本文關(guān)鍵詞：食品中赭曲霉毒素A的免疫阻抗傳感器建立的研究

  更多相關(guān)文章： 赭曲霉毒素A 氧化石墨烯 納米復(fù)合物 免疫傳感器

【摘要】：赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)污染廣泛,毒性強(qiáng),主要存在于農(nóng)產(chǎn)品中,與人類健康有著密切的關(guān)系。由于OTA的巨大危害,世界各國(guó)加強(qiáng)了對(duì)于食品中OTA含量的嚴(yán)格管控。高效液相色譜法和酶聯(lián)免疫吸附法是常見(jiàn)檢測(cè)OTA的方法,但是這兩種檢測(cè)技術(shù)都存在一定的缺陷,如檢測(cè)成本高,操作過(guò)程繁瑣且需專業(yè)人士操作等。本研究為了解決這些問(wèn)題,設(shè)計(jì)了檢測(cè)靈敏,快速和操作簡(jiǎn)便的OTA非標(biāo)記免疫阻抗傳感器。本研究通過(guò)Hummer方法制備氧化石墨烯,利用一步電沉積法制備層狀結(jié)構(gòu)還原氧化石墨烯/金納米復(fù)合物修飾的玻碳電極,金納米穿插于石墨烯片層中,將石墨烯架空,有效增大了復(fù)合物的比表面積。隨后采用EDC/NHS分別將抗OTA駝源性納米抗體和抗OTA單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)于修飾電極表面,制備了OTA免疫阻抗傳感器。1基于OTA的單克隆抗體免疫傳感器的研究1.1采用Hummer方法成功制備得到氧化石墨烯,其厚度在1 nm左右。通過(guò)一步電沉積方法制備層狀結(jié)構(gòu)的還原氧化石墨烯/納米金復(fù)合物修飾電極,對(duì)沉積條件的進(jìn)行優(yōu)化,結(jié)果為氧化石墨烯濃度0.5 mg/m L,氯金酸的濃度是1m M,循環(huán)伏安法沉積圈數(shù)為5圈。1.2采用循環(huán)伏安法將還原氧化石墨烯/金納米復(fù)合物一步沉積至電極表面,并共價(jià)偶聯(lián)抗OTA單克隆抗體,制備了OTA免疫阻抗傳感器。該傳感器對(duì)OTA的檢測(cè)線性方程是y=194x+183.1(y是阻抗變化值ΔRet,x是OTA的濃度對(duì)數(shù),即log[OTA]),線性范圍0.5-20 ng/m L,最低檢測(cè)限為0.35 ng/m L,對(duì)陰性樣品加標(biāo)回收率75%-101%。2基于OTA的納米抗體免疫阻抗傳感器的研究2.1采用EDC/NHS將抗OTA納米抗體共價(jià)修飾于電極表面,通過(guò)優(yōu)化EDC與NHS的反應(yīng)濃度比為8:1,反應(yīng)時(shí)間50 min,建立的Nb-免疫阻抗傳感器,檢測(cè)線性方程是y=224x+546.5(y是阻抗變化值ΔRet,x是OTA的濃度對(duì)數(shù),即log[OTA])),線性范圍0.01-1 ng/m L,最低檢測(cè)限0.005 ng/m L,陰性樣品加標(biāo)回收率92%-99%,該傳感器檢測(cè)啤酒樣品的結(jié)果與ELISA檢測(cè)結(jié)果基本一致。2.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明修飾有納米抗體的傳感器靈敏度更好,有望繼續(xù)深入研究,為以后推廣快速檢測(cè)做好技術(shù)儲(chǔ)備。
【關(guān)鍵詞】：赭曲霉毒素A 氧化石墨烯 納米復(fù)合物 免疫傳感器
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：TP212
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 略縮語(yǔ)6-9
• 第1章 前言9-24
• 1.1 赭曲霉毒素A9-12
• 1.1.1 赭曲霉毒素A的理化性質(zhì)9-10
• 1.1.2 赭曲霉毒素A的毒性及限量標(biāo)準(zhǔn)10
• 1.1.3 赭曲霉毒素A的檢測(cè)方法10-12
• 1.2 電化學(xué)傳感器12-16
• 1.2.1 電化學(xué)傳感器基本原理12-13
• 1.2.2 電化學(xué)免疫傳感器原理及分類13-15
• 1.2.3 交流阻抗技術(shù)的免疫傳感器15-16
• 1.3 納米材料在免疫傳感器中的應(yīng)用16-20
• 1.3.1 石墨烯（Graphene，GR）16-17
• 1.3.2 納米金顆粒17-18
• 1.3.3 殼聚糖18-19
• 1.3.4 環(huán)糊精19-20
• 1.4 駝源性納米抗體20-22
• 1.4.1 駱駝重鏈抗體及VHH區(qū)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)20-21
• 1.4.2 VHH的理化性質(zhì)21-22
• 1.4.3 VHH的應(yīng)用22
• 1.5 本論文研究目的、意義和主要內(nèi)容22-24
• 1.5.1 研究目的及意義22-23
• 1.5.2 主要研究?jī)?nèi)容23-24
• 第2章 基于石墨烯/納米金復(fù)合材料構(gòu)建免疫阻抗傳感器檢測(cè)食品中赭曲霉毒素A24-38
• 2.1 前言24
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分24-28
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器24-25
• 2.2.2 氧化石墨烯的制備25-26
• 2.2.3 電沉積制備復(fù)合材料26-27
• 2.2.4 電沉積石墨烯/納米金條件優(yōu)化27
• 2.2.5 免疫阻抗傳感器標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立27-28
• 2.2.6 實(shí)際樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)28
• 2.2.7 免疫阻抗傳感器的特異性28
• 2.2.8 啤酒樣品中OTA含量的測(cè)定結(jié)果28
• 2.3 結(jié)果與討論28-37
• 2.3.1 氧化石墨烯的表征28-30
• 2.3.2 電沉積石墨烯和納米金30-33
• 2.3.3 電沉積條件的優(yōu)化33-35
• 2.3.4 免疫傳感器標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立35-36
• 2.3.5 加標(biāo)回收試驗(yàn)36
• 2.3.6 免疫傳感器的特異性36-37
• 2.3.7 啤酒樣品中OTA含量的檢測(cè)結(jié)果37
• 2.4 小結(jié)37-38
• 第3章 抗赭曲霉毒素A納米抗體免疫阻抗傳感器的制備及其應(yīng)用研究38-52
• 3.1 前言38
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分38-43
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器38-39
• 3.2.2 抗OTA納米抗體的表達(dá)與純化39-40
• 3.2.3 納米抗體效價(jià)的測(cè)定40-41
• 3.2.4 免疫傳感器的構(gòu)建41
• 3.2.5 修飾電極條件的優(yōu)化41-42
• 3.2.6 修飾電極的電化學(xué)表征42-43
• 3.2.7 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)43
• 3.2.8 市售啤酒中OTA含量的測(cè)定43
• 3.3 結(jié)果與討論43-51
• 3.3.1 納米抗體的誘導(dǎo)表達(dá)、純化及鑒定43-44
• 3.3.2 免疫阻抗傳感器的電化學(xué)表征44-45
• 3.3.3 修飾電極條件的優(yōu)化45-48
• 3.3.4 免疫阻抗傳感器標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立48-49
• 3.3.5 免疫阻抗傳感器的特異性49-50
• 3.3.6 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)50
• 3.3.7 啤酒樣品中OTA含量的測(cè)結(jié)果50-51
• 3.4 小結(jié)51-52
• 第4章 結(jié)論與展望52-53
• 4.1 結(jié)論52
• 4.2 展望52-53
• 致謝53-54
• 參考文獻(xiàn)54-58

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 ;納米中心石墨烯相變研究取得新進(jìn)展[J];電子元件與材料;2009年10期

2 ;石墨烯納米帶制備研究獲新進(jìn)展[J];電子元件與材料;2011年07期

3 張文毓;全識(shí)俊;;石墨烯應(yīng)用研究進(jìn)展[J];傳感器世界;2011年05期

4 沈熙磊;;科學(xué)家用石墨烯成功制備出石墨烷[J];半導(dǎo)體信息;2011年05期

5 沈熙磊;;美國(guó)研發(fā)新技術(shù)可人工合成高質(zhì)量石墨烯[J];半導(dǎo)體信息;2011年06期

6 吳琪樂(lè);;英科學(xué)家首次將石墨烯變?yōu)榻^緣體[J];半導(dǎo)體信息;2011年06期

7 鄭冬冬;;多國(guó)確定人工制造石墨烯指南[J];半導(dǎo)體信息;2012年04期

8 ;英研究顯示“神奇材料”石墨烯可自我修復(fù)[J];電子產(chǎn)品可靠性與環(huán)境試驗(yàn);2012年05期

9 康越;楚增勇;張東玖;張朝陽(yáng);;石墨烯衍生材料在憶阻器中的應(yīng)用[J];材料導(dǎo)報(bào);2013年07期

10 江安慶;;石墨烯或?qū)_擊半導(dǎo)體產(chǎn)業(yè)[J];半導(dǎo)體信息;2013年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 成會(huì)明;;石墨烯的制備與應(yīng)用探索[A];中國(guó)力學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)大會(huì)'2009論文摘要集[C];2009年

2 錢(qián)文;郝瑞;侯仰龍;;液相剝離制備高質(zhì)量石墨烯及其功能化[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第27屆學(xué)術(shù)年會(huì)第04分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2010年

3 張甲;胡平安;王振龍;李樂(lè);;石墨烯制備技術(shù)與應(yīng)用研究的最新進(jìn)展[A];第七屆中國(guó)功能材料及其應(yīng)用學(xué)術(shù)會(huì)議論文集（第3分冊(cè)）[C];2010年

4 趙東林;白利忠;謝衛(wèi)剛;沈曾民;;石墨烯的制備及其微波吸收性能研究[A];第七屆中國(guó)功能材料及其應(yīng)用學(xué)術(shù)會(huì)議論文集（第7分冊(cè)）[C];2010年

5 沈志剛;李金芝;易敏;;射流空化方法制備石墨烯研究[A];顆粒學(xué)最新進(jìn)展研討會(huì)——暨第十屆全國(guó)顆粒制備與處理研討會(huì)論文集[C];2011年

6 王冕;錢(qián)林茂;;石墨烯的微觀摩擦行為研究[A];2011年全國(guó)青年摩擦學(xué)與表面工程學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

7 趙福剛;李維實(shí);;樹(shù)枝狀結(jié)構(gòu)功能化石墨烯[A];2011年全國(guó)高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會(huì)論文摘要集[C];2011年

8 吳孝松;;碳化硅表面的外延石墨烯[A];2011中國(guó)材料研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

9 周震;;后石墨烯和無(wú)機(jī)石墨烯材料:計(jì)算與實(shí)驗(yàn)的結(jié)合[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第4分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年

10 周琳;周璐珊;李波;吳迪;彭海琳;劉忠范;;石墨烯光化學(xué)修飾及尺寸效應(yīng)研究[A];2011中國(guó)材料研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 姚耀;石墨烯研究取得系列進(jìn)展[N];中國(guó)化工報(bào);2009年

2 劉霞;韓用石墨烯制造出柔性透明觸摸屏[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

3 記者 王艷紅;“解密”石墨烯到底有多奇妙[N];新華每日電訊;2010年

4 本報(bào)記者 李好宇 張們捷(實(shí)習(xí)) 特約記者 李季;石墨烯未來(lái)應(yīng)用的十大猜想[N];電腦報(bào);2010年

5 證券時(shí)報(bào)記者 向南;石墨烯貴過(guò)黃金15倍 生產(chǎn)不易炒作先行[N];證券時(shí)報(bào);2010年

6 本報(bào)特約撰稿 吳康迪;石墨烯 何以結(jié)緣諾貝爾獎(jiǎng)[N];計(jì)算機(jī)世界;2010年

7 記者 謝榮　通訊員 夏永祥 陳海泉 張光杰;石墨烯在泰實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化[N];泰州日?qǐng)?bào);2010年

8 本報(bào)記者 紀(jì)愛(ài)玲;石墨烯：市場(chǎng)未啟 炒作先行[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2011年

9 周科競(jìng);再說(shuō)石墨烯的是與非[N];北京商報(bào);2011年

10 王小龍;新型石墨烯材料薄如紙硬如鋼[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 呂敏;雙層石墨烯的電和磁響應(yīng)[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2011年

2 羅大超;化學(xué)修飾石墨烯的分離與評(píng)價(jià)[D];北京化工大學(xué);2011年

3 唐秀之;氧化石墨烯表面功能化修飾[D];北京化工大學(xué);2012年

4 王崇;石墨烯中缺陷修復(fù)機(jī)理的理論研究[D];吉林大學(xué);2013年

5 盛凱旋;石墨烯組裝體的制備及其電化學(xué)應(yīng)用研究[D];清華大學(xué);2013年

6 姜麗麗;石墨烯及其復(fù)合薄膜在電極材料中的研究[D];西南交通大學(xué);2015年

7 姚成立;多級(jí)結(jié)構(gòu)石墨烯/無(wú)機(jī)非金屬?gòu)?fù)合材料的仿生合成及機(jī)理研究[D];安徽大學(xué);2015年

8 伊丁;石墨烯吸附與自旋極化的第一性原理研究[D];山東大學(xué);2015年

9 梁巍;基于石墨烯的氧還原電催化劑的理論計(jì)算研究[D];武漢大學(xué);2014年

10 王義;石墨烯的模板導(dǎo)向制備及在電化學(xué)儲(chǔ)能和腫瘤靶向診療方面的應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 詹曉偉;碳化硅外延石墨烯以及分子動(dòng)力學(xué)模擬研究[D];西安電子科技大學(xué);2011年

2 王晨;石墨烯的微觀結(jié)構(gòu)及其對(duì)電化學(xué)性能的影響[D];北京化工大學(xué);2011年

3 苗偉;石墨烯制備及其缺陷研究[D];西北大學(xué);2011年

4 蔡宇凱;一種新型結(jié)構(gòu)的石墨烯納米器件的研究[D];南京郵電大學(xué);2012年

5 金麗玲;功能化石墨烯的酶學(xué)效應(yīng)研究[D];蘇州大學(xué);2012年

6 黃凌燕;石墨烯拉伸性能與尺度效應(yīng)的研究[D];華南理工大學(xué);2012年

7 劉汝盟;石墨烯熱振動(dòng)分析[D];南京航空航天大學(xué);2012年

8 雷軍;碳化硅上石墨烯的制備與表征[D];西安電子科技大學(xué);2012年

9 于金海;石墨烯的非共價(jià)功能化修飾及載藥系統(tǒng)研究[D];青島科技大學(xué);2012年

10 李晶;高分散性石墨烯的制備[D];上海交通大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：896658