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棉鈴蟲V-ATP酶亞基A基因克隆及表達譜分析

發(fā)布時間:2017-08-16 04:24

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【摘要】:為探索棉鈴蟲Helicoverpa armigera液泡型ATP酶(vacuolar-type proton ATPase,V-ATP酶)亞基A對棉鈴蟲生長發(fā)育的影響及其在Bt殺蟲機制中的作用,采用PCR結(jié)合RACE技術(shù)克隆了棉鈴蟲V-ATP酶亞基A基因序列,通過實時熒光定量PCR技術(shù)測定了其在棉鈴蟲不同發(fā)育歷期和幼蟲腸道不同組織中的表達量;并比較了4齡幼蟲取食含Cry1Ac蛋白飼料后中腸中該基因表達量的變化。結(jié)果顯示,棉鈴蟲V-ATP酶亞基A基因全長2 578 bp(Gen Bank登錄號KP090287),開放閱讀框1 863 bp,編碼621個氨基酸。V-ATP酶亞基A高度保守,不同物種間氨基酸序列同源性大于90%。V-ATP酶亞基A在棉鈴蟲整個生育期都有表達,在4齡幼蟲體內(nèi)表達量最高,是卵期的3.00倍;在幼蟲腸道不同組織中,中腸中表達量最高,是后腸中的2.65倍。4齡棉鈴蟲幼蟲取食含Cry1Ac蛋白的人工飼料后,中腸V-ATP酶亞基A的表達受到抑制,表達量為對照的0.39~0.81倍。表明V-ATP酶亞基A基因可能參與棉鈴蟲的生長發(fā)育和代謝過程,并可能與抵御Cry1Ac的毒殺作用有一定關(guān)系。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所植物病蟲害生物學國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】棉鈴蟲 V-ATP酶亞基A 表達 蘇云金芽胞桿菌
【正文快照】: Kakinuma et al.(1981)首次在酵母細胞的液泡膜上發(fā)現(xiàn)了一種運輸質(zhì)子的三磷酸腺苷酶(adeno-sine triphosphate,ATP),命名為液泡ATP酶(vacuo-lar-ATPase),簡稱V-ATP酶。V-ATP酶廣泛分布于真核細胞原生質(zhì)膜和各種細胞器內(nèi)膜上(StevensForgac,1997),V-ATP酶通過利用水解ATP時所

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1 趙西梅;以V-ATP酶為靶標的二氫沉香呋喃衍生物的合成及其殺蟲活性[D];西北農(nóng)林科技大學;2016年



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