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阿拉善地區(qū)粘細菌的分離鑒定及其抗致病疫霉活性的初步研究

發(fā)布時間:2023-07-26 18:34
  粘細菌(myxobacteria)是一類可滑行的革蘭氏陰性細菌,具有種類多樣的多細胞行為和復雜的形態(tài)發(fā)生。近年來,粘細菌作為可以產(chǎn)生多種次級代謝產(chǎn)物的藥源微生物而備受關(guān)注。本研究采集了38個來自阿拉善地區(qū)的土壤樣品,并對其理化指標進行了檢測。阿拉善地區(qū)土壤處于干旱狀態(tài),土壤pH值處于中性偏堿性的狀態(tài),有機質(zhì)、水解氮含量比較缺乏,有效磷、速效鉀含量較為豐富或適宜。采用濾紙片誘導法、大腸桿菌誘導法、兔糞誘導法,結(jié)合子實體直接挑取及抗生素純化法,誘導分離出118株菌株,純化出90株,分屬于6個屬,11個種,分別為:橙色粘球菌、黃色粘球菌、變綠粘球菌、葉柄粘球菌、大孢粘球菌、大孢珊瑚球菌、Pyxicoccus fallax、過渡原囊菌、紫色孢囊桿菌、小孢囊桿菌、囊球粘細菌,粘球菌屬為該地區(qū)的優(yōu)勢菌屬。該地區(qū)可培養(yǎng)粘細菌資源與土壤酸堿性呈現(xiàn)出顯著正相關(guān),草甸鹽土可培養(yǎng)粘細菌種屬最為豐富,包括Myxococcus、Cystobacter、Anqiococcus三個菌屬,流動荒漠風沙土及各類灰漠土可培養(yǎng)粘細菌菌株數(shù)較多;土壤的利用方式對粘細菌的分布有明顯影響,林地土壤可培養(yǎng)粘細菌菌株含量高,且種屬較...

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 粘細菌的發(fā)現(xiàn)與研究
    1.2 粘細菌的特征
        1.2.1 粘細菌的生長發(fā)育特征
        1.2.2 粘細菌的生長環(huán)境特征
    1.3 粘細菌的分離純化
    1.4 粘細菌的分類學研究
        1.4.1 形態(tài)學分類
        1.4.2 分子遺傳學分類
    1.5 粘細菌的生物活性物質(zhì)
    1.6 馬鈴薯晚疫病的概述
    1.7 阿拉善地區(qū)的概述
    1.8 本研究的內(nèi)容及目的
2 實驗材料
    2.1 土壤樣品的采集
    2.2 材料
        2.2.1 實驗菌株
        2.2.2 實驗植株
        2.2.3 實驗主要儀器設備
        2.2.4 主要試劑及配置方法
        2.2.5 實驗主要培養(yǎng)基
        2.2.6 實驗相關(guān)軟件
    2.3 實驗方法
        2.3.1 土樣的采集及處理
        2.3.2 土壤理化特性的測定
        2.3.3 粘細菌的分離純化
        2.3.4 粘細菌的分類鑒定
        2.3.5 拮抗致病疫霉粘細菌的篩選
        2.3.6 高抗菌株的生理生化特征檢測
        2.3.7 致病疫霉高抗性菌株的抗菌譜檢測
        2.3.8 致病疫霉高抗性菌株活性物質(zhì)發(fā)酵條件的優(yōu)化
        2.3.9 菌株AL-10、AL-24活性物質(zhì)穩(wěn)定性檢測
3 結(jié)果與分析
    3.1 土壤理化指標的檢測結(jié)果
    3.2 粘細菌的誘導、分離與純化
    3.3 粘細菌的種屬鑒定
        3.3.1 粘細菌的形態(tài)學鑒定
        3.3.2 粘細菌的分子鑒定
    3.4 致病疫霉拮抗菌株的篩選
    3.5 高抗菌株AL-24 和AL-10的生理生化特征檢測
    3.6 高抗菌株AL-24 和AL-10的發(fā)酵條件優(yōu)化
        3.6.1 菌株發(fā)酵液吸附樹脂的用量
        3.6.2 菌株AL-24、AL-10最佳發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選
        3.6.3 菌株AL-10最佳發(fā)酵條件單因素水平的選擇
        3.6.4 菌株AL-10發(fā)酵條件的正交優(yōu)化
        3.6.5 菌株AL-10、AL-24的復合發(fā)酵
    3.7 菌株AL-24和AL-10次級代謝產(chǎn)物對其他植物病原真菌的抗性
    3.8 菌株AL-24和AL-10抗致病疫霉活性物質(zhì)的穩(wěn)定性
        3.8.1 熱穩(wěn)定性測定
        3.8.2 酸堿穩(wěn)定性測定
        3.8.3 紫外線及自然光的穩(wěn)定性測定
        3.8.4 儲存穩(wěn)定性測定
    3.9 菌株AL-24和AL-10活性物質(zhì)對馬鈴薯離體葉片的防治作用
4 討論與結(jié)論
    4.1 討論
        4.1.1 粘細菌的誘導分離及純化
        4.1.2 粘細菌分布與環(huán)境的相關(guān)性
        4.1.3 粘細菌的抗致植物致病菌活性分析
        4.1.4 拮抗致病疫霉粘細菌發(fā)酵條件的優(yōu)化
        4.1.5 菌株AL-24和AL-10活性物質(zhì)的穩(wěn)定性
        4.1.6 馬鈴薯體葉片的防治試驗
    4.2 結(jié)論
致謝
參考文獻
作者簡介



本文編號:3837338

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