基于光子納米噴流效應的微透鏡超分辨成像
【學位授予單位】:南京師范大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:TH74
【圖文】:
直至達到可分辨的程度,然后就可以被傳統(tǒng)的顯微鏡所接收[16‘^。實驗證逡逑實:在365nm波長的光照下,通過該結(jié)構(gòu),可以成功的分辨空間間隔為150nm,逡逑線寬為35nm的線條。實驗結(jié)構(gòu)如圖1.邋3所示。逡逑V,—逡逑mill:邐^邐:逡逑圖丨.3基于多層膜結(jié)構(gòu)的遠場超分辨顯微技術(shù)邋引自文獻[16]逡逑1.2.邋2基于熒光的超分辨顯微成像技術(shù)逡逑基于熒光的超分辨顯微技術(shù)主要包括受激發(fā)射損耗顯微技術(shù)(stimulated逡逑emission邋depletion,邋STED)和單分子定位勞光顯微技術(shù)。1994年,德國科學家逡逑S.邋Hell提出了邋STED模型,該模型指出先將一束激發(fā)光聚焦成普通的衍射受限光逡逑斑,使該光斑內(nèi)的熒光分子處于激發(fā)態(tài);然后再嵌套一個激發(fā)光形成的中心為暗逡逑斑的環(huán)形聚焦光斑,該光斑可以抑制處于激發(fā)態(tài)熒光分子的反射,從而得到一個逡逑3逡逑
逑小于衍射極限的熒光點,通過逐點掃描形成超分辨的顯微圖像2000年,該逡逑技術(shù)被實驗所驗證[19],實驗裝置與結(jié)果如圖1.邋4所示。由于STED技術(shù)可以通過逡逑不斷提高抑制光的強度來提高顯微成像的分辨率,所以可以分辨非常精細的物體逡逑結(jié)構(gòu),目前其分辨率己經(jīng)達到了邋2.邋4nm。逡逑WW_逡逑圖1.4基于STED的熒光超分辨顯微技術(shù)邋引自文獻tl9J逡逑單分子定位超分辨顯微技術(shù),主要依靠視場中單個熒光分子的發(fā)光來準確的逡逑定位該熒光分子的位置,定位的精度達到納米的量級,通過擬合算法生成超分辨逡逑衍射圖像。1997年,W.E.Moerner?發(fā)現(xiàn)綠色熒光蛋白的發(fā)光,可以隨意的開啟或逡逑關閉,這為單分子定位超分辨顯微技術(shù)提供了可能[2?。2006年,E.Betzig提出逡逑了激光激活定位顯微技術(shù)。如圖1.5所示,該技術(shù)先用綠色熒光蛋白來標記生物逡逑蛋白分子
逑小于衍射極限的熒光點,通過逐點掃描形成超分辨的顯微圖像2000年,該逡逑技術(shù)被實驗所驗證[19],實驗裝置與結(jié)果如圖1.邋4所示。由于STED技術(shù)可以通過逡逑不斷提高抑制光的強度來提高顯微成像的分辨率,所以可以分辨非常精細的物體逡逑結(jié)構(gòu),目前其分辨率己經(jīng)達到了邋2.邋4nm。逡逑WW_逡逑圖1.4基于STED的熒光超分辨顯微技術(shù)邋引自文獻tl9J逡逑單分子定位超分辨顯微技術(shù),主要依靠視場中單個熒光分子的發(fā)光來準確的逡逑定位該熒光分子的位置,定位的精度達到納米的量級,通過擬合算法生成超分辨逡逑衍射圖像。1997年,W.E.Moerner?發(fā)現(xiàn)綠色熒光蛋白的發(fā)光,可以隨意的開啟或逡逑關閉,這為單分子定位超分辨顯微技術(shù)提供了可能[2?。2006年,E.Betzig提出逡逑了激光激活定位顯微技術(shù)。如圖1.5所示,該技術(shù)先用綠色熒光蛋白來標記生物逡逑蛋白分子
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