【摘要】：目前,石油烴污染成為許多地區(qū)不可忽視的土壤環(huán)境污染問題。石油烴污染物來源有很多,包括原油泄漏和溢油事故、工廠含油廢物的排放以及空氣的沉降和開采冶煉時(shí)含油廢物的堆置等。這些石油烴污染物會(huì)破壞土壤結(jié)構(gòu),影響當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境和作物的生長發(fā)育,進(jìn)而對(duì)人類造成安全威脅和經(jīng)濟(jì)損失。生物降解被認(rèn)為是降解石油烴污染的有效方法之一,因其對(duì)周圍環(huán)境污染小、操作簡便和費(fèi)用低等優(yōu)勢逐漸成為研究的熱點(diǎn)。本試驗(yàn)從東營和淄博采集土壤樣品,對(duì)石油降解菌進(jìn)行篩選,測序鑒定及特性研究。另一方面,為了探究自然情況下石油烴污染物對(duì)微生物多樣性的影響,還對(duì)樣品進(jìn)行了高通量測序及相關(guān)分析。研究主要結(jié)果如下:1.從淄博和東營采集樣品,以石油為唯一碳源進(jìn)行石油降解菌的篩選和鑒定。通過測序鑒定出35株細(xì)菌,其中假單胞菌屬(Pseudomonas)6株,芽孢桿菌屬(Bacillus)5株,不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter)4株,寡養(yǎng)單胞菌屬(Stenotrophornon)3株,紅球菌屬(Rhodococc)3株,無色桿菌屬(Achromobacter)3株,腸桿菌屬(Enterobacter)1 株,單胞菌屬(Brevundimonas)1株,副球菌屬(Paracoccus)1株,阿爾比紅細(xì)菌屬(Albirhodobacte)1株,鹽單胞菌屬(Holomonas)1株,萊茵海默氏菌屬(Rheinheimera)1株,鹽田菌屬(Salinicola)1 株,微桿菌屬(Microbacterium)1 株,短桿菌屬(Brevibacterium)株。2.隨后又測得其生長狀況和降解率的數(shù)據(jù)。從所得結(jié)果來看,在18 ℃時(shí),大部分菌株出現(xiàn)了遲緩期較長,最大生長量較小的現(xiàn)象,而在28 ℃和38 ℃時(shí)多數(shù)菌株的生長狀況大致相同,且在38 ℃的最大生長量要大于28 ℃時(shí)的最大生長量。然而部分菌株在18 ℃的條件下具有較大的最大生長量和較長的穩(wěn)定期。在降解率方面,菌株的降解率均超過30%,大部分菌株的降解率隨溫度的升高而增加,菌株ZB-100-1和ZB-100-2卻出現(xiàn)了 18 ℃時(shí)降解率增大的現(xiàn)象。3.本試驗(yàn)還對(duì)淄博和東營土壤進(jìn)行了高通量測序,結(jié)果顯示:石油烴污染物可以改變土壤中微生物的群落結(jié)構(gòu),如降低微生物物種豐富度和改變土壤中優(yōu)勢菌群的組成。淄博和東營兩地的未受石油烴污染的土壤樣品的微生物物種豐富度均高于石油烴污染的土壤樣品。淄博土壤樣品之間在物種豐富度和均勻程度上沒有出現(xiàn)較大的差異。但微生物群落結(jié)構(gòu)表現(xiàn)出明顯的差異,尤其是優(yōu)勢菌群的改變。而東營的污染土壤樣品與空白對(duì)照相比,微生物物種豐富度明顯減少,優(yōu)勢菌種亦表現(xiàn)出一定的差異。并且與未被石油烴污染的土壤樣品相比,污染土壤樣品中的優(yōu)勢菌株Salinimicrobium、海桿菌屬(Marinobacter)、革蘭菌屬(Gramella)、交替赤桿菌屬(Altererythrobacter)和Segetibacter、海桿菌屬(Marinobacter)、Gillilia和鹽單胞菌屬(Halomonas)的相對(duì)豐富度明顯減少�？梢钥闯�,嚴(yán)重的石油烴污染會(huì)對(duì)當(dāng)?shù)赝寥拉h(huán)境產(chǎn)生一定的影響。
【圖文】：

在１８邋°Ｃ、２８邋°Ｃ和３８邋°Ｃ三種不同的溫度下培養(yǎng)，測量并記錄培養(yǎng)液的吸光逡逑值，，最終繪制成生長曲線。逡逑菌株ＤＹ－Ｏ－邋１的生長曲線如圖３－１所示：逡逑菌株ＤＹ－０－１邐—－成逡逑２－°邋＇邐＊邋＊邋＊邋￣－４逡逑１．８邋Ｉ邐＾；＾＾＾：：：：：：：：：：：＾邐邐－？邋－＊－３８＾：逡逑３：：；逡逑１－１邐／逡逑：：丨Ａ逡逑０．０邐Ｔ－———ｒ—邋邋邋邋邋邋邐邐邐邋邐邋邐：〗逡逑０邐４邐８邋１２邋１６邋２０邋２４邋２８邋３２邋３６邋４０邋４４邋４８邋５２邋５６逡逑培養(yǎng)時(shí)間（ｈ）逡逑圖３－１菌株ＤＹ－Ｏ－１的生長曲線逡逑Ｆｉｇ．邋３＿１邋Ｔｈｅ邋ｇｒｏｗｔｈ邋ｃｕｒｖｅ邋ｏｆ邋ＤＹ－Ｏ－１逡逑菌株ＤＹ－Ｏ－１的生長曲線在２８邋°Ｃ和３８邋°Ｃ條件下大致相同，在１８邋°Ｃ時(shí)不逡逑１９逡逑

１８邋°Ｃ時(shí)的對(duì)數(shù)期持續(xù)的時(shí)間更長，長達(dá)１２邋ｈ。２８邋°Ｃ和３８邋°Ｃ的條件下穩(wěn)定期持逡逑續(xù)時(shí)間較長，長達(dá)４０邋ｈ。逡逑菌株ＤＹ－０－４的生長曲線如圖３－２所示：逡逑菌株ＤＹ－Ｏ－４邐—－１８Ｔ：逡逑—？邋－？－２ｓｒ逡逑１．８邋邐逡逑１．６邋；邐十邋３８１逡逑ＩＥ－逡逑：ｊ邋／逡逑：：逡逑０邐４邐８邋１２邋１６邋２０邋２４邋２８邋３２邋３６邋４０邋４４邋４８邋５２邋５６逡逑培養(yǎng)時(shí)間（ｈ）逡逑圖３－２菌株ＤＹ－Ｏ－４的生長曲線逡逑Ｆｉｇ．邋３－２邋Ｔｈｅ邋ｇｒｏｗｔｈ邋ｃｕｒｖｅ邋ｏｆ邋ＤＹ－Ｏ－４逡逑菌株ＤＹ－Ｏ－４在２８邋°Ｃ和３８邋°Ｃ下菌株的生長曲線大致相同，２８邋°Ｃ時(shí)菌株的逡逑生長量與３８邋°Ｃ時(shí)相比較大。從生長量上來看，２８邋°Ｃ時(shí)進(jìn)入穩(wěn)定期后的細(xì)菌生逡逑長量最大，３８邋°Ｃ比其略低，１８邋°Ｃ生長量最小。從生長周期來看，２８邋°Ｃ和３８邋°Ｃ逡逑時(shí)菌株進(jìn)入對(duì)數(shù)期較快，１８邋°Ｃ時(shí)菌株在１６ｈ后進(jìn)入對(duì)數(shù)期，與兩個(gè)溫度下的生逡逑長曲線相比較慢；２８邋°Ｃ和３８邋°Ｃ時(shí)菌株的穩(wěn)定期比１８邋°Ｃ時(shí)的長。逡逑菌株ＤＹ－０－５的生長曲線如圖３－３所示：逡逑２０逡逑
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：X74;X172

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本文編號(hào)：2639019