適生長溫度為30℃左右,多數菌株不能耐高溫和低溫。耐酸堿的范圍較寬,有48%的菌株能在pH值為4.0～9.0的條件下生長,具有較強的耐堿性,耐酸能力相對較差。耐鹽能力較好,有81%的菌株能在NaC1為2.0%的濃度下生長。大部分供試菌株對Sm和Cm抗性最強,而對Tc和Gm無抗性,不同菌株對抗菌素的抗性有較大差異。3.回接結瘤試驗中,接種9株根瘤內生菌株的試管幼苗均未結瘤,但在盆栽試驗中對泡桐幼苗的生長有明顯的促進作用。不同的根瘤內生細菌對植株的促生效應有明顯差異,接種菌株PG-9的幼苗株高和地徑生長量為最高。4.通過16SrDNA全序列分析,可將21株供試菌株分為6個細菌屬,分別為根瘤菌屬(Rhizobium)、土壤桿菌屬(Agrobacterium)、草螺菌屬(Herbaspirillum)、伯克氏菌屬(Burkholderia)、殼聚糖酶產生菌屬(Mitsuaria)和鞘脂菌屬(Sphingobium)。其中根瘤菌處于優(yōu)勢地位,有67%的菌株都是根瘤菌,說明了泡桐根瘤內生細菌具有豐富地遺傳多樣性。5.對供試菌株的nifA基因片段進行了擴增和測序,通過比對分析得出,菌株PG-7與伯克氏菌屬的nifA基因有97%的相似性,而其余菌株與根瘤菌屬的nifA基因均有普遍相似性,與參比菌株相似性均在95%至以上,最高達到99%。
【圖文】：

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蘭氏（ＰＧ－７）邋；邋Ｂ：鞭毛（ＰＧ－４）邋；邋Ｃ：莢膜（ＰＧ－８）邋；邋Ｄ：芽孢（ＰＧ－３）逡逑Ａ：邋Ｇｒａｍ邋（ＰＧ－７）；邋Ｂ：邋Ｆｌａｇｅｌｌａ邋（ＰＧ－４）；邋Ｃ：邋Ｃａｐｓｕｌｅ邋（ＰＧ－８）；邋Ｄ：邋Ｓｐｏｒｅ邋（ＰＧ－３）逡逑圖３分離菌株形態(tài)學特征逡逑Ｆｉｇ．邋３邋Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ邋ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ邋ｏｆ邋ｉｓｏｌａｔｅｄ邋ｓｔｒａｉｎｓ逡逑
【學位授予單位】：廣西大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S792.43

【參考文獻】

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1 丁文s，

本文編號：2694765