發(fā)布時間：2017-09-20 08:37

  本文關(guān)鍵詞：PMA-PCR方法快速檢測VBNC狀態(tài)青枯菌

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【摘要】：青枯菌為應(yīng)對逆境脅迫,可進入活的但非可培養(yǎng)狀態(tài)(viable but non-culturable,VBNC)。本文利用疊氮溴化丙錠(PMA)與PCR技術(shù)相結(jié)合,建立了一種快速有效區(qū)分青枯菌死活細胞的分子檢測方法。基于hrcS基因序列,設(shè)計了一對青枯菌種特異性檢測引物hrcSf/hrcSr;利用PMA對青枯菌Po82菌株的細胞懸浮液樣品進行預(yù)處理,隨后進行常規(guī)PCR擴增。結(jié)果表明,當(dāng)樣品中PMA質(zhì)量濃度為3μg/mL、曝光時間大于5min時,PMA可有效抑制死亡菌體細胞中的DNA擴增;且對可培養(yǎng)和VBNC狀態(tài)細胞中的DNA擴增沒有影響;本試驗建立的PMA-PCR方法能有效對包括VBNC狀態(tài)在內(nèi)的青枯菌活菌進行檢測,避免了假陽性與假陰性結(jié)果的產(chǎn)生。
【作者單位】： 天津農(nóng)學(xué)院園藝園林學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所植物病蟲害生物學(xué)國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 青枯菌 疊氮溴化丙錠 活的非可培養(yǎng)狀態(tài)
【基金】：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201303015) 國家自然科學(xué)基金(31272008;31371908) 天津市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣項目(201002250)
【分類號】：S432.4
【正文快照】： (1.College of Horticulture and Landscape,Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China;2.Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,State Key Laboratory forBiology of Plant Diseases and Insect Pests,Beijing 100193,China

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本文編號：887037