本文關(guān)鍵詞：綠盲蝽氣味受體基因AlucOR40的克隆及功能研究

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【摘要】：【目的】從綠盲蝽Apolygus lucorum觸角中克隆氣味受體基因Aluc OR40,研究該氣味受體基因在綠盲蝽不同組織中的表達(dá)水平,然后對(duì)該基因的功能進(jìn)行研究,為理解綠盲蝽的嗅覺識(shí)別機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。【方法】在綠盲蝽成蟲觸角轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與分析的基礎(chǔ)上,通過PCR技術(shù)克隆得到氣味受體基因Aluc OR40的全長(zhǎng)序列。用半定量RT-PCR研究該基因在雌雄蟲不同組織中的表達(dá)水平。然后通過爪蟾卵母細(xì)胞體外表達(dá)該基因,并結(jié)合雙電極電壓鉗檢測(cè)了該氣味受體對(duì)60種氣味分子包括綠盲蝽性信息素組分和植物揮發(fā)物的反應(yīng)。然后,利用觸角電位技術(shù)測(cè)定羽化后3 d的綠盲蝽成蟲對(duì)Aluc OR40的氣味配體的觸角電位反應(yīng)。【結(jié)果】克隆了Aluc OR40(Gen Bank登錄號(hào):KU886190)。Aluc OR40編碼398個(gè)氨基酸,蛋白具有7個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,N末端位于胞內(nèi),C端位于細(xì)胞外,符合昆蟲氣味受體的典型特征。半定量RT-PCR的結(jié)果顯示,Aluc OR40在觸角中特異表達(dá),且在雄蟲觸角中的表達(dá)水平高于雌蟲。雙電極電壓鉗記錄結(jié)果顯示,Aluc OR40只對(duì)反-2-己烯醇一種氣味分子具有特異反應(yīng)。EAG實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,羽化后3 d的綠盲蝽雌雄蟲都對(duì)反-2-己烯醇有反應(yīng),且雄蟲觸角的EAG反應(yīng)顯著高于雌蟲。【結(jié)論】結(jié)果提示Aluc OR40參與了綠盲蝽對(duì)反-2-己烯醇的識(shí)別過程,推測(cè)其在綠盲蝽交配過程中雄蟲對(duì)雌蟲的識(shí)別中發(fā)揮作用。
【作者單位】： 山西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 綠盲蝽 氣味受體 半定量RT-PCR 雙電極電壓鉗 觸角電位
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31471833,31301245)
【分類號(hào)】：S433
【正文快照】：

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：995567