本文關鍵詞：黃曲霉細胞壁蛋白AFLMP1的基因克隆與原核表達

  更多相關文章： 黃曲霉 細胞壁蛋白 基因克隆 可溶性表達

【摘要】：根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫中的黃曲霉細胞壁蛋白AFLMP1的基因序列設計特異引物,以黃曲霉菌總RNA逆轉錄獲得的c DNA為模板,PCR擴增目的基因后分別克隆到p GEX-6p-1和p ET-22b原核表達載體中,轉化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞。重組大腸桿菌經IPTG誘導表達后超聲波破碎提取可溶性蛋白,SDS-PAGE電泳和Western雜交檢測表達產物,結果表明GST-AFLMP1和AFLMP1-His融合蛋白能夠在大腸桿菌中大量可溶性表達,可分別作為制備AFLMP1特異抗體的免疫抗原和篩選抗原。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學生物與醫(yī)學工程重點實驗室貴州醫(yī)科大學醫(yī)藥生物技術工程研究中心貴州醫(yī)科大學生物與工程學院;
【關鍵詞】： 黃曲霉 細胞壁蛋白 基因克隆 可溶性表達
【基金】：國家自然科學基金資助項目(31260227,31660258) 中國博士后科學基金(2015M582758XB) 貴州省科技創(chuàng)新人才團隊項目(黔科合人才團隊(2015)4021) 貴州省科技項目(黔科合LH字[2014]7092) 貴州省高校優(yōu)秀科技創(chuàng)新人才支持計劃(黔教合KY字[2014]244) 貴陽市科技計劃項目(筑科合同[2014]37號) 國家級大學生創(chuàng)新訓練計劃項目(201510660001)基金共同資助
【分類號】：S432.44
【正文快照】： Gene Cloning and Prokaryotic Expression of the Cell Wall Protein AFLMP1of Aspergillus flavusZhou Jing Zhao Xue Xia Xue Wang Yun Meng Fuxue Huang Jiangtao Guo Ting Zeng Zhu HuZuquan*Key Laboratory of Biological and Medical Engineering,Engineering Research

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳錦榮;基因克隆[J];微生物學免疫學譯刊;1985年02期

2 陳啟軍,李德昌;基因克隆的幾種常用方法[J];中國獸醫(yī)學報;1999年01期

3 涂友斌,王紀;圖位基因克隆[J];生物學雜志;1999年03期

4 ;中國克隆出解毒酶基因[J];世界熱帶農業(yè)信息;2000年03期

5 ;“九五”期間我國人類遺傳性疾病基因克隆研究取得重大進展[J];中國科技獎勵;2001年04期

6 周莎莎;;基因克隆與表達研究進展[J];現(xiàn)代農業(yè)科技;2008年22期

7 王桂花;孫霞;王致遠;趙德明;;小鼠腦14-3-3ζ蛋白的基因克隆及鑒定[J];中國畜牧獸醫(yī);2009年04期

8 戴順志;;1983年基因工程回顧[J];國外醫(yī)學(免疫學分冊);1984年06期

9 董龍英;凌俊;;高等植物磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的基因結構及其基因表達的調節(jié)[J];植物生理學通訊;1991年06期

10 顏真，韓葦，李芳梅，趙寧，，張英起;重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子基因的克隆與表達[J];第四軍醫(yī)大學學報;1994年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張春美;;論基因倫理的存在之基[A];生命、知識與文明：上海市社會科學界第七屆學術年會文集（2009年度）哲學·歷史·文學學科卷[C];2009年

2 張憲省;宿紅艷;李全梓;李興國;白書農;陸文梁;;風信子(Hyacinthus orientalis)HOM1基因的克隆與表達分析[A];西部大開發(fā) 科教先行與可持續(xù)發(fā)展——中國科協(xié)2000年學術年會文集[C];2000年

3 宿紅艷;李全梓;李興國;白書農;陸文j;張憲省;;風信子(Hyacinthus orientalis)HOM1基因的克隆與表達分析[A];全國植物分子生物學與生物技術學術研討會論文集[C];2000年

4 魏力;方加瑋;周俊初;李友國;;一株海洋單胞菌的分離、鑒定和相關功能基因克隆[A];2006中國微生物學會第九次全國會員代表大會暨學術年會論文摘要集[C];2006年

5 王怡;印莉萍;;OsArhI基因的克隆及功能分析[A];中國植物生理學會第十次會員代表大會暨全國學術年會論文摘要匯編[C];2009年

6 王盛;鐘伏弟;張永江;吳祖建;林奇英;謝聯(lián)輝;;海藻孔石莼中一種抗病毒蛋白的分離純化和基因克隆[A];第三次全國植物病毒和病毒防治學術研討會論文集[C];2003年

7 張上隆;;類胡蘿卜素合成的相關基因及其基因工程[A];張上隆果樹學文選[C];2006年

8 畢延震;鄭新民;喬憲鳳;劉西梅;周荊榮;華文君;李莉;肖紅衛(wèi);張立蘋;華再東;魏慶信;;一種無縫基因克隆方法[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物繁殖學分會第十六屆學術研討會論文集[C];2012年

9 李安娜;徐榮艷;申晨;郭曉紅;李多川;;嗜熱毛殼菌熱穩(wěn)定酶的基因克隆、表達及分子改造[A];2010年中國菌物學會學術年會論文摘要集[C];2010年

10 岳文;王冬梅;袁紅豐;裴雪濤;;干細胞分化調控新基因的篩選及其功能研究[A];第九屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2003年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 汪敏華;成功克隆2.1萬個功能基因[N];解放日報;2004年

2 張學全;克隆人類全長功能基因獲突破[N];中國高新技術產業(yè)導報;2004年

3 本報實習記者 王新佳;基因：改變人類命運的新技術[N];中國高新技術產業(yè)導報;2001年

4 張汝金;發(fā)現(xiàn)37條人類新基因[N];解放軍報;2003年

5 記者　謝軍;SARS病毒基因克隆、蛋白質表達等取得最新進展[N];光明日報;2003年

6 本報實習記者 申音 記者 王旗;基因不是.com[N];中國經營報;2000年

7 本報記者 周立文 本報通訊員 丁學國;中國基因三個人物與一個事業(yè)[N];光明日報;2000年

8 記者 張學全;克隆人類全長功能基因獲得重大進展[N];新華每日電訊;2004年

9 張武 本報記者 徐蘭山;打造基因“王國”[N];科技日報;2003年

10 本報記者 呂媛;基因控制家蠶生男不生女[N];北京科技報;2004年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔣桂雄;油桐種子轉錄組解析及油脂合成重要基因克隆[D];中南林業(yè)科技大學;2015年

2 熊華淇;常染色體隱性遺傳性多囊腎相關新基因的克隆及其特征[D];汕頭大學;2002年

3 張高華;獐茅離子轉運蛋白基因AlNHX1與AlHAK1的克隆與表達研究[D];大連理工大學;2008年

4 王學仁;擔子菌毛頭鬼傘的TMV抗性蛋白y3基因的分離、鑒定和表達[D];西北大學;2010年

5 呂鴻雁;枯草芽孢桿菌中甲硫氨酸氨基肽酶基因的克隆與功能研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2002年

6 蘇偉;水稻程序性細胞死亡相關基因的克隆和功能分析[D];復旦大學;2006年

7 溫建國;灰飛虱免疫相關基因及微管蛋白基因的克隆和分子鑒定[D];復旦大學;2004年

8 李梅章;人類新基因的分離和鑒定研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2000年

9 生書晶;何首烏芪合酶基因（FmSTS）的克隆、鑒定及轉化擬南芥研究[D];華南理工大學;2010年

10 陳文;人成骨蛋白-1成熟肽基因的克隆和序列分析、5’端修飾及其在大腸桿菌中的表達[D];第四軍醫(yī)大學;1997年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳峰;擬南芥SDL基因的分離與功能互補驗證[D];湖南農業(yè)大學;2010年

2 陳曉兵;白芥CBL基因克隆及其在干旱脅迫下的表達分析[D];鄭州大學;2015年

3 姜文靜;剛地弓形蟲RH株ROP10基因真核表達載體的構建及其免疫原性分析[D];河北醫(yī)科大學;2015年

4 郭前進;紅鰭東方渶SREBP基因的克隆及表達研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2015年

5 李四游;赤霉素對蓮株型影響及其相關基因克隆與時空表達分析[D];華中農業(yè)大學;2015年

6 史永磊;南極微生物SOD基因克隆與表達及發(fā)酵優(yōu)化的研究[D];哈爾濱工業(yè)大學;2015年

7 朱久;白氏文昌魚Amphip38基因克隆及免疫功能的分析[D];南京師范大學;2015年

8 齊愛民;不倒翁蟲CYP4基因克隆及在黃渤海不同PAHs污染海域的響應表達[D];大連海洋大學;2015年

9 李鳳;桑樹中三個氧化酶相關基因的克隆、序列分析及表達[D];江蘇科技大學;2015年

10 丁咚;柔嫩艾美耳球蟲河北株EtMIC-2基因真核表達載體的構建[D];河北科技師范學院;2015年

本文編號：642677