基于單分子定位的超分辨顯微中熒光激發(fā)密度的優(yōu)化
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【摘要】:基于單分子定位的超分辨顯微技術(shù)中,熒光點(diǎn)的中心位置可通過(guò)對(duì)每個(gè)熒光點(diǎn)進(jìn)行單點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)(point spread function,PSF)逐個(gè)擬合定位或?qū)Χ鄠(gè)熒光點(diǎn)進(jìn)行多PSF同時(shí)擬合定位獲得。定位誤差以及圖像采樣時(shí)間與熒光激發(fā)密度直接相關(guān)。為定量得到基于這兩種算法的最優(yōu)熒光激發(fā)密度,模擬了成像與定位過(guò)程,比較了常見(jiàn)的幾種熒光分子在采用基于單PSF逐個(gè)擬合和多PSF同時(shí)擬合兩種算法定位時(shí)的中心定位誤差、熒光獲取比率、獲取的有效熒光點(diǎn)數(shù)與熒光激發(fā)密度間的關(guān)系,進(jìn)而得到了采用這兩種算法對(duì)不同熒光染劑進(jìn)行超分辨成像時(shí)的最優(yōu)熒光激發(fā)密度。該結(jié)果對(duì)單分子成像過(guò)程中熒光激發(fā)密度的選擇和激發(fā)激光的強(qiáng)度控制具有指導(dǎo)意義。
【作者單位】: 中國(guó)科學(xué)院蘇州生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù)研究所 江蘇省醫(yī)用光學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春光學(xué)精密機(jī)械與物理研究所;中國(guó)科學(xué)院大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: 顯微 熒光 單分子定位 激發(fā)密度
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(51376191)~~
【分類號(hào)】:TH742.65
【正文快照】: 引言熒光顯微鏡在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。但是,包括共聚焦顯微鏡在內(nèi)的傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡受到阿貝光學(xué)衍射極限的限制[1],其分辨率只能達(dá)到200 nm以上。近年來(lái)發(fā)展的基于單分子定位的超分辨熒光顯微技術(shù)突破了衍射極限,可以達(dá)到20 nm的橫向分辨率,因此成為生物醫(yī)學(xué)顯微成像
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,本文編號(hào):632592
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