本文關鍵詞：雙酚A和17β-雌二醇的納米熒光核酸適配體傳感器的構建與應用研究

  更多相關文章： 雙酚A 17β-雌二醇 TGA-CdTe量子點 金納米粒子 納米熒光核酸適配體傳感器

【摘要】：食品有害物與食品安全和人體健康密切相關,而目前對小分子食品有害物的定量檢測研究尚不充分,因此構建快速有效檢測小分子食品有害物的傳感器顯得尤為重要。核酸適配體由于具有親和性高、特異性好、易修飾等優(yōu)勢,作為識別元件被廣泛應用于傳感器的構建。納米材料具有獨特的理化性質可作為信號轉導元件,是研發(fā)新型傳感方法和改善現(xiàn)有檢測方法有力工具。本論文將核酸適配體特異性和量子點—金納米粒子復合納米探針的優(yōu)勢相結合,基于熒光內濾效應(Inner Filter Effect,IFE)和熒光共振能量轉移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)原理,構建了兩種普遍適用的納米熒光核酸適配體傳感器,用于快速檢測雙酚A(bisphenol,BPA)和17β-雌二醇。主要研究內容如下:(1)基于核酸適配體的特異性識別,運用帶相同電荷的金納米粒子(AuNPs)和TGA-CdTe量子點(TGA-CdTe QDs),我們建立了一種核酸適配體IFE法檢測BPA。AuNPs通過IFE可以猝滅TGA-Cd Te QDs的熒光。BPA和核酸適配體的特異性識別對鹽誘導的AuNPs聚集有不同程度的影響,相應地改變IFE過程,因而BPA可以間接地調節(jié)IFE效率。在最優(yōu)條件下,該方法檢測BPA的線性范圍為10 ng·mL-1-80 ng·mL-1,獲得的檢出限1.86 ng·mL-1低于我國飲用水中BPA的最大限量標準。該方法對BPA的選擇性明顯優(yōu)于其它BPA同系物。在實際自來水樣品中,該方法獲得了與HPLC方法相一致的良好的回收率。該方法具有靈敏度高、選擇性好、操作簡便等突出的優(yōu)勢,有望適用于實際樣品中目標物的現(xiàn)場實時檢測。(2)基于核酸適配體的特異性識別,運用帶相反電荷的TGA-CdTe量子點(TGA-CdTe QDs)和巰基乙胺保護的金納米粒子(cysteamine-AuNPs),我們建立了一種新型的核酸適配體FRET法檢測17β-雌二醇。當cysteamine-AuNPs和TGA-CdTe QDs混合時,由于兩者之間有FRET作用,cysteamine-AuNPs可以顯著地猝滅TGA-CdTe量子點的熒光。不同濃度的17β-雌二醇與其適配體之間的特異性識別對適配體誘導的cysteamine-AuNPs團聚有不同的影響,從而調節(jié)FRET過程。通過進行17β-雌二醇的檢測證明了該方法的可行性,本實驗獲得的17β-雌二醇的線性濃度范圍為0.5 ng·mL-1-150 ng·mL-1,檢出限為0.057 ng·mL-1。相比于其它的內分泌干擾物和實際樣品種可能共存的物質,該方法對17β-雌二醇有很好的選擇性。此外,該方法被成功應用于實際水樣和飼料樣品中17β-雌二醇的檢測,并具有很好的檢測性能。該方法的檢測結果與HPLC方法一致,這表明了該檢測體系的可靠性。這種核酸適配體FRET檢測體系將為實際樣品中17β-雌二醇的快速檢測提供一種新的可能。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3;TP212

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