本文關(guān)鍵詞：西花薊馬氣味結(jié)合蛋白的cDNA克隆、序列分析及時(shí)空表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 西花薊馬 氣味結(jié)合蛋白 分子克隆 序列分析 時(shí)空表達(dá)

【摘要】：【目的】鑒定西花薊馬(Frankliniella occidentalis)氣味結(jié)合蛋白(odorant binding protein,OBP)并對(duì)其序列特征及分布情況進(jìn)行研究,為闡明該蟲嗅覺識(shí)別的機(jī)制、利用干擾昆蟲嗅覺識(shí)別來進(jìn)行害蟲防治提供依據(jù)�！痉椒ā坷肦T-PCR和RACE技術(shù)克隆西花薊馬氣味結(jié)合蛋白基因,用DNAMAN軟件進(jìn)行序列分析,用BLAST進(jìn)行同源性比較,并用MEGA6.0的鄰接法(neighbor-joining)構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,應(yīng)用服務(wù)器ChouFasman預(yù)測(cè)蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu),通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)該基因在西花薊馬不同發(fā)育期以及成蟲不同組織中的分布情況�！窘Y(jié)果】克隆了一個(gè)西花薊馬氣味結(jié)合蛋白基因,命名為Focc OBP1(Gen Bank登錄號(hào):KM527948);該基因c DNA序列全長660 bp,其中開放閱讀框450 bp,編碼149個(gè)氨基酸,3′端非編碼區(qū)長172 bp,具有真核生物poly A加尾結(jié)構(gòu),5′末端非編碼區(qū)長38 bp,預(yù)測(cè)成熟蛋白分子量為16.39 k D,等電點(diǎn)為7.46,N端有22個(gè)氨基酸組成的信號(hào)肽序列,具有氣味結(jié)合蛋白典型的6個(gè)保守半胱氨酸位點(diǎn)特征,其排列方式為C1-X26-C2-X3-C3-X40-C4-X9-C5-X8-C6,符合典型OBP 6個(gè)保守的半胱氨酸位點(diǎn)結(jié)構(gòu)模型。氨基酸序列中有3個(gè)親脂性區(qū)域,第74—83位的氨基酸殘基形成的親脂性口袋尤為明顯,可能是脂溶性氣味分子的結(jié)合位點(diǎn);Focc OBP1氨基酸序列與3個(gè)半翅目和10個(gè)同翅目昆蟲OBP聚在同一分支,其中與綠盲蝽(Apolygus lucorum)的Aluc OBP8(Gen Bank登錄號(hào)為AFJ54049.1)、苜蓿盲蝽(Adelphocoris lineolatus)的Alin OBP5(Gen Bank登錄號(hào)為ACZ58031.1)、牧草盲蝽(Lygus lineolaris)的Llin OBP2(Gen Bank登錄號(hào)為AHF71029.1)同源相似性最高,其次是棉蚜(Aphis gossypii)的Agos OBP7(Gen Bank登錄號(hào)為AGE97637.1)、大豆蚜(Aphis glycines)的Agly OBP7(Gen Bank登錄號(hào)為AHJ80893.1)、禾谷縊管蚜(Rhopalosiphum padi)的Rpad OBP7(Gen Bank登錄號(hào)為AHL30243.1)等昆蟲OBP,表明Focc OBP1與這些基因的親緣關(guān)系也較近;經(jīng)Focc OBP1蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè),Focc OBP1以α-螺旋為主,其次是β-折疊,轉(zhuǎn)角含量較少;經(jīng)不同發(fā)育階段檢測(cè)發(fā)現(xiàn),Focc OBP1在西花薊馬若蟲期和初羽化成蟲期的表達(dá)量較高,且隨成蟲羽化后天數(shù)的延長表達(dá)量逐漸降低,在雌雄成蟲間的表達(dá)量也有差異;在初羽化成蟲的不同組織檢測(cè)發(fā)現(xiàn),Focc OBP1幾乎在初羽化成蟲觸角中特異性表達(dá);構(gòu)建了重組表達(dá)質(zhì)粒p ET-30a/Focc OBP1。【結(jié)論】明確了Focc OBP1的核苷酸、氨基酸序列特征,分析了該蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)特征,根據(jù)Focc OBP1在西花薊馬中的時(shí)空表達(dá)情況,推測(cè)該基因可能在西花薊馬嗅覺識(shí)別、定位寄主植物、信息素合成或性行為方面扮演重要角色;成功構(gòu)建了重組表達(dá)質(zhì)粒p ET-30a/Focc OBP1,為下一步該蛋白表達(dá)純化及其功能的深入研究打下了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所寧夏植物病蟲害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲害生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;閩臺(tái)特色作物病蟲生態(tài)防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 西花薊馬 氣味結(jié)合蛋白 分子克隆 序列分析 時(shí)空表達(dá)
【基金】：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)資金(CARS-25-B-07) 寧夏自然科學(xué)基金(NZ15128) 寧夏農(nóng)林科學(xué)院科技創(chuàng)新先導(dǎo)資金(NKYJ-15-15) 北京韭菜安全生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)研究及科技示范基地建設(shè)(Z151100001215009)
【分類號(hào)】：S433.89
【正文快照】： Cloning,Sequence Analysis and Expression Profile of an OdorantBinding Protein Gene in Western Flower Thrips(Frankliniella occidentalis)ZHANG Zhi-ke1,2,WU Sheng-yong2,LEI Zhong-ren2,3 0引言【研究意義】西花薊馬(Frankliniella occidentalis)隸屬纓翅目(Thysano

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 沈國琴;西花薊馬的識(shí)別[J];青海農(nóng)技推廣;2004年04期

2 程峻峰,萬方浩,郭建英,張國安;外來有害入侵生物——西花薊馬[J];中國生物防治;2005年02期

3 陳月穎;西花薊馬的發(fā)生、識(shí)別與防治[J];吉林農(nóng)業(yè);2005年05期

4 陳洪俊,張友軍;西花薊馬的鑒別與檢疫[J];植物檢疫;2005年01期

5 陳志杰;李英梅;張鋒;張淑蓮;;警惕西花薊馬的發(fā)生及危害[J];西北園藝(蔬菜專刊);2008年02期

6 張愛國;;思茅區(qū)西花薊馬調(diào)查與防治[J];云南農(nóng)業(yè);2009年08期

7 張磊;李世界;;西花薊馬的危害與防治[J];河南農(nóng)業(yè);2010年21期

8 趙成銀;何余容;呂利華;鐘鋒;高燕;齊國君;邵曉迎;;西花薊馬的寄主、危害及防治措施[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年05期

9 高戈;賀洋;王華忠;;天津溫室西花薊馬種群分布及為害情況調(diào)查——以天津都市型現(xiàn)代農(nóng)業(yè)核心區(qū)為例[J];天津農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年03期

10 蓋海濤;郅軍銳;孫猛;;溫度對(duì)西花薊馬、花薊馬存活和繁殖的影響[J];植物保護(hù)學(xué)報(bào);2011年06期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張桂芬;劉循;孟祥欽;萬方浩;;西花薊馬在我國分布范圍的初步調(diào)查[A];生物入侵與生態(tài)安全——“第一屆全國生物入侵學(xué)術(shù)研討會(huì)”論文摘要集[C];2007年

2 張安盛;張思聰;門興元;李麗莉;于毅;;西花薊馬在山東省主要經(jīng)濟(jì)作物上分布的初步調(diào)查[A];第三屆全國生物入侵大會(huì)論文摘要集——“全球變化與生物入侵”[C];2010年

3 袁成明;郅軍銳;;寄主對(duì)西花薊馬生長發(fā)育及繁殖的影響[A];第二屆全國生物入侵學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2008年

4 張金平;張帆;范青海;;應(yīng)用實(shí)驗(yàn)種群生命表評(píng)價(jià)巴氏新小綏螨對(duì)西花薊馬的控制潛能[A];第二屆全國生物入侵學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2008年

5 郅軍銳;任順祥;;胡瓜鈍綏螨和花粉對(duì)天竺葵上西花薊馬的作用(英文)[A];農(nóng)業(yè)生物災(zāi)害預(yù)防與控制研究[C];2005年

6 張友軍;;危險(xiǎn)外來入侵生物—西花薊馬分布與應(yīng)急控制技術(shù)[A];提高全民科學(xué)素質(zhì)、建設(shè)創(chuàng)新型國家——2006中國科協(xié)年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2006年

7 王曉靈;張帆;;東亞小花蝽對(duì)西花薊馬控制能力的生命表方法評(píng)價(jià)[A];“回眸六十年，再創(chuàng)新局面”——北京昆蟲學(xué)會(huì)成立60周年紀(jì)念刊[C];2010年

8 楊現(xiàn)明;薛曉峰;洪曉月;;入侵生物西花薊馬在中國的入侵遺傳學(xué)的研究[A];江蘇省昆蟲學(xué)會(huì)第十三次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2012年

9 岳臻;郅軍銳;;西花薊馬與二斑葉螨種間關(guān)系研究概述[A];第三屆全國生物入侵大會(huì)論文摘要集——“全球變化與生物入侵”[C];2010年

10 張治軍;吳青君;張友軍;李學(xué)鋒;徐寶云;呂要斌;;外來入侵害蟲—西花薊馬分子鑒定[A];生物入侵與生態(tài)安全——“第一屆全國生物入侵學(xué)術(shù)研討會(huì)”論文摘要集[C];2007年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 中化化肥高級(jí)顧問 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)教授 肖悅巖;防治西花薊馬重在早[N];農(nóng)資導(dǎo)報(bào);2013年

2 央視;我國新發(fā)現(xiàn)外來入侵生物西花薊馬[N];中國國門時(shí)報(bào);2003年

3 本報(bào)記者 寧欽廣　通訊員 王鵬 安靜;外來入侵害蟲西花薊馬防控取得新進(jìn)展[N];山東科技報(bào);2011年

4 記者 葉玉躍　通訊員 杜瓊;入侵者遭遇終結(jié)者[N];浙江日?qǐng)?bào);2011年

5 ;病蟲害防治指南[N];中國花卉報(bào);2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張治科;西花薊馬嗅覺相關(guān)蛋白鑒定及功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 吳圣勇;白僵菌、巴氏新小綏螨和西花薊馬間的互作關(guān)系研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

3 范凡;基于害蟲—天敵關(guān)系的西花薊馬—東亞小花蝽趨光性的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)及其行為機(jī)理[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

4 陳洪俊;西花薊馬和三葉草斑潛蠅在中國的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及管理對(duì)策研究[D];北京林業(yè)大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 游中華;常見薊馬的分子鑒定及中國3地區(qū)西花薊馬遺傳差異分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

2 張金平;北京地區(qū)植綏螨調(diào)查及巴氏新小綏螨對(duì)西花薊馬控制能力研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2008年

3 劉秋磊;多殺菌素抗性西花薊馬轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及nAChRα5和α7亞基的克隆分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

4 李娟;防治西花薊馬的白僵菌耐熱性及可濕性粉劑研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

5 陳銳芬;西花薊馬對(duì)寄主植物的適應(yīng)特性研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2011年

6 單彩慧;防治西花薊馬藥劑的室內(nèi)篩選及其對(duì)噻蟲嗪的抗性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 馬鶴娟;加州新小綏螨對(duì)西花薊馬的控制作用初探[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

8 李景柱;西花薊馬與豆科蔬菜相互關(guān)系研究[D];貴州大學(xué);2008年

9 程俊峰;外來有害生物西花薊馬在中國的適生性風(fēng)險(xiǎn)分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

10 楊帆;水楊酸、茉莉酸甲酯誘導(dǎo)黃瓜對(duì)西花薊馬（纓翅目：薊馬科）的抗性[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：668108