三葉斑潛蠅Liriomyza trifolii,是一種多食性的世界性害蟲,危害多種蔬菜、花卉,造成產量和品質下降。氣味結合蛋白(odorant binding protein,OBP)是一類存在于昆蟲嗅覺感器淋巴液中的小分子酸性蛋白,特異性識別氣味分子,并將化學信號傳遞到受體,引發(fā)嗅覺反應。本研究通過對三葉斑潛蠅進行轉錄組測序,鑒定并克隆氣味結合蛋白基因,對其時空表達情況進行分析,進行原核表達及純化,研究其氣味結合特性及免疫定位情況,為三葉斑潛蠅氣味結合蛋白研究及其嗅覺機制提供理論依據(jù),為綠色防治三葉斑潛蠅提供新的思路和方法。通過對轉錄組測序結果進行篩選和驗證,最終得到9個三葉斑潛蠅氣味結合蛋白基因,命名為LtriOBP1-9,分為三個亞家族:7個Classic OBPs,1個Minus-C OBP和1個Dimer OBP,而9個三葉斑潛蠅OBPs的無根進化樹顯示其之間的同源性較低,但與美洲斑潛蠅的氣味結合蛋白具有非常高的同源性。采用qPCR技術,對其進行時空表達分析發(fā)現(xiàn):在不同發(fā)育階段,LtriOBP5在幼蟲期大量表達,LtriOBP4在蛹期大量表達,剩下的7個LtriOBPs均在成...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.1三葉斑潛蠅總RNAFig.2.1ThetotalRNAofLiriomyzatrifoliiM：分子量標準；1，2，3：RNAM：Maker；1，2，3：RNA

圖2.1三葉斑潛蠅總RNAFig.2.1ThetotalRNAofLiriomyzatrifoliiNAM：Maker；1，2，3：RNAOBPs基因克隆驗證結果由短片段拼接而成，可能存在偏差，為了確保得到性，保證后續(xù)實驗的可靠性，對轉錄組中的OBPs....

圖2.2三葉斑潛蠅OBPs基因PCR產物Fig.2.2ThePCRproductofOBPsgeneinLiriomyzatrifoliiM：分子量標準；1-9：LtriOBP1-9M：Maker；1-9：LtriOBP1-9

圖2.1三葉斑潛蠅總RNAFig.2.1ThetotalRNAofLiriomyzatrifoliiM：分子量標準；1，2，3：RNAM：Maker；1，2，3：RNA2.2.1.2三葉斑潛蠅OBPs基因克隆驗證結果轉錄組測得的序列是由短片段拼接而成，....

圖2.3三葉斑潛蠅LtriOBP1-9基因推導的氨基酸序列對比

圖2.3三葉斑潛蠅LtriOBP1-9基因推導的氨基酸序列對比Fig.2.3AlignmentofdeducedaminoacidsequenceofLtriOBP1-9genesinLiriomyzatrifolii2.2.3三葉斑潛蠅OBP....

圖2.5以MaximumLikelihood法構建的三葉斑潛蠅與黑腹果蠅、美洲斑潛蠅氣味結合蛋白的進化樹

14將三葉斑潛蠅LtriOBPs與黑腹果蠅、美洲斑潛蠅的OBPs進行系統(tǒng)發(fā)育分析，構建進化樹，結果如圖2.5所示，三葉斑潛蠅LtriOBPs與黑腹果蠅、美洲斑潛蠅的OBPs聚成多個小支，LtriOBP1與LsatPBP4，LtriOBP2與LsatPBP4，Ltri....

本文編號：3969917