本文關鍵詞：小菜蛾觸角結(jié)合蛋白PxylOBP31的鑒定與結(jié)合特性分析

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【摘要】：【目的】觸角結(jié)合蛋白(antennal binding proteins,ABPs)為昆蟲氣味結(jié)合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)家族的一個亞類,是昆蟲識別和響應外界環(huán)境中氣味信號的載體之一,對昆蟲的生存和繁衍有著重要的意義。明確觸角結(jié)合蛋白在小菜蛾Plutella xylostella(L.)嗅覺識別中的作用,有助于揭示小菜蛾嗅覺識別分子機制�！痉椒ā坷肞CR技術(shù)克隆小菜蛾的一個觸角結(jié)合蛋白基因;采用實時熒光定量PCR技術(shù)對該基因在小菜蛾不同發(fā)育階段和成蟲不同組織中的表達量進行分析;利用熒光競爭結(jié)合實驗測試該觸角結(jié)合蛋白與39種配基化合物的結(jié)合特性�！窘Y(jié)果】成功克隆了一個小菜蛾觸角結(jié)合蛋白基因,命名為Pxyl OBP31(Gen Bank登錄號:KT156676)。序列分析結(jié)果顯示,其開放閱讀框全長411 bp,編碼136個氨基酸,N端自起始位置開始21個氨基酸為信號肽,含有氣味結(jié)合蛋白家族的6個保守半胱氨酸殘基,預測分子量為14.74 k D,等電點為4.41。表達譜分析表明,Pxyl OBP31主要在雄蛾中表達,且交配后的雄蛾中表達量明顯降低;該基因在小菜蛾觸角中有較高表達,在雄蛾觸角中的表達量比雌蛾觸角中高近2倍。結(jié)合特性實驗結(jié)果顯示,Pxyl OBP31與醛、酮、萜品油烯以及鄰苯二甲酸二異丁酯等物質(zhì)的結(jié)合能力較強,與3種性信息素及其他烯烴與酯類結(jié)合能力弱。【結(jié)論】本研究明確了Pxyl OBP31的核苷酸序列以及發(fā)育和組織表達譜。根據(jù)qRT-PCR和熒光競爭結(jié)合實驗結(jié)果,推測Pxyl OBP31蛋白可能與小菜蛾覓偶、定位寄主植物等行為有關。
【作者單位】： 福建農(nóng)林大學應用生態(tài)研究所;閩臺特色作物病蟲生態(tài)防控協(xié)同創(chuàng)新中心;農(nóng)業(yè)部閩臺作物有害生物綜合治理重點實驗室;福建農(nóng)林大學植物保護學院;福建農(nóng)林大學生命科學學院;
【關鍵詞】： 小菜蛾 氣味結(jié)合蛋白 觸角結(jié)合蛋白 基因克隆 表達譜 熒光競爭結(jié)合試驗
【基金】：國家自然科學基金項目(31301666;31230061;31320103922) 福建省自然科學基金項目(2014J05031)
【分類號】：S433.4
【正文快照】： 小菜蛾Plutella xylostella(L.)屬鱗翅目(Lepidopetera)菜蛾科(Plutellidae),是為害十字花科作物的重要害蟲之一,其分布遍及世界所有十字花科蔬菜種植區(qū)(Furlong et al.,2013)。據(jù)節(jié)肢動物農(nóng)藥抗性數(shù)據(jù)庫(APRD,http://www.pesticideresistance.com)統(tǒng)計結(jié)果顯示,目前小菜蛾已

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