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植物激素誘導(dǎo)微藻生產(chǎn)生物柴油和高附加值次生代謝物的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-26 15:21

  本文關(guān)鍵詞:植物激素誘導(dǎo)微藻生產(chǎn)生物柴油和高附加值次生代謝物的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:全球經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展,使得各國的能源消耗量急劇攀升。然而,地球上的化石能源儲存是有限的,終有一天會被消耗殆盡,這一壓力已經(jīng)迫在眉睫。解決這一問題的關(guān)鍵在于尋找到新型可再生的清潔能源。微藻因其具備不可比擬的優(yōu)勢被國內(nèi)外專家廣泛認(rèn)可為唯一有可能完全替代化石能源的選項(xiàng)。植物激素(生長調(diào)劑)能有效調(diào)控植物的次生代謝,因其高效率,成本低廉,簡單實(shí)用而得到廣泛關(guān)注。本課題通過使用8種不同植物生長調(diào)節(jié)劑(ABA、SA、ETH、SPD、GA3、EBR、6-BA、NAA)處理蛋白核小球藻ZF藻株、普通小球藻ZF藻株和布朗葡萄藻B12藻株,監(jiān)測藻細(xì)胞生物量、油脂產(chǎn)率和高附加值次生代謝物(類胡蘿卜素、總可溶性蛋白和多不飽和脂肪酸成分)產(chǎn)率變化,以期篩選到利用微藻高效生產(chǎn)生物柴油及次生代謝物的最佳誘導(dǎo)條件。結(jié)果表明促進(jìn)微藻快速生長的最佳誘導(dǎo)條件分別為:50 mg/L-NAA-蛋白核小球藻ZF藻株,50 mg/L-ABA-普通小球藻ZF藻株,50 mg/L-NAA-布朗葡萄藻B12藻株;促進(jìn)微藻快速合成總可溶性蛋白的最佳誘導(dǎo)條件分別為:0.01 mg/L-EBR-蛋白核小球藻ZF藻株,10 mg/L-SA-普通小球藻ZF藻株,5 mg/L-6-BA-布朗葡萄藻B12藻株;促進(jìn)微藻快速生成類胡蘿卜素的最佳誘導(dǎo)條件分別為:20 mg/L-NAA-蛋白核小球藻ZF藻株,5 mg/L-6-BA-普通小球藻ZF藻株,50 mg/L-NAA-布朗葡萄藻B12藻株;促進(jìn)微藻快速合成多不飽和脂肪酸的最佳誘導(dǎo)條件分別為:0.05mg/L-NAA-蛋白核小球藻ZF藻株,50 mg/L-ABA-普通小球藻ZF藻株,0.01mg/L-ETH-布朗葡萄藻B12藻株;促進(jìn)微藻快速積累油脂的最佳誘導(dǎo)條件分別為:5 mg/L-GA3-蛋白核小球藻ZF藻株,20 mg/L-ABA-普通小球藻ZF藻株,15 mg/L-GA3-布朗葡萄藻B12藻株。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究最佳油脂誘導(dǎo)條件下藻細(xì)胞油脂合成相關(guān)酶基因(BC、FATA、ACP、SAD、MCTK、FAD、KAS)表達(dá)模式的變化。結(jié)果顯示5 mg/L-GA3-蛋白核小球藻ZF藻株,20 mg/L-ABA-普通小球藻ZF藻株,15mg/L-GA3-布朗葡萄藻B12藻株,以上3種誘導(dǎo)處理組7種基因表達(dá)量明顯高于對照組。比對油脂產(chǎn)率的結(jié)果發(fā)現(xiàn)這7種基因表達(dá)量增高可提高油脂產(chǎn)率,由此推測出植物生長調(diào)節(jié)劑通過改變油脂合成途徑的關(guān)鍵酶基因提高油脂產(chǎn)率。本研究為人工調(diào)控微藻生產(chǎn)生物柴油及高附加值次生代謝產(chǎn)物做了有益探索,也為微藻生物柴油產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程提供一種新思路。
【關(guān)鍵詞】:微藻 生物柴油 植物生長調(diào)節(jié)劑 總可溶性蛋白 類胡蘿卜素 多不飽和脂肪酸
【學(xué)位授予單位】:山東理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:TE667;Q949.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 第一章 引言11-22
  • 1.1 課題背景及意義11
  • 1.2 生物能源介紹11-12
  • 1.3 微藻制備生物柴油的優(yōu)勢和存在問題12
  • 1.4 高附加值次生代謝物的介紹12-14
  • 1.4.1 多不飽和脂肪酸及其生理功能13-14
  • 1.4.2 類胡蘿卜素簡介14
  • 1.4.3 總可溶性蛋白簡介14
  • 1.5 小球藻的分類和生物學(xué)特性14-15
  • 1.6 布朗葡萄藻的分類和生物學(xué)特性15-16
  • 1.7 微藻中油脂合成的關(guān)鍵基因16-17
  • 1.8 植物生長調(diào)節(jié)劑及其作用機(jī)理17-20
  • 1.8.1 EBR(2.4-表油菜素內(nèi)酯)17-18
  • 1.8.2 ABA(脫落酸)18
  • 1.8.3 GA3(赤霉素)18
  • 1.8.4 NAA(萘乙酸)18-19
  • 1.8.5 ETH(乙烯利)19
  • 1.8.6 6-BA(6-芐基腺嘌呤)19
  • 1.8.7 SA(水楊酸)19-20
  • 1.8.8 SPD(亞精胺)20
  • 1.9 本文研究意義和主要研究內(nèi)容20-22
  • 1.9.1 研究意義20-21
  • 1.9.2 研究內(nèi)容21-22
  • 第二章 八種植物生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)蛋白核小球藻ZF藻株油脂積累及高附加值次生代謝物的研究22-52
  • 引言 蛋白核小球藻ZF藻株概況22
  • 2.1 材料與方法22-24
  • 2.1.1 儀器22-23
  • 2.1.2 藻種23
  • 2.1.3 藻種的培養(yǎng)23-24
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法24-28
  • 2.2.1 培養(yǎng)條件24
  • 2.2.2 植物生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)24-25
  • 2.2.3 生長曲線25
  • 2.2.4 藻細(xì)胞的收集25
  • 2.2.5 油脂測定方法25-26
  • 2.2.6 總可溶性蛋白含量的測定26-27
  • 2.2.7 類胡蘿卜素含量的測定27-28
  • 2.2.8 多不飽和脂肪酸成分分析28
  • 2.3 結(jié)果與分析28-51
  • 2.3.1 細(xì)胞密度與OD值的關(guān)系28-31
  • 2.3.2 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對蛋白核小球藻ZF藻株油脂產(chǎn)量的影響31-35
  • 2.3.3 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對蛋白核小球藻ZF藻株總可溶性蛋白含量的影響35-40
  • 2.3.4 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對蛋白核小球藻ZF藻株類胡蘿卜素含量的影響40-44
  • 2.3.5 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對蛋白核小球藻ZF藻株多不飽和脂肪酸成分的影響44-51
  • 本章小結(jié)51-52
  • 第三章 八種植物生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)普通小球藻ZF藻株油脂積累及高附加值次生代謝物的研究52-73
  • 引言 普通小球藻ZF藻株概況52
  • 3.1 材料與方法52
  • 3.1.1 儀器52
  • 3.1.2 藻種52
  • 3.1.3 藻種的培養(yǎng)52
  • 3.2 方法52-53
  • 3.3 結(jié)果與分析53-72
  • 3.3.1 細(xì)胞密度與OD值的關(guān)系53-55
  • 3.3.2 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對普通小球藻ZF藻株油脂產(chǎn)量的影響55-59
  • 3.3.3 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對普通小球藻ZF藻株總可溶性蛋白含量的影響59-64
  • 3.3.4 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對普通小球藻ZF藻株類胡蘿卜素含量的影響64-68
  • 3.3.5 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對普通小球藻ZF藻株多不飽和脂肪酸成分的影響68-72
  • 本章小結(jié)72-73
  • 第四章 八種植物生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)布朗葡萄藻B12藻株油脂積累及高附加值次生代謝物的研究73-94
  • 引言 布朗葡萄藻B12藻株概況73
  • 4.1 材料與方法73
  • 4.1.1 儀器73
  • 4.1.2 藻種73
  • 4.1.3 藻種的培養(yǎng)73
  • 4.2 實(shí)驗(yàn)方法73-74
  • 4.3 結(jié)果與分析74-93
  • 4.3.1 細(xì)胞密度與OD的關(guān)系74-76
  • 4.3.2 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對布朗葡萄藻B12藻株油脂產(chǎn)量的影響76-80
  • 4.3.3 八種生長調(diào)節(jié)劑對布朗葡萄藻B12藻株總可溶性蛋白含量的影響80-85
  • 4.3.4 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對布朗葡萄藻B12藻株類胡蘿卜素含量的影響85-89
  • 4.3.5 八種植物生長調(diào)節(jié)劑對布朗葡萄藻B12藻株多不飽和脂肪酸成分的影響89-93
  • 本章小結(jié)93-94
  • 第五章 最佳誘導(dǎo)條件下各藻株油脂合成相關(guān)基因的表達(dá)模式分析94-108
  • 引言94
  • 5.1 引物設(shè)計(jì)94-97
  • 5.1.1 引物設(shè)計(jì)94-95
  • 5.1.2 總RNA的提取95-97
  • 5.2 結(jié)果與分析97-107
  • 5.2.1 引物檢測結(jié)果97-99
  • 5.2.2 RT-PCR結(jié)果99-101
  • 5.2.3 蛋白核小球藻ZF藻株相對基因表達(dá)量101-103
  • 5.2.4 普通小球藻ZF藻株相對基因表達(dá)量103-105
  • 5.2.5 布朗葡萄藻B12藻株相對基因表達(dá)量105-107
  • 5.3 討論107-108
  • 第六章 結(jié)論108-109
  • 參考文獻(xiàn)109-117
  • 在讀期間公開發(fā)表的論文117-118
  • 致謝118

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1 黃英明;王偉良;李元廣;謝靜莉;范建華;陶黎明;;微藻能源技術(shù)開發(fā)和產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展思路與策略[J];生物工程學(xué)報(bào);2010年07期

2 朱明珍;微藻產(chǎn)生的抗生素[J];國外藥學(xué)(抗生素分冊);1987年01期

3 韓迎山;;微藻生物技術(shù)及其應(yīng)用前景[J];植物雜志;1990年06期

4 馬志珍;;微藻固定化培養(yǎng)技術(shù)及其應(yīng)用前景[J];國外水產(chǎn);1993年03期

5 林偉,陳

本文編號:486660


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