【摘要】：白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuillemin是一種半知菌類的廣譜性昆蟲病原真菌。它寄主的范圍非常廣泛,并且具有很強(qiáng)的感染能力、很好擴(kuò)散流行性、不污生態(tài)染環(huán)境的特點(diǎn),同時(shí)它生產(chǎn)簡單,原料非常經(jīng)濟(jì)。隨著過度的使用化學(xué)農(nóng)藥,環(huán)境問題越來越嚴(yán)重,作為主要的生防菌劑之一,白僵菌在生產(chǎn)應(yīng)用中越來越受到人們的重視。白僵菌是一種真菌性殺蟲劑,為了提高其殺蟲效果,本文針對球孢白僵菌BbIII進(jìn)行復(fù)合誘變選育、誘變株發(fā)酵條件優(yōu)化、及其林間防效研究。主要結(jié)果如下:(1)采用紫外線和微波對球孢白僵菌BbIII進(jìn)行復(fù)合誘變,通過產(chǎn)孢量、幾丁質(zhì)酶活指標(biāo)篩選我們得到3株優(yōu)良菌株,測試了 3株優(yōu)良菌株對油茶象甲試蟲的毒力效果。篩選獲得最佳誘變菌株CB-27,其產(chǎn)孢量是原菌株的2.81倍,幾丁質(zhì)酶活力也明顯高于原菌株,高活力幾丁質(zhì)酶產(chǎn)生菌株CB-27對油茶象甲均表現(xiàn)出了一定的致病力,隨著處理時(shí)間的延長,校正死亡率逐漸真大。處理第6天時(shí),CB-27菌株對油茶象甲的校正死亡率達(dá)86.83%,明顯高于出發(fā)菌株。(2)優(yōu)化球孢白僵菌CB-27發(fā)酵的條件。用單因素實(shí)驗(yàn)的方法測出其各個(gè)因子的最適范圍。根據(jù)最佳篩選實(shí)驗(yàn)確定的各因素的作用效果設(shè)計(jì)了最陡爬坡實(shí)驗(yàn),對玉米粉濃度、含水量、接種量、發(fā)酵溫度進(jìn)行四因素五水平響應(yīng)分析。通過響應(yīng)面分析,優(yōu)化球孢白僵菌CB-27固態(tài)發(fā)酵的條件,得出固態(tài)發(fā)酵最佳條件是:玉米粉8.21 g·L-1,水分38.47%,接種量10.31%,發(fā)酵溫度25.35℃,在此條件下球孢白僵菌CB-27的產(chǎn)孢量達(dá)到了11.853(×1010Spores·g-1),較優(yōu)化前提高了 3倍。(3)通過林間施菌、籠套法測定防治效果,調(diào)查防治后油茶植株的蟲口數(shù)和油茶果新增受害率,綜合評價(jià)白僵菌林間防治油茶象甲的效果。通過測定菌株BbIII、紫外誘變株Uv7和復(fù)合誘變株CB27的林間防效,進(jìn)一步確定了復(fù)合誘變菌株CB27對油茶蟲害(油茶象甲)具有高效的防治作用。結(jié)果表明在施菌6天后,C3處理(108個(gè)·ml-1的CB27)的油茶象甲死亡率達(dá)到了 83.4%,防治效果為79.9%,蟲口減退率為81.7%。防治后各個(gè)處理的蟲口數(shù)和油茶果新增受害明顯下降,其中C1、C2、C3下降最多,處理以后的蟲口數(shù)分別是6.1、4.1、4.3頭·株-1;其中C1、C2和C3在防治期間的新增受害率為5.2%、5.3%和5.0%,均遠(yuǎn)低于對照組CK的15.2%,說明防治效果十分顯著。其中相同濃度下防治效果和感染率都存在這樣的關(guān)系:CBA,在都使用CB27的情況下,C3(108個(gè)·ml-1)C2(107個(gè)·ml-1)C(106個(gè)·ml-1),進(jìn)一步說明了復(fù)合誘變后的菌株對油茶蟲害(油茶象甲)具有更好的防治作用。
【圖文】：

固體培養(yǎng)基的上面，每樣做３個(gè)皿，８ｄ后對｜Ｗ落數(shù)進(jìn)ｆｊ？統(tǒng)計(jì)，取它們的平均位逡逑來計(jì)算誘變致死率，并用孢子計(jì)數(shù)法檢測產(chǎn)孢能力，ｉｈ算出正突變率，誘變時(shí)間逡逑ｂ致死率還有正突變率之間的關(guān)系見圖２．１。逡逑表２．１紫外誘變時(shí)間對致死率和正突變豐的影響逡逑Ｔａｂｌｅ２．１邋Ｅｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆ邋ＵＶ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｔｉｍｅ邋ｏｎ邋Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ邋ａｎｄ邋Ｐｏｓｉｔｉｖｅ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｒａｔｅ逡逑照射時(shí)間（分）邐５邐１０邐１５邐２０邐２５邐３０逡逑致死率（％）邐４０．５邐４６．３邐５１．２邐７８．６邐８２．２邐９２．６逡逑．ｌｌ．：突變率．（％）邐１６．７邐１９．６邐２２．３邐２７．６邐２０．４邐１０．７逡逑１００逡逑ａ？邋９０逡逑８０邋邐邐邐逡逑幺邋７0逡逑＾６０逡逑－４０邐９ｒ－逡逑Ｓ邋３０逡逑￥邋２０邋邐邐邐邐？逡逑、一邋１０逡逑０逡逑０邐５邐１０邐１５邐２０邐２５邐３０邐３５逡逑時(shí)間（ｍｉｎ邋）逡逑一？一致死率（％）邐—？一正哭變率（％）逡逑圖２．１紫外誘變時(shí)間對致死率和ｉＨ突變率的影響逡逑Ｆｉｇ２．邋ｌＥｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆＵＶ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｔｉｍｅ邋ｏｎ邋Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ邋ａｎｄ邋ｌ＾ｓｉｔｉｖｃ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｒａｔｅ逡逑１９逡逑

３＿２．３不同的接種量對ＣＢ２７產(chǎn)抱量的影響逡逑液體接種量和產(chǎn)孢量相關(guān)性并不是那么明顯，以固體培養(yǎng)料的１５％的接種量逡逑為最佳（見圖３．３），其產(chǎn)孢量稍稍高于其他的接種量，整體情況來看相對都是逡逑比較平穩(wěn)的。產(chǎn)生這現(xiàn)象的原因有以下兩點(diǎn)：一是接種量太少無法滿足其生長所逡逑Ｖ后需求，？也有可能是接種量太多孢子密度太大，，從而導(dǎo)致空問的不足，也會(huì)影響逡逑孢Ｔ的萌發(fā)生長。這里選擇最佳接種量為１５％。逡逑＿邋｜｜｜逡逑Ｉ．．Ｉ邋ｌｌ逡逑１０邐１５邐２０邐２５邐３０逡逑接種量／（％｝逡逑圖３．３．接種量濃度對ＣＢ２７產(chǎn)孢量的影響逡逑Ｆｉｇ３．３．Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ邋ｏｎ邋ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ＣＢ２７逡逑３．２．４不同的發(fā)酵溫度對ＣＢ２７產(chǎn)孢量的影響逡逑在前面幾步最佳條件下，然后不Q嫷奈露冉蟹⒔�，结果（见哇E常矗５卞義戲⒔偷奈露鵲陀冢玻

本文編號：2610932