轉(zhuǎn)基因作物對(duì)非靶標(biāo)生物的影響是轉(zhuǎn)基因作物環(huán)境安全性評(píng)價(jià)的重要內(nèi)容。龜紋瓢蟲(chóng)是棉田的優(yōu)勢(shì)捕食性天敵,不僅捕食棉田中多種害蟲(chóng),還取食棉花花粉,是評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因棉花環(huán)境安全的重要指示性非靶標(biāo)昆蟲(chóng)。本研究運(yùn)用高通量測(cè)序技術(shù),系統(tǒng)研究了Bt蛋白對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)解毒、消化基因的表達(dá)量和對(duì)共生微生物組成和結(jié)構(gòu)的影響。本研究旨在明確Bt蛋白對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)的安全性,為我國(guó)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)和安全管理提供技術(shù)支撐和依據(jù)。本研究獲得以下主要研究結(jié)果。1、選擇未取食蚜蟲(chóng)的龜紋瓢蟲(chóng)初孵幼蟲(chóng),分別用含有500μg/ml Cry1Ac、Cry2Ab、Cry1Ac+Cry2Ab蛋白的2mol/L蔗糖水處理1齡期龜紋瓢蟲(chóng)48h,以蔗糖水處理為對(duì)照,利用高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)龜紋瓢蟲(chóng)體內(nèi)解毒和消化相關(guān)基因的表達(dá)量變化。結(jié)果表明,高濃度Bt蛋白對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)1齡幼蟲(chóng)體內(nèi)解毒基因CarE、P450、GST、CCE和消化基因APN、CP、TPs的表達(dá)量沒(méi)有顯著影響。2、選擇未取食蚜蟲(chóng)的龜紋瓢蟲(chóng)初孵幼蟲(chóng),分別用含有500μg/ml Cry1Ac、Cry2Ab、Cry1Ac+Cry2Ab蛋白的2mol/L蔗糖水處理1齡期龜紋瓢蟲(chóng)48h,以蔗糖水處理為對(duì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 轉(zhuǎn)基因作物的由來(lái)和發(fā)展現(xiàn)狀
    1.2 轉(zhuǎn)基因棉對(duì)非靶標(biāo)害蟲(chóng)的影響
    1.3 轉(zhuǎn)基因棉對(duì)經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng)的影響
    1.4 轉(zhuǎn)基因棉對(duì)寄生性昆蟲(chóng)的影響
    1.5 轉(zhuǎn)基因棉對(duì)捕食性天敵昆蟲(chóng)的影響
    1.6 研究目的、意義及內(nèi)容
第二章 Bt蛋白對(duì)龜紋瓢體內(nèi)解毒、代謝相關(guān)基因的影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試?yán)ハx(chóng)
        2.1.2 供試化合物
        2.1.3 取樣
        2.1.4 龜紋瓢蟲(chóng)RNA的提取
        2.1.5 TotalRNA樣品檢測(cè)及文庫(kù)構(gòu)建
        2.1.6 解毒、消化相關(guān)基因的表達(dá)量的檢測(cè)
        2.1.7 數(shù)據(jù)處理及分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 測(cè)序數(shù)據(jù)結(jié)果分析
        2.2.3 基因差異分析
    2.3 討論
第三章 Bt蛋白對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)共生微生物多樣性的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試?yán)ハx(chóng)
        3.1.2 供試化合物和配制
        3.1.3 取樣
        3.1.4 DNA的提取和送樣樣本的篩選
        3.1.5 數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        3.2.2 龜紋瓢蟲(chóng)共生菌的組成和結(jié)構(gòu)
        3.2.3 龜紋瓢蟲(chóng)幼蟲(chóng)體內(nèi)共生菌群落組成和結(jié)構(gòu)的比較
    3.3 討論
第四章 Cry2Ab蛋白濃度對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)幼蟲(chóng)體內(nèi)共生菌種群的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試?yán)ハx(chóng)
        4.1.2 供試化合物
        4.1.3 取樣
        4.1.4 DNA的提取和送樣樣本的篩選
        4.1.5 蟲(chóng)重和單對(duì)產(chǎn)卵量的測(cè)定
        4.1.6 檢測(cè)和測(cè)序方法
        4.1.7 數(shù)據(jù)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 龜紋瓢蟲(chóng)生命表參數(shù)分析
        4.2.2 測(cè)序統(tǒng)計(jì)分析
        4.2.3 Cry2Ab蛋白不同濃度作用下龜紋瓢蟲(chóng)體內(nèi)微生物的結(jié)構(gòu)和多樣性
        4.2.4 Cry2Ab蛋白不同濃度作用下龜紋瓢蟲(chóng)體內(nèi)共生菌的組成多樣性的比較
    4.3 討論
第五章 Cry2Ab蛋白作用時(shí)間對(duì)龜紋瓢蟲(chóng)幼蟲(chóng)共生菌的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試?yán)ハx(chóng)
        5.1.2 供試化合物
        5.1.3 取樣
        5.1.4 蟲(chóng)體蛋白檢測(cè)及飼料中Cry2Ab蛋白穩(wěn)定性檢測(cè)
        5.1.5 DNA的提取和送樣樣本的篩選
        5.1.6 數(shù)據(jù)分析
    5.2 結(jié)果分析
        5.2.1 飼料中及龜紋瓢蟲(chóng)體內(nèi)Cry2Ab蛋白的含量
        5.2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析及不同處理組共生菌的組成和結(jié)構(gòu)
        5.2.3 龜紋瓢蟲(chóng)體內(nèi)共生菌的組成多樣性的比較
    5.3 討論
第六章 全文結(jié)論
    6.1 總結(jié)
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3925100