發(fā)布時(shí)間：2017-08-01 21:05

  本文關(guān)鍵詞：煙粉虱優(yōu)勢(shì)次生內(nèi)共生菌種類分析及對(duì)自身和優(yōu)勢(shì)寄生蜂的功能研究

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【摘要】：昆蟲內(nèi)共生菌可通過(guò)調(diào)控宿主的生殖或提高宿主的適合度等方式促進(jìn)其在宿主種群中的傳播。煙粉虱Bemisia tabaci體內(nèi)含有初生內(nèi)共生菌Candidatus Portiera aleyrodidarum和7屬/種次生內(nèi)共生菌,初生內(nèi)共生菌為宿主的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖提供必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而次生內(nèi)共生菌則可以增強(qiáng)宿主對(duì)環(huán)境條件的適應(yīng)性、提高對(duì)天敵的抵御力和增強(qiáng)宿主對(duì)殺蟲劑的敏感性等。本論文首先利用分子方法分析了煙粉虱MEAM1和MED隱種及其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂體內(nèi)內(nèi)共生菌的種類和分布情況,以獲得的特異性的煙粉虱MEAM1和MED隱種及其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂Rickettsia和Hamiltonella菌的基因序列構(gòu)建貝葉斯(BI)系統(tǒng)發(fā)育樹(shù);其次,通過(guò)兩種抗生素(利福平和四環(huán)素)處理,明確抗生素飼喂后對(duì)煙粉虱MED隱種生活史的影響;同時(shí)評(píng)估了攜帶不同次生內(nèi)共生菌處理對(duì)海氏槳角蚜小蜂Eretmocerus hayati生活史的影響。本研究的主要結(jié)果如下:(1)煙粉虱及其優(yōu)勢(shì)寄生蜂體內(nèi)內(nèi)共生菌的種類和豐度存在差異。煙粉虱MEAM1和MED兩個(gè)隱種攜帶內(nèi)共生菌的豐度要大于其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂,其中,兩個(gè)隱種均攜帶Portiera、Hamiltonella和Rickettsia菌;三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂中麗蚜小蜂內(nèi)共生菌的豐度較高,其攜帶有Rickettsia、Hamiltonella和Wolbachia菌,另外兩種寄生蜂則只含有Rickettsia菌。煙粉虱及其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂體內(nèi)共有4種內(nèi)共生菌,隸屬于變形菌門(Proteobacteria),α-變形細(xì)菌綱(α Proteobacteria)和γ-變形細(xì)菌綱(γ Proteobacteria)。以27個(gè)已經(jīng)報(bào)道的Rickettsia屬的同源基因序列作為參考序列,構(gòu)建Rickettsia菌的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)可知,煙粉虱MEAM1和MED隱種及其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂的Rickettsia菌均聚為一支,具有較近的親緣關(guān)系,并且均屬于Rickettsia bellii group,這表明Rickettsia菌在煙粉虱-寄生蜂間可能存在水平傳播。而Hamiltonella菌的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)也表現(xiàn)出相似的結(jié)果。(2)煙粉虱MED隱種取食利福平和四環(huán)素后,對(duì)其適合度有負(fù)面影響。取食相同濃度的兩種抗生素后,煙粉虱的產(chǎn)卵量、后代性比、孵化量和羽化量均顯著降低,而對(duì)于孵化率和羽化率而言,取食三種濃度的利福平后煙粉虱的孵化率和羽化率均顯著降低,取食四環(huán)素后孵化率結(jié)果類似。然而,不同濃度間,取食兩種抗生素后煙粉虱的后代性比、孵化量和羽化量間無(wú)顯著性差異,但相比空白對(duì)照,取食利福平和四環(huán)素后煙粉虱的壽命、產(chǎn)卵量和孵化率存在差異。相比之下,利福平對(duì)煙粉虱的生活史產(chǎn)生了更為顯著的影響,這可能與其對(duì)內(nèi)共生菌的去除效率高有關(guān)。(3)攜帶不同次生內(nèi)共生菌的煙粉虱改變了海氏槳角蚜小蜂的生活史。首先,攜帶不同次生內(nèi)共生菌處理的海氏槳角蚜小蜂雌雄蜂若蟲期、蛹期和成蟲前期的發(fā)育時(shí)間存在顯著性差異。其中,不帶RH菌處理若蟲期的發(fā)育時(shí)間最長(zhǎng),帶RH菌居中,只帶H菌處理最短;而蛹期和成蟲前期則表現(xiàn)出相似的結(jié)果,即不帶RH處理發(fā)育時(shí)間最長(zhǎng),帶RH和只帶H菌處理次之,且后兩者無(wú)顯著性差異;各個(gè)齡期雄峰的發(fā)育時(shí)間也呈現(xiàn)類似的結(jié)果。其次,對(duì)于取食量、寄生量和總致死量而言,不帶RH菌處理的均最高;而雌蜂壽命則是不帶RH菌和攜帶H菌處理高于攜帶RH菌處理;再次,羽化率卻表現(xiàn)出攜帶RH菌和H處理高于不帶RH菌處理。而三個(gè)處理的羽化量和性比則無(wú)顯著性差異。此外,攜帶不同次生內(nèi)共生菌處理對(duì)海氏槳角蚜小蜂的每日效率有顯著影響�？傊�,攜帶不同次生內(nèi)共生菌處理的煙粉虱MED隱種顯著影響海氏槳角蚜小蜂的生活史,這表明次生內(nèi)共生菌可保護(hù)煙粉虱免受海氏槳角蚜小蜂的攻擊。
【關(guān)鍵詞】：煙粉虱 寄生蜂 內(nèi)共生菌 利福平 四環(huán)素
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S433;S476
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 第一章 文獻(xiàn)綜述11-23
• 1. 昆蟲內(nèi)共生菌研究進(jìn)展11-14
• 1.1 昆蟲內(nèi)共生菌的種類11
• 1.2 昆蟲次生內(nèi)共生菌的功能11-14
• 1.2.1 共生菌引起的寄主防御效應(yīng)11-12
• 1.2.2 共生菌介導(dǎo)的溫度耐受性12-13
• 1.2.3 共生菌介導(dǎo)的寄主植物的相互作用13-14
• 2. 煙粉虱內(nèi)共生菌研究進(jìn)展14-20
• 2.1 煙粉虱概況14-15
• 2.2 煙粉虱內(nèi)共生菌研究進(jìn)展15-20
• 2.2.1 煙粉虱內(nèi)共生菌種類15-16
• 2.2.2 煙粉虱內(nèi)共生菌的分布和傳播規(guī)律16-17
• 2.2.3 煙粉虱內(nèi)共生菌的寄主表型17-19
• 2.2.4 煙粉虱內(nèi)共生菌的消除19-20
• 3. 論文設(shè)計(jì)20-23
• 3.1 立題依據(jù)20-21
• 3.2 研究?jī)?nèi)容21
• 3.3 技術(shù)路線21-23
• 第二章 煙粉虱及其優(yōu)勢(shì)寄生蜂內(nèi)共生菌的種類、分布及系統(tǒng)發(fā)育分析23-35
• 1. 材料和方法23-28
• 1.1 供試?yán)ハx23-24
• 1.2 供試植物24
• 1.3 主要試劑和儀器24-25
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法25-28
• 1.4.1 煙粉虱及其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂DNA的提取25-26
• 1.4.2 細(xì)菌 16S rDNA全長(zhǎng)的PCR擴(kuò)增26
• 1.4.3 PCR產(chǎn)物的純化26-28
• 1.4.4 原位雜交的方法步驟28
• 2. 結(jié)果與分析28-32
• 2.1 煙粉虱MEAM1和MED及其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂內(nèi)共生菌的種類分析28-29
• 2.2 煙粉虱MEAM1和MED及其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂內(nèi)共生細(xì)菌 16S rRNA克隆序列的系統(tǒng)發(fā)育分析29
• 2.3 煙粉虱MEAM1和MED及其三種優(yōu)勢(shì)寄生蜂Rickettsia菌系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的構(gòu)建29-31
• 2.4 Rickettsia菌在煙粉虱體內(nèi)的分布31-32
• 3. 小結(jié)與討論32-35
• 第三章 兩種抗生素對(duì)煙粉虱MED隱種內(nèi)共生菌的消除和生活史的影響35-53
• 1. 材料和方法35-36
• 1.1 供試?yán)ハx36
• 1.2 供試植物36
• 1.3 主要試劑和儀器36
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法36
• 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析36
• 2. 結(jié)果與分析36-50
• 2.1 兩種抗生素的雙因素方差分析37-42
• 2.1.1 取食兩種抗生素后對(duì)煙粉虱MED隱種產(chǎn)卵量的影響37
• 2.1.2 取食兩種抗生素對(duì)煙粉虱MED隱種雌蟲壽命的影響37-38
• 2.1.3 取食兩種抗生素對(duì)煙粉虱MED隱種后代性比的影響38
• 2.1.4 取食兩種抗生素對(duì)煙粉虱MED隱種孵化量和羽化量的影響38-40
• 2.1.5 取食兩種抗生素對(duì)煙粉虱MED隱種孵化率和羽化率的影響40-42
• 2.2 取食利福平對(duì)煙粉虱MED隱種生活史的影響42-45
• 2.2.1 取食利福平對(duì)煙粉虱MED隱種雌蟲壽命的影響42
• 2.2.2 取食利福平對(duì)煙粉虱MED隱種產(chǎn)卵量的影響42-43
• 2.2.3 取食利福平對(duì)煙粉虱MED隱種后代性比的影響43
• 2.2.4 取食利福平對(duì)煙粉虱MED隱種羽化量、羽化率、孵化量和孵化率的影43-45
• 2.3 取食四環(huán)素對(duì)煙粉虱MED隱種生活史的影響45-49
• 2.3.1 取食四環(huán)素對(duì)煙粉虱MED隱種雌蟲壽命的影響45-46
• 2.3.2 取食四環(huán)素對(duì)煙粉虱MED隱種產(chǎn)卵量和后代性比的影響46-47
• 2.3.3 取食利福平對(duì)煙粉虱MED隱種羽化量、羽化率、孵化量和孵化率的影47-49
• 2.4 檢測(cè)煙粉色MED隱種取食兩種抗生素后次生內(nèi)共生菌的變化49-50
• 3. 小結(jié)與討論50-53
• 第四章 攜帶不同次生內(nèi)共生菌的煙粉虱MED隱種對(duì)優(yōu)勢(shì)寄生蜂Er. hayati生活史的影響53-61
• 1. 材料和方法53-54
• 1.1 供試?yán)ハx53
• 1.2 供試植物53
• 1.3 主要儀器53
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法53-54
• 1.4.1 煙粉虱處理53-54
• 1.4.2 寄生蜂成蟲期生活史參數(shù)的調(diào)查54
• 1.4.3 寄生蜂發(fā)育歷期（若蟲期、蛹和成蟲期）觀察54
• 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析54
• 2. 結(jié)果與分析54-59
• 2.1 不同次生內(nèi)共生菌對(duì)Er. hayati雌雄蜂若蟲期、蛹期和成蟲前期的影響55-57
• 2.2 不同次生內(nèi)共生菌對(duì)Er. hayati取食量、寄生量、總致死量等的影響57-59
• 2.3 不同次生內(nèi)共生菌對(duì)Er. hayati每日效率的影響59
• 3. 小結(jié)與討論59-61
• 第五章 結(jié)論與展望61-63
• 1. 結(jié)論61
• 2. 創(chuàng)新點(diǎn)61
• 3. 展望61-63
• 參考文獻(xiàn)63-73
• 致謝73-75
• 在讀期間發(fā)表文章75

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