【摘要】：傳統(tǒng)的檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的方法是抽樣法或光學(xué)檢查法。抽樣檢查法屬于侵入性檢查,該方法只能抽取少量血液,只有少量數(shù)據(jù)。同時(shí)有研究表明,循環(huán)腫瘤細(xì)胞的釋放是間歇性的,一些無創(chuàng)的光學(xué)檢測(cè)手段,不能達(dá)到在體實(shí)時(shí)量化的目的。活體流式細(xì)胞儀屬于光電生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)設(shè)備,作為一種新興的光學(xué)技術(shù),被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究中。由于其具備在活體小動(dòng)物的體內(nèi)連續(xù)進(jìn)行熒光細(xì)胞檢測(cè)并具有計(jì)數(shù)能力,而被應(yīng)用在跟蹤循環(huán)系統(tǒng)中特定的細(xì)胞�；铙w流式細(xì)胞儀在腫瘤早期的預(yù)防監(jiān)測(cè)和篩查工作中的應(yīng)用是當(dāng)前生物醫(yī)學(xué)工作者的主要研究方向之一。此外,對(duì)于癌癥的體外早期診斷,一些化療藥物的快速評(píng)估,腫瘤復(fù)發(fā)的檢測(cè)等都具有指導(dǎo)性意義。光纖型活體流式細(xì)胞儀是將光纖端面,置于活體小動(dòng)物皮膚表面,無須進(jìn)行體外侵入式抽血,即可實(shí)時(shí)檢測(cè)活體小動(dòng)物血液和淋巴循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)的標(biāo)有熒光染料的循環(huán)腫瘤細(xì)胞的存在,不改變細(xì)胞特性和原生環(huán)境情況,并且可以進(jìn)行定量分析,最終要實(shí)現(xiàn)在體、實(shí)時(shí)、連續(xù)、動(dòng)態(tài)、無創(chuàng)檢測(cè)的目標(biāo),臨床上做到及時(shí)發(fā)現(xiàn)治療。本論文詳細(xì)介紹了光纖型活體流式細(xì)胞儀檢測(cè)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)搭建過程。系統(tǒng)的核心設(shè)計(jì)思想在于將共聚焦系統(tǒng)與傳統(tǒng)的活體流式細(xì)胞儀結(jié)合起來,進(jìn)行生物成像和熒光探測(cè)。系統(tǒng)分為激發(fā)光路、光纖成像光路、熒光采集光路、信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)四部分。現(xiàn)有的活體流式細(xì)胞儀的實(shí)驗(yàn)研究一直局限于可見熒光光譜范圍,然而近年來,不斷探究近紅外波段的熒光染料,發(fā)現(xiàn)其具有一些優(yōu)點(diǎn),如比較大的透射率、低吸收率和低散射率,因此,活體流式細(xì)胞儀擴(kuò)展到了近紅外范圍,在生物醫(yī)療研究中展示了潛在的應(yīng)用性。本實(shí)驗(yàn)中,激發(fā)光源選擇782 nm(近紅外)和458 nm作為激發(fā)光,熒光染料選擇IR-780和綠色熒光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)用來標(biāo)記細(xì)胞,并將小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,并取得了初步的實(shí)驗(yàn)研究成果。
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：TH773
【圖文】：

圖 2.1 流式細(xì)胞儀結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖Fig. 2.1 Schematic diagram of flow cytometer懸液的制作是用熒光染料將細(xì)胞染色，單細(xì)胞懸液可。然后，用激光光源垂直照射，激發(fā)檢測(cè)區(qū)域的單細(xì)。前向的光電二極管和側(cè)向 90°的光電倍增管用來接

（c）細(xì)胞液濃度 1.010/mL5 個(gè)（d）細(xì)胞液濃度 0.510/mL5 個(gè)圖 4.8 活體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig. 4.8 Results of in vivo test

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