隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展,人們的生活水平日漸提高,越來越重視自己的身體健康。在實際的生物學(xué)分析中,特別是在疾病的早期診斷、藥物監(jiān)測等方面,一些分子生物標志物發(fā)揮著重要作用,因此研究中需要去檢測一些微量或超微量的分子或蛋白質(zhì),而開發(fā)高效、簡便的檢測方法對疾病的診斷、預(yù)測和治療都具有重要意義。熒光生物傳感器是一種高效的多目標檢測儀器,具有操作簡單、信號響應(yīng)快、特異性強、均相體系等優(yōu)點,在疾病診斷、環(huán)境監(jiān)測、食品藥品安全和科學(xué)研究等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。為了進一步提高生物標志物檢測的水平將多種信號放大方法去結(jié)合熒光檢測策略。本文利用DNA自組裝和DNA鏈置換信號放大技術(shù),構(gòu)建了三種熒光生物傳感器,對粘蛋白1(MUC1)、核因子kappa B p50(NF-kB p50)和干擾素-γ(IFN-γ)進行了高靈敏度、高選擇性的檢測。具體研究工作和成果總結(jié)如下:1.基于適配體探針構(gòu)型變化的級聯(lián)放大反應(yīng)用于超靈敏熒光檢測MUC1不同生物標志物的檢測對不同類型疾病的診斷和治療具有重要意義。根據(jù)之前的研究,MUC1在腫瘤細胞中的表達水平比在正常人上皮細胞的表達水平高。這種差異表明MUC1是疾病實際應(yīng)用中血清...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 生物傳感器
        1.1.1 生物傳感器的概述
        1.1.2 生物傳感器的分類
    1.2 熒光生物傳感器概述
        1.2.1 熒光生物傳感器的工作原理
        1.2.2 熒光生物傳感器的分類
    1.3 熒光生物傳感器的信號放大策略
        1.3.1 酶輔助的信號放大策略
        1.3.2 基于鏈置換的信號放大策略
        1.3.3 基于DNA自組裝的信號放大策略
    1.4 本文研究思路
第二章 基于適配體探針構(gòu)型變化的級聯(lián)放大反應(yīng)用于超靈敏熒光檢測MUC1
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 試劑與材料
        2.2.2 MUC1的放大熒光檢測程序
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 MUC1熒光檢測方法的原理
        2.3.2 MUC1熒光檢測方法的可行性研究
        2.3.3 實驗條件的優(yōu)化
        2.3.4 傳感器檢測MUC1的分析性能研究
        2.3.5 傳感器對MUC1選擇性的研究
        2.3.6 實際樣品中對目標蛋白的分析
    2.4 結(jié)論
第三章 銀離子穩(wěn)定的三鏈體DNA介導(dǎo)的催化發(fā)夾自組裝放大檢測NF-κb p50
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 NF-κBp50熒光放大檢測程序
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 熒光放大檢測NF-κBp50的原理
        3.3.2 NF-κBp50檢測方法的可行性研究
        3.3.3 實驗條件的優(yōu)化
        3.3.4 傳感器對NF-κBp50檢測的分析性能研究
        3.3.5 傳感器對NF-κBp50檢測的選擇性研究
        3.3.6 實際樣品中目標蛋白的分析
    3.4 結(jié)論
第四章 網(wǎng)狀雜交鏈式反應(yīng)用于組裝DNA納米結(jié)構(gòu)和放大熒光檢測細胞因子
    4.1 前言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 DNA自組裝用于IFN-γ放大熒光檢測的程序
        4.2.3 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)
        4.2.4 原子力顯微鏡成像
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 IFN-γ熒光檢測的機理
        4.3.2 IFN-γ放大檢測體系的可行性研究
        4.3.3 實驗條件的優(yōu)化
        4.3.4 傳感器的分析性能研究
        4.3.5 傳感器的選擇性研究
        4.3.6 傳感器對實際樣品的分析
    4.4 結(jié)論
參考文獻
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號：3807136