銅綠假單胞菌GF31及其胞外粗酶液對高效氯氰菊酯的降解研究
發(fā)布時間:2024-02-28 06:01
高效氯氰菊酯是一種人工合成的廣譜擬除蟲菊酯類殺蟲劑,由于其對害蟲具有強烈的神經(jīng)毒性,在世界范圍內(nèi)被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)與家庭內(nèi)等處的害蟲防治,長期使用造成的殘留破壞生態(tài)環(huán)境,也危害人類的健康。利用微生物降解或礦化是一種安全有效的環(huán)境修復(fù)手段。 本文首先根據(jù)降解體系特性,建立了乙腈-無機鹽-水雙水相萃取高效氯氰菊酯及其降解產(chǎn)物3-苯氧基苯甲醛和3-苯氧基苯甲酸的方法,平均回收率在94.8%-98.3%之間,變異系數(shù)在2.1~3.2之間。與文獻報道方法相比,該方法較為簡單,能夠精確定量測定水樣中高效氯氰菊酯、3-苯氧基苯甲酸和3-苯氧基苯甲醛和殘留。 研究實驗室分離保藏的一株銅綠假單胞菌GF31的菌體降解特性,發(fā)現(xiàn)它不能以高效氯氰菊酯為唯一碳氮源生長;認為在無外加營養(yǎng)條件下具有降解效果是因為細胞釋放胞外酶而發(fā)生的降解作用。發(fā)現(xiàn)此降解酶的生成不需要誘導(dǎo),是組成酶。產(chǎn)酶條件初步優(yōu)化,但是沒有找出影響顯著的因素。 研究外加營養(yǎng)源對銅綠假單胞菌GF31降解高效氯氰菊酯的影響,可知向無機鹽培養(yǎng)基中添加不同種類的碳氮源與不同C/N的營養(yǎng)源時,均對高效氯氰菊酯的降解率造成影響。當添加甘露醇和硫酸銨C/N為3:...
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號說明
第一章 緒論
1.1 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的特性與危害
1.2 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥檢測前處理技術(shù)
1.2.1 萃取技術(shù)
1.2.2 凈化技術(shù)
1.2.3 萃取、凈化一體化技術(shù)
1.3 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥降解菌的分離與鑒定
1.4 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥降解酶的研究
1.6 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥降解機理與代謝產(chǎn)物的研究
1.7 外加營養(yǎng)源對微生物降解擬除蟲菊酯影響的研究
1.8 本課題研究內(nèi)容及研究意義
第二章 樣品的制備及其分析
2.1 實驗材料及設(shè)備
2.1.1 實驗使用的試劑及試劑配制
2.1.2 實驗設(shè)備
2.2 實驗方法
2.2.1 有機溶劑萃取高效氯氰菊酯
2.2.2 乙腈-氯化鈉-水雙水相萃取高效氯氰菊酯
2.2.3 萃取回收率的測定
2.3 實驗結(jié)果與討論
2.3.1 有機溶劑萃取高效氯氰菊酯
2.3.2 乙腈-氯化鈉-水雙水相萃取高效氯氰菊酯
2.3.3 回收率的測定
2.4 本章小結(jié)
第三章 銅綠假單胞菌GF31的降解特性、產(chǎn)物及產(chǎn)酶條件優(yōu)化
3.1 實驗材料及設(shè)備
3.1.1 實驗使用的試劑及試劑配制
3.1.2 實驗設(shè)備
3.2 實驗方法
3.2.1 菌體來源
3.2.2 菌體培養(yǎng)與粗酶液制備
3.2.3 高效氯氰菊酯降解實驗
3.2.4 菌體、胞外粗酶液與細胞破碎液對高效氯氰菊酯的降解
3.2.5 GF31對高效氯氰菊酯的降解產(chǎn)物情況
3.2.6 胞外粗酶液對高效氯氰菊酯的降解產(chǎn)物情況
3.2.7 細菌對3-pbh的轉(zhuǎn)化作用
3.2.8 產(chǎn)酶條件的優(yōu)化
3.2.9 分析方法
3.3 實驗結(jié)果與討論
3.3.1 銅綠假單胞菌GF31對高效氯氰菊酯的降解
3.3.2 降解區(qū)域的定位
3.3.3 GF31對高效氯氰菊酯的降解產(chǎn)物情況
3.3.5 胞外粗酶液對高效氯氰菊酯的降解產(chǎn)物情況
3.3.6 細菌對降解產(chǎn)物3-pbh的轉(zhuǎn)化
3.3.7 GF31產(chǎn)高效氯氰菊酯降解酶條件優(yōu)化
3.4 本章小結(jié)
第四章 外加營養(yǎng)源對銅綠假單胞菌GF31降解高效氯氰菊酯的影響
4.1 實驗材料與設(shè)備
4.1.1 實驗試劑及試劑配制
4.1.2 實驗設(shè)備
4.1.3 菌體的培養(yǎng)與粗酶液制備
4.2 實驗方法
4.2.1 高效氯氰菊酯降解實驗
4.2.2 分析方法
4.3 實驗結(jié)果與討論
4.3.1 不同種類的碳源對GF31降解的影響
4.3.2 不同種類的氮源對GF31降解的影響
4.3.3 不同種類的碳氮源對GF31降解的影響
4.3.4 碳氮比(C/N)對GF31降解的影響
4.3.5 外加C/N比為3:1的甘露醇和硫酸銨對GF31降解與產(chǎn)胞外酶的影響
4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻
附錄
1. 高效氯氰菊酯標準曲線
2. 3-苯氧基苯甲酸標準曲線
3. 3-苯氧基苯甲醛標準曲線
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
本文編號:3913576
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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摘要
ABSTRACT
符號說明
第一章 緒論
1.1 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的特性與危害
1.2 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥檢測前處理技術(shù)
1.2.1 萃取技術(shù)
1.2.2 凈化技術(shù)
1.2.3 萃取、凈化一體化技術(shù)
1.3 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥降解菌的分離與鑒定
1.4 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥降解酶的研究
1.6 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥降解機理與代謝產(chǎn)物的研究
1.7 外加營養(yǎng)源對微生物降解擬除蟲菊酯影響的研究
1.8 本課題研究內(nèi)容及研究意義
第二章 樣品的制備及其分析
2.1 實驗材料及設(shè)備
2.1.1 實驗使用的試劑及試劑配制
2.1.2 實驗設(shè)備
2.2 實驗方法
2.2.1 有機溶劑萃取高效氯氰菊酯
2.2.2 乙腈-氯化鈉-水雙水相萃取高效氯氰菊酯
2.2.3 萃取回收率的測定
2.3 實驗結(jié)果與討論
2.3.1 有機溶劑萃取高效氯氰菊酯
2.3.2 乙腈-氯化鈉-水雙水相萃取高效氯氰菊酯
2.3.3 回收率的測定
2.4 本章小結(jié)
第三章 銅綠假單胞菌GF31的降解特性、產(chǎn)物及產(chǎn)酶條件優(yōu)化
3.1 實驗材料及設(shè)備
3.1.1 實驗使用的試劑及試劑配制
3.1.2 實驗設(shè)備
3.2 實驗方法
3.2.1 菌體來源
3.2.2 菌體培養(yǎng)與粗酶液制備
3.2.3 高效氯氰菊酯降解實驗
3.2.4 菌體、胞外粗酶液與細胞破碎液對高效氯氰菊酯的降解
3.2.5 GF31對高效氯氰菊酯的降解產(chǎn)物情況
3.2.6 胞外粗酶液對高效氯氰菊酯的降解產(chǎn)物情況
3.2.7 細菌對3-pbh的轉(zhuǎn)化作用
3.2.8 產(chǎn)酶條件的優(yōu)化
3.2.9 分析方法
3.3 實驗結(jié)果與討論
3.3.1 銅綠假單胞菌GF31對高效氯氰菊酯的降解
3.3.2 降解區(qū)域的定位
3.3.3 GF31對高效氯氰菊酯的降解產(chǎn)物情況
3.3.5 胞外粗酶液對高效氯氰菊酯的降解產(chǎn)物情況
3.3.6 細菌對降解產(chǎn)物3-pbh的轉(zhuǎn)化
3.3.7 GF31產(chǎn)高效氯氰菊酯降解酶條件優(yōu)化
3.4 本章小結(jié)
第四章 外加營養(yǎng)源對銅綠假單胞菌GF31降解高效氯氰菊酯的影響
4.1 實驗材料與設(shè)備
4.1.1 實驗試劑及試劑配制
4.1.2 實驗設(shè)備
4.1.3 菌體的培養(yǎng)與粗酶液制備
4.2 實驗方法
4.2.1 高效氯氰菊酯降解實驗
4.2.2 分析方法
4.3 實驗結(jié)果與討論
4.3.1 不同種類的碳源對GF31降解的影響
4.3.2 不同種類的氮源對GF31降解的影響
4.3.3 不同種類的碳氮源對GF31降解的影響
4.3.4 碳氮比(C/N)對GF31降解的影響
4.3.5 外加C/N比為3:1的甘露醇和硫酸銨對GF31降解與產(chǎn)胞外酶的影響
4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻
附錄
1. 高效氯氰菊酯標準曲線
2. 3-苯氧基苯甲酸標準曲線
3. 3-苯氧基苯甲醛標準曲線
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
本文編號:3913576
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