本文關鍵詞：構建PDCD5基因真核表達載體及電轉(zhuǎn)染BGC823細胞的研究

  更多相關文章： PDCD基因 pcDNA.~+表達載體 電轉(zhuǎn)染 BGC細胞系

【摘要】：目的構建PDCD5基因真核表達載體,并電轉(zhuǎn)染BGC823細胞,獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞。方法設計合成PDCD5基因片段,將其插入經(jīng)EcoRⅠ和XhoⅠ雙酶切的pcDNA3.1~+表達載體,菌落PCR和基因測序進行鑒定。重組質(zhì)粒電轉(zhuǎn)染BGC823細胞,G418篩選數(shù)周后PCR鑒定穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞。結(jié)果重組質(zhì)粒經(jīng)菌落PCR測序分析表明,PDCD5基因序列準確插入預期位置,且序列正確。重組質(zhì)粒成功電轉(zhuǎn)染BGC823細胞,并整合入細胞基因組DNA。結(jié)論成功構建了PDCD5基因真核表達載體,并整合進BGC823細胞基因組,為研究PDCD5基因的功能及胃癌的基因治療提供實驗基礎。
【作者單位】： 齊齊哈爾醫(yī)學院基礎醫(yī)學院;
【關鍵詞】： PDCD基因 pcDNA.~+表達載體 電轉(zhuǎn)染 BGC細胞系
【基金】：黑龍江省教育廳科研項目(12531797)
【分類號】：R735.2;R450
【正文快照】： 程序性細胞死亡因子5(programmed cell death 5,PDCD5)原名為TFAR19,由北京大學人類疾病基因中心從白血病細胞株TF-1細胞中克隆得到,具有促進多種細胞凋亡和抑制增殖的效應,其異常表達與多種腫瘤及自身免疫性疾病有相關性[1]。研究表明,PDCD5基因在膠質(zhì)瘤細胞[2]、前列腺癌細

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 孫輝,王金國,付言濤,何爾斯泰;小鼠肌肉內(nèi)綠色熒光蛋白基因電轉(zhuǎn)染[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2005年02期

2 孫輝,王金國,付言濤,欒杉,鄭澤霖;荷瘤裸鼠肌肉內(nèi)基因電轉(zhuǎn)染對移植瘤的作用[J];中國普外基礎與臨床雜志;2005年01期

3 唐巖;唐軍民;戰(zhàn)軍;劉影;常昕瑩;王國濤;單鐵英;蘇安英;;樹突狀細胞電轉(zhuǎn)染的優(yōu)化條件及影響因素[J];解剖學報;2007年02期

4 鄧文斌;陳剛;莊利東;向理賢;吳茜;張薇;;hGM-CSF基因活體電轉(zhuǎn)染小鼠中子輻射損傷后細胞凋亡流式分析[J];四川醫(yī)學;2009年08期

5 徐珊;杜沖;馬艷民;謝宏俊;高楊;石琦;王新陽;賀大林;郭鵬;;人永生化表皮細胞HaCaT電轉(zhuǎn)染條件的優(yōu)化[J];西安交通大學學報(醫(yī)學版);2014年04期

6 張禾璇;何燕;張婷;王嬋娟;單可人;官志忠;;HepG2細胞電轉(zhuǎn)染條件的優(yōu)化[J];山東醫(yī)藥;2013年42期

7 李園園;高美華;叢蓓蓓;王麗娜;王冰;張蓓;李營;梁潔;;活化/抑制CD59對T淋巴細胞增殖的影響[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2014年19期

8 ;[J];;年期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李煒杰;利用CRISPR/Cas9敲除綿羊成纖維細胞MSTN基因的研究[D];石河子大學;2015年

2 曹善仁;核糖體打靶載體電轉(zhuǎn)染肝細胞條件的優(yōu)化[D];中南大學;2007年

，

本文編號：720524