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基于形態(tài)與分子技術(shù)相結(jié)合的葉螨鑒定法研究

發(fā)布時間:2024-02-24 10:40
  葉螨屬于節(jié)肢動物門(Arthropoda)、蛛形綱(Arachinida)、蜱螨亞綱(Acari)、真螨總目(Acariformes)、絨螨目(Trombidiformes)、前氣門亞目(Prostigmata)、異氣門總股(Eleutherengonides)、葉螨科(Tetranychidae),是一種危害蔬菜、果樹、豆科植物和觀賞性植物的重要農(nóng)業(yè)害蟲。在實行植物檢疫過程中,由于不同種類葉螨的形態(tài)特征相似度高,因而往往找不到好的鑒別特征。一般來說,葉螨屬的葉螨主要是通過雄蟲外生殖器陽具端錘的性狀來進(jìn)行鑒定,但是形態(tài)學(xué)鑒定局限于特定的發(fā)育階段,且對于親緣關(guān)系較近的物種或隱存種區(qū)分困難。例如二斑葉螨(Tetranychus urticae Koch)和朱砂葉螨(Tetranychus cinnabarinus Boisduval)具有非常相似的形態(tài)特征,在傳統(tǒng)葉螨分類研究中常引起分類學(xué)家的意見分歧。為了解決形態(tài)學(xué)鑒定問題,越來越多的分子標(biāo)記技術(shù)被應(yīng)用于蜱螨鑒定。其中限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PCR-RFLP)被認(rèn)為是有效區(qū)分葉螨屬種類的鑒定手段;贒NA序列差異的葉螨鑒...

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 葉螨的經(jīng)濟(jì)意義與為害情況
        1.1 葉螨的分類地位
        1.2 葉螨的生物學(xué)特性
            1.2.1 繁殖方式
            1.2.2 個體發(fā)育和變態(tài)
            1.2.3 食性
            1.2.4 滯育
        1.3 農(nóng)業(yè)螨類對作物的危害
            1.3.1 農(nóng)業(yè)螨類危害對植物生理的影響
            1.3.2 危害禾谷類糧食作物
            1.3.3 危害經(jīng)濟(jì)作物
            1.3.4 危害果樹和蔬菜
        1.4 葉螨的分布
    2 形態(tài)學(xué)技術(shù)在蜱螨鑒定中的應(yīng)用
        2.1 葉螨形態(tài)特征
        2.2 朱砂葉螨與二斑葉螨分類地位研究
        2.3 形態(tài)學(xué)在蜱螨鑒定中的作用
            2.3.1 形態(tài)學(xué)在蜱螨鑒定中的優(yōu)點
            2.3.2 形態(tài)學(xué)在蜱螨鑒定中的不足
    3 分子生物學(xué)技術(shù)在鑒定中的應(yīng)用
        3.1 蛋白質(zhì)標(biāo)記技術(shù)
        3.2 DNA分子標(biāo)記技術(shù)
            3.2.1 限制性片段長度多態(tài)性
            3.2.2 隨機(jī)擴(kuò)增DNA多態(tài)性
            3.2.3 擴(kuò)增片段長度多態(tài)性
            3.2.4 DNA序列分析
        3.3 基因組DNA多態(tài)性分析在蜱螨鑒定中的應(yīng)用
            3.3.1 線粒體DNA多態(tài)性在蜱螨鑒定研究中的應(yīng)用
            3.3.2 核糖體DNA多態(tài)性在蜱螨鑒定研究中的應(yīng)用
    4 DNA條形碼
        4.1 DNA條形碼的應(yīng)用
        4.2 DNA條形碼的優(yōu)點
        4.3 DNA條形碼的局限性
第二章 葉螨的形態(tài)學(xué)鑒定
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 標(biāo)本制作
        1.3 形態(tài)學(xué)鑒定方法
    2 結(jié)果
        2.1 形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        2.2 樣本所屬種類鑒定結(jié)果
    3 討論
第三章 基于ITS序列對葉螨的鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 葉螨的形態(tài)學(xué)鑒定
        1.3 葉螨DNA的提取
        1.4 ITS序列的擴(kuò)增和測定
        1.5 ITS序列比對及對應(yīng)物種核實
        1.6 系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系分析
    2 結(jié)果
        2.1 樣本種類的形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        2.2 基于ITS序列的堿基差異及替換飽和性分析
        2.3 葉螨種間遺傳距離分析
        2.4 ITS序列的分子系統(tǒng)學(xué)分析
    3 討論
        3.1 ITS和COI基因序列在葉螨物種鑒定中的廣泛適用性和局限
        3.2 二斑葉螨紅色型與綠色型分類地位的探討
第四章 葉螨的ITS-RFLP鑒定研究
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 葉螨DNA的提取
        1.3 ITS序列的擴(kuò)增和檢測
        1.4 RFLP鑒定方法
    2 結(jié)果
        2.1 RFLP技術(shù)鑒定結(jié)果
        2.2 樣本所屬種類鑒定結(jié)果
    3 討論
第五章 中國常見葉螨ITS-RFLP快速鑒定方法
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 葉螨的形態(tài)學(xué)鑒定
        1.3 葉螨DNA的提取
        1.4 ITS序列的擴(kuò)增和檢測
        1.5 PCR產(chǎn)物純化
        1.6 質(zhì)粒載體的連接和轉(zhuǎn)化反應(yīng)
            1.6.1 連接反應(yīng)
            1.6.2 轉(zhuǎn)化反應(yīng)
            1.6.3 細(xì)菌培養(yǎng)
        1.7 測序
        1.8 ITS序列分析
        1.9 限制性內(nèi)切酶的選取及PCR-RFLP檢測
    2 結(jié)果
        2.1 形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        2.2 基于ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹
        2.3 3 種限制性內(nèi)切酶的篩選和ITS-RFLP酶切圖譜的建立
    3 討論
參考文獻(xiàn)
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致謝



本文編號:3908870

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