MicroRNA(miRNA)是一類新型的高特異性、高敏感度的腫瘤標志物,實現(xiàn)人體內(nèi)極低濃度miRNA的檢測,對癌前病變、腫瘤早期的診斷及預(yù)警、腫瘤疾病的早期治療具有重要科學意義和應(yīng)用前景。目前檢測miRNA的方法,大多靈敏、準確,但步驟冗長、操作繁瑣、依賴大型儀器、分析成本高昂,難以滿足日益增長的簡單、快速檢測需求。因此,建立準確性較好、靈敏度較高、操作簡單的miRNA檢測方法意義重大。本論文圍繞miRNA快速檢測與高敏監(jiān)測的重大需求,構(gòu)建了三種新型光電化學生物傳感器,實現(xiàn)miRNA的超靈敏檢測。本論文研究工作主要包括3部分:1、“法拉第籠式”電化學發(fā)光生物傳感器檢測miRNA-21基于多功能化氧化石墨烯材料,構(gòu)建“法拉第籠式”電化學發(fā)光(ECL)生物傳感器檢測miRNA-21。信號DNA和發(fā)光體luminol通過氨基和羧基的化學鍵合的方式同時被固定在氧化石墨烯表面,由此得到功能化氧化石墨烯材料,并作為信號單元。將捕獲DNA通過Au-S鍵固定在Fe₃O₄@Au MNPs表面,作為捕獲單元。當捕獲單元滴涂于磁性玻碳電極表面時,會牢牢地吸在電極...

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
主要符號表
引言
1 文獻綜述
    1.1 MICRORNA概述
    1.2 MICRORNA檢測方法
        1.2.1 Northern印跡法
        1.2.2 微陣列(Microarray)法
        1.2.3 定量PCR(qRT-PCR)法
        1.2.4 光電化學生物傳感器
    1.3 雜交鏈式反應(yīng)(Hybridization Chain Reaction,HCR)及其在生物傳感器中的應(yīng)用
    1.4 本文研究思路
2 “法拉第籠式”電化學發(fā)光生物傳感器檢測MIRNA-21
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 主要儀器與試劑
        2.2.2 主要溶液配制
        2.2.3 Fe₃O₄@AuMNPs的合成
        2.2.4 捕獲單元(Fe₃O₄@AuMNPs-cDNA)的合成
        2.2.5 信號單元(sDNA＆luminol)@GO的合成
        2.2.6 傳感器的制備
        2.2.7 ECL檢測
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 傳感器的檢測原理
        2.3.2 Fe₃O₄@AuMNPs的表征
        2.3.3 生物傳感器的表征
        2.3.4 實驗條件優(yōu)化
        2.3.5 傳感器檢測miRNA-21
        2.3.6 傳感器的選擇性
        2.3.7 傳感器的實際應(yīng)用
    2.4 本章小結(jié)
3 級聯(lián)HCR信號放大的“法拉第籠式”電化學發(fā)光生物傳感器檢測miRNA-141
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 主要儀器及試劑
        3.2.2 主要溶液配制
        3.2.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)
        3.2.4 合成HCR/Ru(phen)3
2+復合物
        3.2.5 捕獲單元(Fe₃O₄@SiO₂@AuNPs-CP)的合成
        3.2.6 信號單元(Ru(phen)3
2+-HCR/GO)的合成
        3.2.7 傳感器的制備
        3.2.8 ECL檢測
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 傳感器的檢測原理
        3.3.2 納米材料的表征
        3.3.3 雜交鏈式反應(yīng)(HCR)的表征
        3.3.4 HCR/Ru(phen)3
2+復合物熒光表征
        3.3.5 ECL生物傳感器的表征
        3.3.6 實驗條件優(yōu)化
        3.3.7 傳感器檢測miRNA-141
        3.3.8 傳感器的穩(wěn)定性和特異性
        3.3.9 傳感器的重復性和精密度
        3.3.10 傳感器的實際應(yīng)用
    3.4 本章小結(jié)
4 多重信號放大的表面增強拉曼散射生物傳感器超靈敏檢測miRNA-141
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 主要儀器與試劑
        4.2.2 主要溶液配制
        4.2.3 中空金納米線囊泡體(AuNWs)的合成
        4.2.4 捕獲單元的合成
        4.2.5 信號單元的合成
        4.2.6 目標miRNA-141SERS信號的檢測
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 SERS生物傳感器構(gòu)建機理
        4.3.2 納米材料的表征
        4.3.3 信號單元SERS性能表征
        4.3.4 實驗條件優(yōu)化
        4.3.5 SERS生物傳感器檢測miRNA-141
        4.3.6 SERS生物傳感器的特異性和穩(wěn)定性
    4.4 本章小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
在學研究成果
致謝



本文編號：3759003

suoshi