轉(zhuǎn)基因作物對非靶標(biāo)生物的影響是轉(zhuǎn)基因作物環(huán)境安全性評價的重要內(nèi)容。龜紋瓢蟲是棉田的優(yōu)勢捕食性天敵,不僅捕食棉田中多種害蟲,還取食棉花花粉,是評價轉(zhuǎn)基因棉花環(huán)境安全的重要指示性非靶標(biāo)昆蟲。本研究運用高通量測序技術(shù),系統(tǒng)研究了Bt蛋白對龜紋瓢蟲解毒、消化基因的表達(dá)量和對共生微生物組成和結(jié)構(gòu)的影響。本研究旨在明確Bt蛋白對龜紋瓢蟲的安全性,為我國轉(zhuǎn)基因生物安全評價和安全管理提供技術(shù)支撐和依據(jù)。本研究獲得以下主要研究結(jié)果。1、選擇未取食蚜蟲的龜紋瓢蟲初孵幼蟲,分別用含有500μg/ml Cry1Ac、Cry2Ab、Cry1Ac+Cry2Ab蛋白的2mol/L蔗糖水處理1齡期龜紋瓢蟲48h,以蔗糖水處理為對照,利用高通量測序技術(shù)檢測龜紋瓢蟲體內(nèi)解毒和消化相關(guān)基因的表達(dá)量變化。結(jié)果表明,高濃度Bt蛋白對龜紋瓢蟲1齡幼蟲體內(nèi)解毒基因CarE、P450、GST、CCE和消化基因APN、CP、TPs的表達(dá)量沒有顯著影響。2、選擇未取食蚜蟲的龜紋瓢蟲初孵幼蟲,分別用含有500μg/ml Cry1Ac、Cry2Ab、Cry1Ac+Cry2Ab蛋白的2mol/L蔗糖水處理1齡期龜紋瓢蟲48h,以蔗糖水處理為對...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 轉(zhuǎn)基因作物的由來和發(fā)展現(xiàn)狀
    1.2 轉(zhuǎn)基因棉對非靶標(biāo)害蟲的影響
    1.3 轉(zhuǎn)基因棉對經(jīng)濟昆蟲的影響
    1.4 轉(zhuǎn)基因棉對寄生性昆蟲的影響
    1.5 轉(zhuǎn)基因棉對捕食性天敵昆蟲的影響
    1.6 研究目的、意義及內(nèi)容
第二章 Bt蛋白對龜紋瓢體內(nèi)解毒、代謝相關(guān)基因的影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試?yán)ハx
        2.1.2 供試化合物
        2.1.3 取樣
        2.1.4 龜紋瓢蟲RNA的提取
        2.1.5 TotalRNA樣品檢測及文庫構(gòu)建
        2.1.6 解毒、消化相關(guān)基因的表達(dá)量的檢測
        2.1.7 數(shù)據(jù)處理及分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 測序數(shù)據(jù)結(jié)果分析
        2.2.3 基因差異分析
    2.3 討論
第三章 Bt蛋白對龜紋瓢蟲共生微生物多樣性的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試?yán)ハx
        3.1.2 供試化合物和配制
        3.1.3 取樣
        3.1.4 DNA的提取和送樣樣本的篩選
        3.1.5 數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
        3.2.2 龜紋瓢蟲共生菌的組成和結(jié)構(gòu)
        3.2.3 龜紋瓢蟲幼蟲體內(nèi)共生菌群落組成和結(jié)構(gòu)的比較
    3.3 討論
第四章 Cry2Ab蛋白濃度對龜紋瓢蟲幼蟲體內(nèi)共生菌種群的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試?yán)ハx
        4.1.2 供試化合物
        4.1.3 取樣
        4.1.4 DNA的提取和送樣樣本的篩選
        4.1.5 蟲重和單對產(chǎn)卵量的測定
        4.1.6 檢測和測序方法
        4.1.7 數(shù)據(jù)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 龜紋瓢蟲生命表參數(shù)分析
        4.2.2 測序統(tǒng)計分析
        4.2.3 Cry2Ab蛋白不同濃度作用下龜紋瓢蟲體內(nèi)微生物的結(jié)構(gòu)和多樣性
        4.2.4 Cry2Ab蛋白不同濃度作用下龜紋瓢蟲體內(nèi)共生菌的組成多樣性的比較
    4.3 討論
第五章 Cry2Ab蛋白作用時間對龜紋瓢蟲幼蟲共生菌的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試?yán)ハx
        5.1.2 供試化合物
        5.1.3 取樣
        5.1.4 蟲體蛋白檢測及飼料中Cry2Ab蛋白穩(wěn)定性檢測
        5.1.5 DNA的提取和送樣樣本的篩選
        5.1.6 數(shù)據(jù)分析
    5.2 結(jié)果分析
        5.2.1 飼料中及龜紋瓢蟲體內(nèi)Cry2Ab蛋白的含量
        5.2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析及不同處理組共生菌的組成和結(jié)構(gòu)
        5.2.3 龜紋瓢蟲體內(nèi)共生菌的組成多樣性的比較
    5.3 討論
第六章 全文結(jié)論
    6.1 總結(jié)
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 展望
參考文獻
致謝
作者簡歷



本文編號：3925100