AgN03和納米銀是對細菌具有良好抑菌效果的抑菌劑,但是其對細菌的抑菌機理尚沒有準確的定論。而原子力顯微鏡(AFM)能提供前所未有的洞察力可視化細胞壁、膜結構,跟蹤細胞生長和分裂或與藥物作用后的動態(tài)變化以及測量細胞的表面力學性質(zhì)。在過去的幾十年里,AFM已經(jīng)成為微生物學研究的一種強有力的工具,其納米級的成像與皮牛頓級的力學測量為更好地理解細胞表面組分的結構和功能提供了新的途徑,有助于闡明AgN03、納米銀與細菌相互作用的機理,為推動AgN03和納米銀在醫(yī)藥領域的廣泛應用打下基礎。本論文通過AFM成像與力曲線測定,輔助靜置培養(yǎng)、生長曲線以及β-半乳糖苷酶活性的生物測定,研究AgN03和納米Ag分別作用于大腸桿菌與金黃色葡萄球菌時的抑菌機理。主要結果如下:1.AgN03作用于大腸桿菌12h后,菌體表面出現(xiàn)了囊泡,桿狀結構發(fā)生塌陷,內(nèi)容物外泄,表面平均粗糙度(Ra)由11.4nm增至17.0nm,均方根粗糙度(Rq)由14.2nm增至21.0nm;力曲線斜率由-1.40降至-1.74,細胞表面的彈性降低,黏附力增加1 nN,楊氏模量由277 Mpa增大至880 Mpa;在48 h內(nèi)完全抑制了大腸桿菌的生長,細胞膜通透性增大。2.AgNO3作用于金黃色葡萄球菌12 h后,細菌表面出現(xiàn)了不同程度的凹陷破損,內(nèi)容物外泄,Ra由16.4 nm降至12.5 nm,Rq由20.4 nm降至15.7 nm;力曲線斜率由-24.12升高至-18.23,細胞表面的彈性升高,黏附力增加42 nN,楊氏模量由1812 Mpa降至882 Mpa;在4h內(nèi)完全抑制了金黃色葡萄球菌的生長,48 h內(nèi)菌量少于對照組,細胞膜通透性增大。3.納米Ag作用于大腸桿菌12 h后,細胞表面結構出現(xiàn)不同程度的塌陷與隆起,內(nèi)容物外泄,Ra由10.7 nm降至7.0 nm,Rq由13.7 nm降至8.8 nm;力曲線斜率由-1.44降至-3.95,細胞表面的彈性降低,黏附力增加8 nN,楊氏模量由334 Mpa升至3113 Mpa;在48 h內(nèi)完全抑制了大腸桿菌的生長,細胞膜通透性增大。4.納米Ag作用于金黃色葡萄球菌12h后,使其表面發(fā)生了不同程度的凹陷破損,內(nèi)容物外泄,Ra由15.9 nm降至13.9 nm,Rq由19.4 nm降至17.6nm;力曲線斜率由-26.41降至-19.62,細胞表面的彈性升高,黏附力增加38 nN,楊氏模量由1797 Mpa降低至1019 Mpa;在6 h內(nèi)完全抑制了金黃色葡萄球菌的生長,24 h后菌量大于對照組,細胞膜通透性基本沒有變化。
【學位單位】：廣西大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：TH742;TQ421
【部分圖文】：

會導致生理特性的不同，特別是面對抑菌物質(zhì)時的自我保護機制。??１．２．１革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌的表層結構差異??由圖１－２可以對比看出，革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌的表層結構主要為細胞壁與??細胞膜，其中結構的差異主要來自細胞壁的不同。革蘭氏陽性菌細胞壁主要是由肽聚糖??層與磷壁酸構成１４９］。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層厚度大約為２０？８０?ｎｍ，并且結構緊密扎??實；磷壁酸具有作為革蘭氏陽性菌特異性表面抗原用于菌種鑒定、使細菌黏附至宿主細??胞等功能革蘭氏陰性菌的細胞壁除了肽聚糖層之外還有特殊成分外膜，因此革蘭氏??陰性菌細胞壁是多層結構，由內(nèi)向外分為肽聚糖層、脂蛋白／周質(zhì)層、磷脂層和脂多糖層??［５１］。革蘭氏陰性菌肽聚糖層比革蘭氏陽性菌的肽聚糖層層數(shù)少并且更薄，厚度大約為??１０－１５?ｎｍ〇??７??

廣西大學頓士學位論文?原■子力顯微後研究硝酸銀■和納米銀對細菌的抑菌機理??凸不平，并且細胞周邊有內(nèi)容物外泄。由圖２－１Ｄ可以更清晰地觀察到顆粒狀隆起物，??測量隆起物大小約為６７？１２６ｎｍ，推測其為外膜囊泡（ＯＭＶｓ）。ＯＭＶｓ是普遍存在于??革蘭氏陰性菌中的包含生物學活性物質(zhì)的囊泡狀結構，其大小在２０？２５０?ｎｍ之間〃１２］。??細菌生長環(huán)境的改變，如抑菌物質(zhì)的添加，會導致ＯＭＶｓ的大量產(chǎn)生，而ＯＭＶｓ分泌??的周質(zhì)內(nèi)容物如Ｐ－內(nèi)酰胺酶等抑菌物質(zhì)的滅活酶能有效抵抗抑菌物質(zhì)對菌體的破壞，從??而提高了細菌的生存機會在本研究中，ＯＭＶｓ的存在使得大腸桿菌在短時間內(nèi)??仍能保持桿狀形態(tài)，但細胞表面＋再光滑。??ｒｎａｒｎｍ??鼸：：１??圖２－１?ＡｇＮＯ．，作用前后的大腸桿菌的振幅誤差圖（Ａ、Ｃ）與超微結構圖（Ｂ、Ｄ）??Ｆｉｇ．?２－１?ｌ?ｈｃ?ａｍｐｌｉｔｕｄｅ?ｅｒｒｏｒ?ｉｍａｇｅｓ?（Ａ．?Ｃ）?ａｎｄ?ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｉｍａｇｅｓ?（Ｂ．?Ｄ）?ｏｆ?７／．．?ｃｏｌｉ?ｂｅｆｏｒｅ?ａｎｄ?ａｌｔｅｒ??ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＡｇＮＯｓ??２．３．２?ＡｇＮＣｂ對大腸桿菌形貌的影卩向??圖２－２是ＡｇＮＣｈ作用前后大腸桿菌的３Ｄ圖、高度圖與剖面分析圖。高度圖反映丫??細菌的形貌

廣西大學頓士學位論文?原■子力顯微後研究硝酸銀■和納米銀對細菌的抑菌機理??凸不平，并且細胞周邊有內(nèi)容物外泄。由圖２－１Ｄ可以更清晰地觀察到顆粒狀隆起物，??測量隆起物大小約為６７？１２６ｎｍ，推測其為外膜囊泡（ＯＭＶｓ）。ＯＭＶｓ是普遍存在于??革蘭氏陰性菌中的包含生物學活性物質(zhì)的囊泡狀結構，其大小在２０？２５０?ｎｍ之間〃１２］。??細菌生長環(huán)境的改變，如抑菌物質(zhì)的添加，會導致ＯＭＶｓ的大量產(chǎn)生，而ＯＭＶｓ分泌??的周質(zhì)內(nèi)容物如Ｐ－內(nèi)酰胺酶等抑菌物質(zhì)的滅活酶能有效抵抗抑菌物質(zhì)對菌體的破壞，從??而提高了細菌的生存機會在本研究中，ＯＭＶｓ的存在使得大腸桿菌在短時間內(nèi)??仍能保持桿狀形態(tài)，但細胞表面＋再光滑。??ｒｎａｒｎｍ??鼸：：１??圖２－１?ＡｇＮＯ．，作用前后的大腸桿菌的振幅誤差圖（Ａ、Ｃ）與超微結構圖（Ｂ、Ｄ）??Ｆｉｇ．?２－１?ｌ?ｈｃ?ａｍｐｌｉｔｕｄｅ?ｅｒｒｏｒ?ｉｍａｇｅｓ?（Ａ．?Ｃ）?ａｎｄ?ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｉｍａｇｅｓ?（Ｂ．?Ｄ）?ｏｆ?７／．．?ｃｏｌｉ?ｂｅｆｏｒｅ?ａｎｄ?ａｌｔｅｒ??ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＡｇＮＯｓ??２．３．２?ＡｇＮＣｂ對大腸桿菌形貌的影卩向??圖２－２是ＡｇＮＣｈ作用前后大腸桿菌的３Ｄ圖、高度圖與剖面分析圖。高度圖反映丫??細菌的形貌
【參考文獻】

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本文編號：2864066