發(fā)布時(shí)間：2023-02-16 08:07

　　根結(jié)線蟲(Meloidogyne spp.)的寄主范圍廣、危害重,每年對(duì)農(nóng)作物造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,而對(duì)根結(jié)線蟲病的防治措施之一是利用有益微生物進(jìn)行生物防治。木霉可通過多種機(jī)制防治根部病害、促進(jìn)植株生長(zhǎng)和發(fā)育及誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性,因此常被作為植物共生體。為了研究鉤狀木霉菌株T21(Trichoderma hamatum T21)的內(nèi)生性,開發(fā)了該菌的PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體遺傳轉(zhuǎn)化體系。對(duì)T21進(jìn)行GFP標(biāo)記,篩選出能穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)化菌株GFP_T21。GFP_T21的生長(zhǎng)勢(shì)、生防南方根結(jié)線蟲效果與T21野生型相比均無顯著性差異。因此,GFP_T21為研究鉤狀木霉的生防作用機(jī)理提供了重要材料。鉤狀木霉防治根結(jié)線蟲的作用機(jī)理研究顯示:T21對(duì)根結(jié)線蟲卵無寄生作用,發(fā)酵液對(duì)南方根結(jié)線蟲無致死作用。T21生防番茄根結(jié)線蟲誘導(dǎo)抗性的分根試驗(yàn)結(jié)果表明:CK處理番茄每株根結(jié)數(shù)平均為60.0個(gè),T21處理每株番茄的根結(jié)數(shù)為16.1個(gè),T21處理和CK處理之間存在極顯著性差異(P<0.0001,α=0.01)。初步說明鉤狀木霉菌株T21可通過誘導(dǎo)...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 木霉菌簡(jiǎn)介
    1.2 木霉對(duì)根結(jié)線蟲的生防作用
        1.2.1 根結(jié)線蟲的危害
        1.2.2 木霉生防根結(jié)線蟲的研究進(jìn)展
    1.3 木霉對(duì)其他病害的生防作用
    1.4 木霉生防作用的機(jī)制
        1.4.1 木霉菌的多樣性
        1.4.2 木霉菌的抗生和重寄生作用
        1.4.3 木霉菌在植物根際的定殖
        1.4.4 木霉的促生作用
        1.4.5 木霉誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性
    1.5 本研究的背景、目的意義、主要內(nèi)容和技術(shù)路線
        1.5.1 本研究的背景和目的意義
        1.5.2 本研究的主要內(nèi)容
        1.5.3 技術(shù)路線
第二章 鉤狀木霉菌綠色熒光蛋白標(biāo)記體系建立
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 潮霉素B抑菌濃度篩選
        2.1.3 T21原生質(zhì)體制備方法
        2.1.4 T21原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
        2.1.5 T21轉(zhuǎn)化子的篩選
        2.1.6 GFP_T21的PCR鑒定
        2.1.7 GFP_T21的生長(zhǎng)速度測(cè)定
        2.1.8 GFP_T21的盆栽試驗(yàn)
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 潮霉素B抑菌濃度篩選
        2.2.2 GFP_T21的熒光檢測(cè)
        2.2.3 GFP_T21的PCR檢測(cè)
        2.2.4 GFP_T21的生長(zhǎng)速度測(cè)定
        2.2.5 GFP_T21的盆栽試驗(yàn)
    2.3 結(jié)論與討論
第三章 鉤狀木霉防治根結(jié)線蟲的作用機(jī)理
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 T21對(duì)線蟲卵的寄生
        3.1.3 T21發(fā)酵液對(duì)南方根結(jié)線蟲的作用
        3.1.4 GFP_T21在擬南芥和黃瓜根部的定殖
        3.1.5 鉤狀木霉菌株T21生防番茄根結(jié)線蟲病的分根試驗(yàn)
        3.1.6 擬南芥突變體sid2-2 的鑒定
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 T21對(duì)線蟲卵的寄生
        3.2.2 T21發(fā)酵液對(duì)南方根結(jié)線蟲的作用
        3.2.3 GFP_T21在擬南芥和黃瓜根部的定殖
        3.2.4 鉤狀木霉菌株T21生防番茄根結(jié)線蟲病的分根試驗(yàn)
        3.2.5 擬南芥突變體sid2-2 的鑒定
    3.3 結(jié)論與討論
第四章 T21生物菌肥對(duì)黃瓜生長(zhǎng)及根結(jié)線蟲病的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 盆栽試驗(yàn)
        4.1.3 溫室小區(qū)試驗(yàn)
        4.1.4 田間測(cè)產(chǎn)試驗(yàn)
        4.1.5 數(shù)據(jù)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 T21生物菌肥對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病的防治效果
        4.2.2 T21生物菌肥對(duì)黃瓜長(zhǎng)勢(shì)及產(chǎn)量的影響
    4.3 結(jié)論與討論
第五章 全文結(jié)論
附錄
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3743849