本文關(guān)鍵詞：構(gòu)建PDCD5基因真核表達(dá)載體及電轉(zhuǎn)染BGC823細(xì)胞的研究

  更多相關(guān)文章： PDCD基因 pcDNA.~+表達(dá)載體 電轉(zhuǎn)染 BGC細(xì)胞系

【摘要】：目的構(gòu)建PDCD5基因真核表達(dá)載體,并電轉(zhuǎn)染BGC823細(xì)胞,獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞。方法設(shè)計(jì)合成PDCD5基因片段,將其插入經(jīng)EcoRⅠ和XhoⅠ雙酶切的pcDNA3.1~+表達(dá)載體,菌落PCR和基因測(cè)序進(jìn)行鑒定。重組質(zhì)粒電轉(zhuǎn)染BGC823細(xì)胞,G418篩選數(shù)周后PCR鑒定穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞。結(jié)果重組質(zhì)粒經(jīng)菌落PCR測(cè)序分析表明,PDCD5基因序列準(zhǔn)確插入預(yù)期位置,且序列正確。重組質(zhì)粒成功電轉(zhuǎn)染BGC823細(xì)胞,并整合入細(xì)胞基因組DNA。結(jié)論成功構(gòu)建了PDCD5基因真核表達(dá)載體,并整合進(jìn)BGC823細(xì)胞基因組,為研究PDCD5基因的功能及胃癌的基因治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： PDCD基因 pcDNA.~+表達(dá)載體 電轉(zhuǎn)染 BGC細(xì)胞系
【基金】：黑龍江省教育廳科研項(xiàng)目(12531797)
【分類號(hào)】：R735.2;R450
【正文快照】： 程序性細(xì)胞死亡因子5(programmed cell death 5,PDCD5)原名為TFAR19,由北京大學(xué)人類疾病基因中心從白血病細(xì)胞株TF-1細(xì)胞中克隆得到,具有促進(jìn)多種細(xì)胞凋亡和抑制增殖的效應(yīng),其異常表達(dá)與多種腫瘤及自身免疫性疾病有相關(guān)性[1]。研究表明,PDCD5基因在膠質(zhì)瘤細(xì)胞[2]、前列腺癌細(xì)

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本文編號(hào)：720524