生防菌密旋鏈霉菌Act12中SPA7074缺失突變株的構(gòu)建及其次級(jí)代謝產(chǎn)物鑒定
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【摘要】:【目的】通過(guò)基因工程手段構(gòu)建生防菌Act12轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子SPA7074缺失突變株,并挖掘其中活性次級(jí)代謝產(chǎn)物資源和探討其活性機(jī)理!痉椒ā坷猛粗亟M方法敲除Act12基因組中可能的Tet R家族轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子編碼基因spa7074(accession number:KU955325),平板實(shí)驗(yàn)檢測(cè)缺失突變株發(fā)酵液抑菌活性的變化,并通過(guò)HPLC比較代謝圖譜,然后通過(guò)質(zhì)譜及核磁共振對(duì)差異峰對(duì)應(yīng)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。【結(jié)果】SPA7074缺失突變株對(duì)幾種病原真菌的拮抗活性顯著增強(qiáng),比較代謝圖譜表明出現(xiàn)數(shù)個(gè)差異峰,將最顯著差異峰所對(duì)應(yīng)化合物進(jìn)行分離純化鑒定,結(jié)果為寡霉素D!窘Y(jié)論】本研究通過(guò)基因工程手段敲除生防菌株Act12中的負(fù)轉(zhuǎn)錄調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子,使得突變菌株抑菌活性顯著增強(qiáng),并獲得了產(chǎn)量達(dá)野生型菌株7倍的寡霉素D高產(chǎn)菌株Δspa7074。
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;西北農(nóng)林科技大學(xué)資源環(huán)境學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 生防菌 密旋鏈霉菌Act TetR家族 基因中斷 寡霉素D
【基金】:陜西省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新與攻關(guān)(2015NY066) 上海交通大學(xué)微生物代謝國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金(MMLKF14-09) 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)(Z109021426,Z109021432) 高校博士點(diǎn)基金(20120204120034,20120204120042)~~
【分類號(hào)】:S476.1
【正文快照】: 鏈霉菌是一類高G+C含量的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,產(chǎn)生的抗生素種類繁多,結(jié)構(gòu)豐富多樣,生理活性廣泛,占目前已市場(chǎng)化的天然產(chǎn)物來(lái)源抗生素的三分之二[1]。這些活性物質(zhì)的產(chǎn)生通常受到復(fù)雜而龐大的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的控制,所以,盡管鏈霉菌的基因組中蘊(yùn)藏著非常豐富的次級(jí)代謝產(chǎn)物生物合成基因簇
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,本文編號(hào):892525
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