本文關(guān)鍵詞：蓮田微生物多樣性及蓮腐敗病防治研究技術(shù)

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【摘要】：蓮腐敗病是由尖孢鐮刀菌(Fusarium.oxysporum f.sp.nelumbicola)引起的一種土壤傳播性病害,該病害已嚴(yán)重制約了我國白蓮產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。目前對尖孢鐮刀菌引起的土傳病害研究主要集中在番茄枯萎病、香蕉枯萎病、棉花枯萎病等病害致病機(jī)制及防治等方面,而在蓮腐敗病的研究也僅限于基本的防治。為了進(jìn)一步探明該病害的連作障礙及防治措施,本試驗(yàn)研究內(nèi)容如下:1.蓮?fù)寥牢⑸锒鄻有匝芯�。采用傳統(tǒng)的土壤稀釋法分離出不同連作年限的蓮?fù)粮H可培養(yǎng)微生物,并對其種類進(jìn)行初步鑒定。并通過變性梯度凝膠電泳(PCR-DGGE)的方法對不同連坐年限的健康與發(fā)病田塊微生物種群進(jìn)行分析,結(jié)果表明健康田塊細(xì)菌種群多樣性明顯高于發(fā)病田塊。同時利用高通量測序技術(shù)對采集的蓮?fù)寥罉悠肺⑸锓N類及多態(tài)性進(jìn)行分析。結(jié)果顯示在各蓮田土樣品中,健康田塊細(xì)菌數(shù)量和多樣性隨著連作年限增加,多樣性指數(shù)也增加;而發(fā)病田塊細(xì)菌種群及多樣性指數(shù)變化不大。田間有益微生物的種群數(shù)量下降可能是導(dǎo)致連作障礙的根本原因。2.生防菌篩選及種類鑒定。采用土壤稀釋法篩選出土壤中對蓮腐敗病菌有抑制作用的細(xì)菌。結(jié)果表明編號為YJa1、YJa2和YJa4的3株菌種對蓮腐敗病菌抑制效果明顯,選取抑制效果最好的菌株YJa2,并摸索其發(fā)酵條件,最終發(fā)現(xiàn)pH7.0的PSA培養(yǎng)基,32℃培養(yǎng)條件下培養(yǎng)的發(fā)酵液對蓮腐敗病菌的抑菌效果最佳。3.室內(nèi)藥劑篩選。本實(shí)驗(yàn)采用菌絲生長速率法研究了9種化學(xué)藥劑對蓮腐敗病病菌的室內(nèi)毒力大小,結(jié)果表明氟環(huán)唑、烯唑醇、多菌靈、戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、己唑醇、粉唑醇這7種原藥對蓮腐敗病病菌具有較強(qiáng)的毒力,其EC50值依次為0.1023μg/ml、0.1129μg/ml、0.1284μg/ml、0.5089μg/ml、0.5609μg/ml、1.0583μg/ml、1.2797μg/ml;惡霉靈對蓮腐敗病病菌的毒力較弱,其EC50值為81.40μg/ml;而吩氨霉素對蓮腐敗病病菌的毒力最弱,其EC50值高達(dá)1220.97μg/ml。
【關(guān)鍵詞】：蓮腐敗病 微生物多樣性 殺菌劑毒力測定 防治
【學(xué)位授予單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S436.45;S154.3
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 英文縮寫詞及中文對照表8-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-16
• 1.1 蓮的特征10
• 1.2 蓮的價值10-11
• 1.2.1 蓮的食用價值和藥用價值10-11
• 1.2.2 蓮的觀賞價值和藝術(shù)價值11
• 1.3 白蓮腐敗病11-12
• 1.3.1 白蓮腐敗病的病原與癥狀11-12
• 1.3.3 白蓮腐敗病的發(fā)生與流行規(guī)律12
• 1.4 蓮腐敗病的研究現(xiàn)狀12-14
• 1.4.1 生物防治與生防菌12-14
• 1.5 研究背景及意義14
• 1.6 課題來源及研究內(nèi)容14-15
• 1.7 技術(shù)路線15-16
• 第二章 蓮田微生物分離鑒定及蓮根際微生物種群多樣性研究16-32
• 2.1 材料16-19
• 2.1.1 供試土壤16
• 2.1.2 供試培養(yǎng)基16
• 2.1.3 主要供試儀器16-17
• 2.1.4 主要供試的藥劑及試劑的配制17-18
• 2.1.5 引物18-19
• 2.2 方法19-25
• 2.2.1 土壤中細(xì)菌和真菌的分離鑒定19
• 2.2.2 細(xì)菌基因組DNA提取19-20
• 2.2.3 細(xì)菌 16S rDNA序列的擴(kuò)增及測定20
• 2.2.4 土壤DNA的提取20-21
• 2.2.5 土壤DNA序列的擴(kuò)增21-22
• 2.2.6 巢氏PCR22-23
• 2.2.7 采用DGGE技術(shù)對蓮?fù)林形⑸锏娜郝溥M(jìn)行分析23-24
• 2.2.8 高通量測序樣品制備24
• 2.2.9 文庫構(gòu)建和上機(jī)測序24-25
• 2.3 結(jié)果與分析25-30
• 2.3.1 細(xì)菌DNA電泳25-26
• 2.3.2 土壤細(xì)菌測序鑒定26
• 2.3.3 蓮田土樣DNA的擴(kuò)增結(jié)果26
• 2.3.4 土壤PCR-DGGE分析26-27
• 2.3.5 土壤高通量測序分析27-30
• 2.4 小結(jié)與討論30-32
• 第三章 生防菌的篩選及培養(yǎng)條件的研究32-38
• 3.1 材料32-33
• 3.1.1 供試病原菌32
• 3.1.2 供試生防菌32
• 3.1.3 供試培養(yǎng)基32
• 3.1.4 主要儀器設(shè)備32-33
• 3.2 方法33-35
• 3.2.1 生防菌的篩選33-34
• 3.2.2 不同培養(yǎng)基的影響34
• 3.2.3 不同pH培養(yǎng)基影響34
• 3.2.4 不同培養(yǎng)溫度的影響34-35
• 3.3 結(jié)果與分析35-36
• 3.3.1 初篩結(jié)果35
• 3.3.2 復(fù)篩結(jié)果35
• 3.3.3 不同培養(yǎng)基對菌株YJa2抑菌活性的影響35-36
• 3.3.4 不同pH培養(yǎng)基對菌株YJa2抑菌活性的影響36
• 3.3.5 不同培養(yǎng)溫度對菌株YJa2抑菌活性的影響36
• 3.4 小結(jié)與討論36-38
• 第四章 藥劑篩選38-44
• 4.1 材料38-39
• 4.1.1 供試菌株38
• 4.1.2 供試藥劑38
• 4.1.3 供試培養(yǎng)基38
• 4.1.4 供試主要儀器38-39
• 4.2 方法39-40
• 4.2.1 致病性測定39
• 4.2.2 藥劑對蓮腐敗病菌絲生長抑制實(shí)驗(yàn)步驟39-40
• 4.3 結(jié)果與分析40-42
• 4.3.1 病原菌的致病性40
• 4.3.2 藥劑篩選40-42
• 4.4 小結(jié)與討論42-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 致謝48

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本文編號：704112