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棉鈴蟲(chóng)V-ATP酶亞基A基因克隆及表達(dá)譜分析

發(fā)布時(shí)間:2017-08-16 04:24

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【摘要】:為探索棉鈴蟲(chóng)Helicoverpa armigera液泡型ATP酶(vacuolar-type proton ATPase,V-ATP酶)亞基A對(duì)棉鈴蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響及其在Bt殺蟲(chóng)機(jī)制中的作用,采用PCR結(jié)合RACE技術(shù)克隆了棉鈴蟲(chóng)V-ATP酶亞基A基因序列,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)測(cè)定了其在棉鈴蟲(chóng)不同發(fā)育歷期和幼蟲(chóng)腸道不同組織中的表達(dá)量;并比較了4齡幼蟲(chóng)取食含Cry1Ac蛋白飼料后中腸中該基因表達(dá)量的變化。結(jié)果顯示,棉鈴蟲(chóng)V-ATP酶亞基A基因全長(zhǎng)2 578 bp(Gen Bank登錄號(hào)KP090287),開(kāi)放閱讀框1 863 bp,編碼621個(gè)氨基酸。V-ATP酶亞基A高度保守,不同物種間氨基酸序列同源性大于90%。V-ATP酶亞基A在棉鈴蟲(chóng)整個(gè)生育期都有表達(dá),在4齡幼蟲(chóng)體內(nèi)表達(dá)量最高,是卵期的3.00倍;在幼蟲(chóng)腸道不同組織中,中腸中表達(dá)量最高,是后腸中的2.65倍。4齡棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)取食含Cry1Ac蛋白的人工飼料后,中腸V-ATP酶亞基A的表達(dá)受到抑制,表達(dá)量為對(duì)照的0.39~0.81倍。表明V-ATP酶亞基A基因可能參與棉鈴蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育和代謝過(guò)程,并可能與抵御Cry1Ac的毒殺作用有一定關(guān)系。
【作者單位】: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲(chóng)害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
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【正文快照】: Kakinuma et al.(1981)首次在酵母細(xì)胞的液泡膜上發(fā)現(xiàn)了一種運(yùn)輸質(zhì)子的三磷酸腺苷酶(adeno-sine triphosphate,ATP),命名為液泡ATP酶(vacuo-lar-ATPase),簡(jiǎn)稱V-ATP酶。V-ATP酶廣泛分布于真核細(xì)胞原生質(zhì)膜和各種細(xì)胞器內(nèi)膜上(StevensForgac,1997),V-ATP酶通過(guò)利用水解ATP時(shí)所

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 趙西梅;以V-ATP酶為靶標(biāo)的二氫沉香呋喃衍生物的合成及其殺蟲(chóng)活性[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年

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本文編號(hào):681457

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