本文關(guān)鍵詞：石油污染對紫茉莉及根際微生物種群多樣性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：隨著石油的大量開采應(yīng)用,石油污染情況也日益加劇,引起人們的關(guān)注。本論文是以石油污染處理情況下的紫茉莉根際土壤為研究對象,測定了石油污染的不同處理時間、不同處理濃度下的土壤中過氧化氫酶、多酚氧化酶、脲酶的活性變化情況,并采用高通量測序技術(shù)分析,通過對土壤細菌的16S RNA的V4區(qū)的擴增子測序,探究紫茉莉根際土壤中細菌群落的多樣性變化情況,對石油脅迫下紫茉莉根際土壤細菌的群落結(jié)構(gòu)多樣性進行DNA水平分析,為研究紫茉莉的生物修復(fù)尤其是植物-微生物的聯(lián)合修復(fù)機制提供理論支持,研究結(jié)果如下所示：1、石油污染能對紫茉莉和二月蘭的的生長產(chǎn)生影響。在種子萌發(fā)過程中,植物受到石油污染的影響,紫茉莉種子的發(fā)芽率大于二月蘭種子的發(fā)芽率,且兩種植物的發(fā)芽率均呈現(xiàn)下降趨勢。在試驗初期(15 d),高濃度的石油污染(10g/kgg和15g/kg)對兩種植物均有促進作用,在試驗后期(30d、45d、60d),石油明顯抑制了二月蘭的生長。隨著石油濃度的逐漸升高,紫茉莉的根長和根鮮重增大,而二月蘭根長與根鮮重明顯減少。根長和株高的隨著石油濃度的變化,兩者間存在顯著的正相關(guān)。2、監(jiān)測紫茉莉根際土壤酶活性的變化,本實驗石油處理濃度為0g/kg、5g/kg、10 g/kg和15 g/kg,分別在15d、30d、45d和60d進行土壤取樣。低濃度處理時過氧化氫酶活最低,之后略微恢復(fù)活性,但差異并不顯著。不同時間處理組的酶活變化會隨時間的延長略有升高,但亦不顯著。多酚氧化酶隨著石油濃度的升高,多酚氧化酶的活性呈現(xiàn)先增加后又緩慢下降趨勢。在15g/kg較高濃度的石油污染脅迫下,多酚氧化酶的活性在第30 d時達到整個實驗的最大值。脲酶跟多酚氧化酶的規(guī)律大致一樣,隨著石油濃度的增大,脲酶活性呈現(xiàn)先升高再下降趨勢。觀察對照組ck的數(shù)值,均小于種植紫茉莉的脲酶活性,且隨時間增加變化明顯。石油污染物能對不同土壤酶產(chǎn)生不同的影響,并且酶的響應(yīng)時間略有不同。3、石油污染對紫茉莉根際微生物種群多樣性有一定的影響。通過OTU維恩圖對比發(fā)現(xiàn),在石油脅迫下紫茉莉的OTU數(shù)量增多,根據(jù)測定清潔土壤中二月蘭和紫茉莉的根際微生物數(shù)量顯示,二月蘭根際微生物要多于紫茉莉根際微生物,且都多于無植物的清潔土壤；石油脅迫下,紫茉莉的根際土壤微生物要比二月蘭根際微生物數(shù)量多,說明在石油脅迫下紫茉莉比二月蘭更利于微生物生長。通過運用微生物16S RNA的V4區(qū)擴增子測序的方法對細菌種群多樣性分析,發(fā)現(xiàn)石油污染土壤中的微生物多樣性明顯減少；在石油脅迫下,種植紫茉莉可以使石油污染的土壤的根際微生物多樣性增加,且豐度較高的細菌種類為：Opitutus、Sphingobium、Actinocorallia等。
【關(guān)鍵詞】：石油污染 紫茉莉 種群多樣性 土壤酶 高通量測序
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：X74;X172
【目錄】：

• 摘要8-9
• Abstract9-11
• 第一章 文獻綜述11-22
• 1.1 石油污染情況概述11-13
• 1.1.1 石油污染現(xiàn)狀11
• 1.1.2 石油污染對土壤的危害11-12
• 1.1.3 石油污染對土壤微生物的影響12-13
• 1.2 石油污染土壤的修復(fù)研究13-16
• 1.2.1 物理化學(xué)修復(fù)方式13
• 1.2.2 生物修復(fù)13-15
• 1.2.3 植物-微生物聯(lián)合修復(fù)15-16
• 1.3 土壤酶對石油污染的響應(yīng)16-17
• 1.4 土壤微生物多樣性的研究方法及意義17-21
• 1.4.1 土壤微生物多樣性的研究意義17-18
• 1.4.2 微生物多樣性主要研究方法18-21
• 1.5 研究的目的與意義21-22
• 第二章 石油對紫茉莉生長的影響22-28
• 2.1 試驗材料22
• 2.1.1 試驗植物22
• 2.1.2 供試土壤22
• 2.2 試驗方法22-23
• 2.2.1 培養(yǎng)皿發(fā)芽試驗22
• 2.2.2 植物株高、根長和根鮮重22-23
• 2.3 結(jié)果分析23-26
• 2.3.1 石油對種子發(fā)芽率的影響23
• 2.3.2 石油污染對植物株高的影響23-24
• 2.3.3 石油污染對植物的根鮮重、根長的影響24-26
• 2.4 討論26-28
• 第三章 石油污染對紫茉莉根際土壤關(guān)鍵酶的影響28-33
• 3.1 試驗材料28
• 3.1.1 供試植物28
• 3.1.2 供試土壤28
• 3.2 試驗方法28-29
• 3.2.1 過氧化氫酶活性的測定28
• 3.2.2 多酚氧化酶活性的測定28-29
• 3.2.3 脲酶活性的測定29
• 3.3 結(jié)果與分析29-31
• 3.3.1 不同濃度石油污染對紫茉莉根際土壤過氧化氫酶活性的影響29
• 3.3.2 不同濃度石油污染對紫茉莉根際土壤多酚氧化酶活性的影響29-30
• 3.3.3 不同濃度石油污染對紫茉莉的根際土壤脲酶活性的影響30-31
• 3.4 討論31-33
• 第四章 石油對紫茉莉根際土壤微生物種群多樣性分析33-50
• 4.1 試驗材料33-34
• 4.1.1 供試植物33
• 4.1.2 供試土壤33-34
• 4.1.3 試驗主要試劑34
• 4.1.4 主要試驗儀器34
• 4.2 方法34-36
• 4.2.1 總DNA的提取34-35
• 4.2.2 瓊脂糖凝膠電泳檢測35
• 4.2.3 PCR擴增35
• 4.2.4 PCR擴增體系及程序35
• 4.2.5 PCR產(chǎn)物電泳檢測35
• 4.2.6 序列的測定及生物信息學(xué)分析35-36
• 4.3 結(jié)果與分析36-48
• 4.3.1 根際土壤樣品總DNA提取36
• 4.3.2 PCR擴增結(jié)果36
• 4.3.3 測序結(jié)果36-48
• 4.4 討論48-50
• 第五章 結(jié)論50-51
• 5.1 石油對紫茉莉生長的影響50
• 5.2 石油對紫茉莉根際土壤酶活性的影響50
• 5.3 石油污染對紫茉莉根際土壤細菌種群多樣性的影響50-51
• 參考文獻51-55
• 致謝55-56

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