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熒光PCR法檢測痰標本中肺炎克雷伯菌及其產ESBL_s菌株的耐藥性分析

發(fā)布時間:2017-09-07 10:40

  本文關鍵詞:熒光PCR法檢測痰標本中肺炎克雷伯菌及其產ESBL_s菌株的耐藥性分析


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【摘要】:目的:比較分析細菌培養(yǎng)及熒光PCR法兩種不同方法檢測痰標本中肺炎克雷伯菌的差異,為臨床提供一種快速準確檢測肺炎克雷伯菌的方法——熒光PCR法;調查萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院痰標本中肺炎克雷伯菌的超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)檢出率以及產ESBLS株的耐藥情況,指導臨床合理使用抗菌藥物。方法:(1)對萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院68例疑似肺炎克雷伯菌感染病人采集送檢的痰標本,采用細菌培養(yǎng)法及核酸(熒光PCR法)檢測,結果進行對比統計分析。同時對熒光PCR法的特異性和靈敏度進行研究。(2)收集萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院2014年7月至12月臨床分離肺炎克雷伯菌的169例痰標本,對產ESBLs肺炎克雷伯菌和非產ESBLs肺炎克雷伯菌的藥敏結果進行對比分析,了解產ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥情況。結果:(1)在68例痰標本中肺炎克雷伯菌檢出的結果,常規(guī)細菌培養(yǎng)法檢出陽性33例,陰性35例,陽性率48.53%;熒光PCR法檢出陽性49例,陰性19例,陽性率72.06%。對肺炎克雷伯菌標本DNA檢測得擴增產物,對非肺炎克雷伯菌無交叉反應,其檢測靈敏度為1×103copies/ml。(2)169例檢出肺炎克雷伯菌的痰標本中,分離出產ESBLs陽性株76株,其陽性率為44.97%;肺炎克雷伯菌產ESBLs株與非產ESBLs株對14種抗生素耐藥情況的比較:兩者均為檢測對亞胺培南的敏感的菌株,但對其他抗生素產ESBLs株的耐藥率均高于非產ESBLs株。結論:(1)熒光PCR法檢出肺炎克雷伯菌的陽性率高于常規(guī)細菌培養(yǎng)法,具有很高的靈敏度和特異性,檢測時間短,能為臨床診斷提供及時準確的結果。(2)產ESBLs肺炎克雷伯菌耐藥情況嚴重,但對亞胺培南、美羅培南和哌拉西林/他唑巴坦呈現較高敏感性,可用于經驗用藥。
【關鍵詞】:肺炎克雷伯菌 細菌培養(yǎng)法 熒光PCR法 超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs) 耐藥率
【學位授予單位】:南昌大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R440
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • ABSTRACT5-9
  • 中英文縮略詞表9-10
  • 第一部分 熒光PCR法檢測痰標本中肺炎克雷伯菌10-18
  • 1、材料和方法10-14
  • 1.1 標本來源10
  • 1.2 儀器和試劑10-12
  • 1.2.1 主要儀器10-11
  • 1.2.2 主要試劑11-12
  • 1.3 方法12-14
  • 1.3.1 固體培養(yǎng)體系12
  • 1.3.2 常規(guī)細菌培養(yǎng)檢測肺炎克雷伯菌12
  • 1.3.3 核酸檢測(熒光PCR法)12-14
  • 1.3.4 特異性試驗14
  • 1.3.5 靈敏度試驗14
  • 1.4 統計學方法14
  • 2、結果14-16
  • 2.1 標準品的曲線繪制14-15
  • 2.2 肺炎克雷伯菌檢出情況15-16
  • 2.3 特異性試驗16
  • 2.4 靈敏度試驗16
  • 3、討論16-18
  • 第二部分 產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐藥情況分析18-25
  • 1、材料與方法18-21
  • 1.1 標本來源18-19
  • 1.2 主要儀器和試劑19
  • 1.3 方法19-21
  • 1.3.1 細菌分離鑒定與藥敏試驗19-20
  • 1.3.2 ESBLs檢測20-21
  • 2、結果21-22
  • 2.1 ESBLs株檢出率21
  • 2.2 耐藥情況21-22
  • 3、討論22-25
  • 致謝25-26
  • 參考文獻26-28
  • 綜述 產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌的研究28-35
  • 參考文獻33-35

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