【摘要】：北碚榕(Ficus beipeiensis S.S Chang)隸屬桑科榕屬無花果亞屬,喬木,雌雄異株,現(xiàn)有野生植株5株(4雌1雄)。重慶特有,分布于重慶市北碚區(qū),生于海拔300-500 m石灰?guī)r陡壁及巖下較陰濕的地方。自然條件下,北碚榕傳粉小蜂缺乏,結(jié)實(shí)率低,種子難以萌發(fā),故種群數(shù)量稀少,生存現(xiàn)狀極危。2004年被列入《中國物種紅色名錄》,2015年被列入重慶市重點(diǎn)保護(hù)野生植物名錄。北碚榕四季常綠,冠大濃郁,抗逆性強(qiáng),是園林綠化和地山造林的優(yōu)良樹種�！臻�1號(hào)’北碚榕是2014年通過重慶市審定的林木新品種。迄今為止,關(guān)于北碚榕的繁殖研究有扦插繁殖、種子繁殖和組培離體繁殖。扦插繁殖既傷害母樹,成活率又低;種子繁殖存在成熟種子數(shù)量少、萌發(fā)困難等問題;原有組培繁殖體系存在叢芽繁殖系數(shù)較低、內(nèi)生菌污染和試管苗根系發(fā)育不良等問題。要實(shí)現(xiàn)北碚榕的離體快速繁殖,必須克服上述主要問題。為此,本試驗(yàn)以‘碚榕1號(hào)’無菌苗為材料,通過若干技術(shù)攻關(guān),建立了北碚榕的離體快速繁殖體系,為其種苗的規(guī)�；a(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.優(yōu)良叢芽繼代培養(yǎng)基的篩選通過增加細(xì)胞分裂素、生長素種類和擴(kuò)大培養(yǎng)基組分配伍范圍,篩選獲得了北碚榕優(yōu)良的叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基和叢芽繼代培養(yǎng)基。試驗(yàn)結(jié)果表明:最佳叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.02 mg·L~(-1)TDZ,頂芽在該培養(yǎng)基中培養(yǎng)30 d,叢芽誘導(dǎo)率為100%,而增殖倍數(shù)達(dá)23.67,比原叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基顯著提高61.35%,且叢芽生長好,葉大、莖粗。在最佳叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,頂芽15d左右發(fā)生不定芽,隨后增殖,30 d后形成叢芽。最佳叢芽繼代培養(yǎng)基為MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA,連續(xù)繼代6次,1-6代叢芽平均繁殖系數(shù)達(dá)11.20,最高代次的繁殖系數(shù)為6.5,分別比原叢芽繼代培養(yǎng)基顯著提高12.07%和34.94%,且叢芽生長良好,葉綠、莖長。2.繼代叢芽褐化現(xiàn)象的防治將北碚榕無菌苗的葉柄接種到含不同濃度抗褐化劑Vc(0.5、1.0、2.0 mg·L~(-1))、Na_2S_2O_3(0.5、1.0、2.0 mg·L~(-1))和吸附劑活性炭(2、3、4 mg·L~(-1))的培養(yǎng)基中培養(yǎng)30 d,記錄培養(yǎng)物的褐化程度及生長情況,初步獲得幾個(gè)抗褐化培養(yǎng)基。將繼代3次以上的不定芽接入初選的幾個(gè)抗褐化培養(yǎng)基中培養(yǎng),測定叢芽醌類物質(zhì)含量(吸光度)和多酚氧化酶活力,篩選獲得繼代叢芽最佳抗褐化培養(yǎng)基。試驗(yàn)結(jié)果表明:所選不同濃度的抗褐化劑都能不同程度地抑制北碚榕叢芽褐化。培養(yǎng)基未添加抗褐化劑時(shí),繼代叢芽在第3代開始褐化,隨著繼代次數(shù)增加,褐化程度逐代加深。添加1 mg·L~-11 V_C后,叢芽褐化現(xiàn)象得到明顯改善,至5、6代叢芽才出現(xiàn)輕微褐化,叢芽中醌類物質(zhì)含量和多酚氧化酶活力比對照分別降低了48.65%和57.43%,且叢芽生長良好。因此,北碚榕繼代叢芽的最佳抗褐化培養(yǎng)基為添加1 mg·L~-11 V_C的叢芽繼代培養(yǎng)基,即:MS+1.0 mg·L~-11 6-BA+1 mg·L~(-1) V_C。3.繼代叢芽內(nèi)生菌問題的克服將不定芽接入含不同濃度抑菌劑(0.05、0.08、0.1 g·L~(-1)益培靈;100、200、300 g·L~-11 Car;0.05%、0.08%、0.10%PPM)的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計(jì)抑菌劑對不定芽內(nèi)生菌的抑制效果和不定芽的生長情況。通常情況下,北碚榕不定芽至第3代開始出現(xiàn)內(nèi)生菌。本試驗(yàn)結(jié)果表明:添加不同濃度抑菌劑后,內(nèi)生菌的滋生受到不同程度抑制。其中,添加0.08%PPM時(shí),不定芽的內(nèi)生菌被有效控制,且叢芽生長良好。4.不定芽的兩段生根北碚榕不定芽采用一般方法生根時(shí),所得不定根多為棒狀根,根系不發(fā)達(dá),移栽成活率較低。本試驗(yàn)以北碚榕不定芽為外植體,采用兩段生根法生根(在瓊脂培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定根發(fā)生,在近黑暗、多孔隙的基質(zhì)中完成根系發(fā)育),并與一般生根法相比較。試驗(yàn)結(jié)果表明:二者生根率均為100%。但與一般生根法相比,兩段生根所得生根苗的根尖數(shù)、總根長、根總體積和根平均直徑分別提高301.42%、27.85%、123.53%和9.68%;生根苗的株高和葉片增量分別提高307.89%和83.33%,葉綠素含量和硝酸還原酶活性分別提高27.90%和69.49%;生根苗的移栽成活率(100%)、移栽苗的株高和葉片增量分別提高15.00%、41.12%和23.81%,且二者差異顯著。試驗(yàn)結(jié)果證明,兩段生根法顯著優(yōu)于一般生根法。其試管苗根系發(fā)達(dá),生長狀態(tài)更佳,移栽成活率更高。5.優(yōu)質(zhì)苗木的培育采用可降解無紡布育苗袋育苗,研究不同育苗基質(zhì)[品氏營養(yǎng)土、品氏營養(yǎng)土:蛭石(1:1)、品氏營養(yǎng)土:蛭石:珍珠巖(2:1:1)、林下腐殖土以及蛭石:珍珠巖(體積比1:1)]、不同追施肥料對北碚榕苗木生長及移栽成活率的影響。同時(shí),研究苗木大小(株高、葉齡)對苗木移栽成活率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:最適育苗基質(zhì)為品氏營養(yǎng)土,其中試管苗的移栽成活率最高,達(dá)96.29%;株高增加1.90 cm,葉片增加2.75枚,分別比次者(林下腐殖土)提高了65.22%和10.00%。最佳葉面追肥為1%尿素,噴施30 d后,株高增加1.94 cm,葉片增加3.2枚,幼苗生長狀況最好。出圃苗木的適宜高度為7~9 cm(葉齡5~8),移栽土壤30 d后,成活率達(dá)96.29%,株高增加1.4 cm,葉片增加3.4枚,3項(xiàng)指標(biāo)均顯著高于其較小苗木。
【圖文】：

二者之間差異顯著（P<0.05）。同時(shí)，觀察后期叢芽的生長，，B1培養(yǎng)基中叢芽生長最好，葉大、莖粗壯（圖1-C）。因此，B1培養(yǎng)基（MS+0.02 mg·L-1TDZ）為本試驗(yàn)篩選獲得的最佳叢芽誘

*253035404550化酶活力ity/U.g-1B*0.40.50.60.7合物吸光度值valueofQuinones A圖 2 北碚榕褐化情況及防褐化劑對其生長的影響A1、B1: 未添加防褐化劑的愈傷組織（A1:10d; B1:30d）;A2、B2: 添加 1 mg·L-1VC的愈傷組織（A2:10d; B2:30d）C1、D1: 未添加 1 mg·L-1VC的不定芽生長狀況; C2、D2: 添加 1 mg·L-1VC的不定芽生長狀況Fig. 2 Stem tip culture and rapid propagation of Ficus beipeiensisA1、B1: Callus without adding anti browning agent; A2、B2: Callus adding 1 mg·L-1VC（A1A2:10 d; B2B2:30 d）C1、D1: Growth of adventitious buds without 1 mg·L-1VC; C2、D2: Growth of adventitious buds with 1 mg·L-1Vc4.2.3 抗褐化劑對北碚榕叢芽生理特性的影響取對照培養(yǎng)基和最佳抗褐化培養(yǎng)基（1 mg·L-1VC）中培養(yǎng)時(shí)間相同的不定芽，分別測定其醌類物質(zhì)吸光值和多酚氧化酶活力。
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S792.99

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2640404