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雙光子熒光顯微鏡的研究

發(fā)布時間:2017-06-27 05:05

  本文關(guān)鍵詞:雙光子熒光顯微鏡的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:雙光子熒光顯微鏡通過對樣品在雙光子激發(fā)后發(fā)出的熒光進行探測,實現(xiàn)樣品的三維成像。與單光子比較,雙光子熒光顯微成像具有光損傷小、分辨率高等優(yōu)點,可以對生物樣品實時在體監(jiān)測,已成為研究細胞結(jié)構(gòu)和功能檢測的重要工具。 本文從一般的熒光和熒光顯微鏡理論出發(fā),引出了雙光子熒光顯微鏡的概念;對雙光子熒光顯微鏡的成像理論進行研究,通過和單光子熒光成像比較,分析了雙光子熒光顯微鏡的成像特點;然后,完成了雙光子熒光顯微成像系統(tǒng)的搭建,并對平面掃描做了研究,利用雙壓電晶片的一維振動實現(xiàn)了光纖二維的掃描;在此基礎上用Rhodamine B作為熒光探針進行了雙光子熒光探測實驗,分析了Rhodamine B不同濃度水溶液的熒光強度特性;同時,通過對實驗結(jié)果的分析,找出引起誤差的原因,從而改進系統(tǒng)。 全文共分為五章。第一章主要講述了本課題研究工作的背景,簡要介紹了熒光和熒光顯微鏡以及雙光子熒光顯微鏡的應用。第二章從基本原理出發(fā),在理論上分析了雙光子熒光顯微鏡的成像特點,推導了雙光子熒光探測公式,并得到了雙光子共焦顯微鏡的點擴散函數(shù)。第三章介紹了雙光子熒光顯微鏡系統(tǒng)的幾個主要組成部分,說明了各部分的要求,研制了新型的光纖掃描探頭。第四章利用搭建完成的雙光子熒光顯微鏡進行了實驗,并分析了實驗結(jié)果。第五章對本論文所做的工作進行了總結(jié),并提出了下一階段需要完善和深入研究的工作。
【關(guān)鍵詞】:雙光子 熒光 顯微鏡 成像理論 掃描
【學位授予單位】:浙江大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:TH742
【目錄】:
  • 摘要2-3
  • ABSTRACT3-6
  • 第一章 緒論6-23
  • §1.1 課題的提出6-9
  • 1.1.1 現(xiàn)代分子生物學的局限6-7
  • 1.1.2 基于分子光學標記的光學成像技術(shù)7-8
  • 1.1.3 本課題主要研究目標和內(nèi)容8-9
  • §1.2 熒光及熒光顯微鏡簡介9-17
  • 1.2.1 熒光簡介9-12
  • 1.2.2 熒光顯微鏡簡介12-14
  • 1.2.3 單光子熒光共焦顯微鏡和雙光子熒光顯微鏡14-17
  • §1.3 雙光子熒光顯微鏡的應用17-21
  • 1.3.1 細胞中Ca~(2+)的研究17-18
  • 1.3.2 大腦皮層在體神經(jīng)元功能的雙光子成像18
  • 1.3.3 三維高密度存儲18-19
  • 1.3.4 三維微細加工19
  • 1.3.5 胚胎學與組織學研究19-20
  • 1.3.6 代謝過程研究20
  • 1.3.7 熒光關(guān)聯(lián)譜學20-21
  • 參考文獻21-23
  • 第二章 雙光子成像理論23-36
  • §2.1 基本原理23-25
  • §2.2 雙光子熒光探測的理論分析25-27
  • §2.3 雙光子熒光強度的空間分布27-29
  • §2.4 雙光子熒光共焦顯微鏡的成像理論29-35
  • 參考文獻35-36
  • 第三章 雙光子實驗系統(tǒng)簡介36-55
  • §3.1 雙光子熒光成像實驗系統(tǒng)流程36-37
  • §3.2 光學成像系統(tǒng)37-41
  • §3.3 光電轉(zhuǎn)換系統(tǒng)41-44
  • §3.4 機械掃描系統(tǒng)44-47
  • 3.4.1 軸向掃描系統(tǒng)45
  • 3.4.2 平面掃描系統(tǒng)45-47
  • §3.5 新型掃描探頭的研制47-51
  • 3.5.1 掃描探頭的結(jié)構(gòu)47-48
  • 3.5.2 一維振動實現(xiàn)二維掃描的理論分析48-49
  • 3.5.3 實驗結(jié)果49-51
  • §3.6 小結(jié)51-55
  • 第四章 實驗內(nèi)容及結(jié)果分析55-66
  • §4.1 雙光子熒光顯微鏡系統(tǒng)的搭建和信噪比測試55-58
  • 4.1.1 雙光子熒光顯微系統(tǒng)搭建55-56
  • 4.1.2 雙光子熒光顯微鏡信噪比測試56-58
  • §4.2 不同濃度Rhodamine B溶液的熒光強度探測58-62
  • §4.3 輸出電壓與探測距離的曲線擬合62-63
  • §4.4 熒光采集效率與物鏡數(shù)值孔徑關(guān)系驗證63-66
  • 第五章 總結(jié)與展望66-68
  • §5.1 總結(jié)66
  • §5.2 展望66-68
  • 發(fā)表的論文68-69
  • 致謝69

【引證文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 許佳麗;熊祖洪;黃承志;;雙光子技術(shù)及其在生物醫(yī)藥分析中的應用[J];科學通報;2011年06期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 徐學明;固體浸沒透鏡在熒光顯微鏡中的應用研究[D];天津大學;2010年

2 任利強;熒光顯微鏡中景深和自動對焦方法的研究[D];天津大學;2012年


  本文關(guān)鍵詞:雙光子熒光顯微鏡的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:488606

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