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微生物菌劑對豬糞好氧堆肥過程中重金屬鈍化、抗生素與抗性基因削減的影響研究

發(fā)布時間:2023-05-25 02:20
  近年來,為促進動物生長和降低疾病風險,銅(Cu)和鋅(Zn)等重金屬元素和各種抗生素被頻繁添加入畜禽養(yǎng)殖的動物飼料中。然而這些元素并不能被動物完全吸收,大部分隨糞便排出且仍具備高度的活性,使得豬糞中耐藥基因頻繁被檢測到,造成巨大的環(huán)境風險。目前對于畜禽糞便的最佳處置方式就是堆肥法。但是傳統(tǒng)的堆肥法不僅周期長,且氮流失嚴重,不僅產(chǎn)生惡臭,還削弱了堆肥產(chǎn)品的農(nóng)用價值;诖,本研究以豬糞為堆肥原料,采用接種以黃孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)(簡寫為p)、黑曲霉(Aspergillus Niger)(簡寫為a)和地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)(簡寫為b)為主的系列復合菌劑進行好氧堆肥,探究了添加不同配比菌劑對堆肥效果、重金屬鈍化、抗生素去除、耐藥基因削減以及堆肥過程中氮轉(zhuǎn)化的影響,并探討了其對畜禽糞便好氧堆肥過程中抗生素去除和耐藥基因削減的機理。本實驗首先通過高溫篩選法從新鮮豬糞中篩選出20株嗜熱菌,對其進行耐熱性檢驗后,進一步篩選出LB1、LB5、GS1、GS2、GS3、GS4、GS6等7株耐熱菌,并分別對其進行形態(tài)學觀...

【文章頁數(shù)】:99 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 畜禽糞便的污染現(xiàn)狀
        1.1.1 畜禽糞便的抗生素污染現(xiàn)狀
        1.1.2 畜禽糞便的重金屬污染現(xiàn)狀
        1.1.3 畜禽糞便的抗性基因污染現(xiàn)狀
    1.2 畜禽糞便的資源化利用現(xiàn)狀
    1.3 好氧堆肥的影響因素
        1.3.1 溫度
        1.3.2 含水率
        1.3.3 pH
        1.3.4 C/N
        1.3.5 通風供氧
        1.3.6 添加劑
    1.4 研究來源、研究背景與目的、研究內(nèi)容
        1.4.1 課題來源
        1.4.2 研究背景
        1.4.3 研究目的
        1.4.4 課題研究內(nèi)容
    1.5 創(chuàng)新之處與技術(shù)路線
        1.5.1 創(chuàng)新之處
        1.5.2 技術(shù)路線
第二章 嗜熱菌的篩選與鑒定
    2.1 嗜熱菌的分離和篩選
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗方法
    2.2 嗜熱菌的鑒定和保存
        2.2.1 儀器與設(shè)備
        2.2.2 試劑
        2.2.3 形態(tài)學鑒定方法
        2.2.4 菌株的保存方法
        2.2.5 分子生物學鑒定方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 嗜熱菌的分離和純化結(jié)果
        2.3.2 嗜熱菌的耐熱性實驗結(jié)果
        2.3.3 形態(tài)學鑒定
        2.3.4 分子生物學鑒定
第三章 接種不同菌劑對豬糞堆肥中理化性質(zhì)、氮轉(zhuǎn)化和重金屬鈍化的影響
    3.1 實驗材料與方法
        3.1.1 供試材料
        3.1.2 微生物及接種制劑
        3.1.3 實驗裝置及實驗設(shè)置
        3.1.4 樣品采集和理化性質(zhì)檢測
        3.1.5 重金屬及各種氮的形態(tài)檢測方法
        3.1.6 統(tǒng)計分析
    3.2 接種不同菌劑對豬糞堆肥中理化性質(zhì)的影響
        3.2.1 接種不同菌劑對豬糞堆肥堆體溫度變化的影響
        3.2.2 接種不同菌劑對豬糞堆肥堆體基質(zhì)pH的影響
        3.2.3 接種不同菌劑對豬糞堆肥堆體基質(zhì)中C/N的影響
        3.2.4 接種不同菌劑對豬糞堆肥堆體種子發(fā)芽指數(shù)的影響
        3.2.5 小結(jié)
    3.3 接種不同菌劑對豬糞堆肥中重金屬形態(tài)組分變化的影響
        3.3.1 接種不同菌劑對豬糞堆肥過程中重金屬Zn形態(tài)轉(zhuǎn)化的影響
        3.3.2 接種不同菌劑對豬糞堆肥過程中重金屬Cu形態(tài)轉(zhuǎn)化的影響
        3.3.3 小結(jié)
    3.4 接種不同菌劑對豬糞堆肥過程中氮轉(zhuǎn)化的影響
        3.4.1 接種不同菌劑對豬糞堆肥過程中總氮和有機氮的影響
        3.4.2 接種不同菌劑對豬糞堆肥過程中銨態(tài)氮和硝態(tài)氮的影響
        3.4.3 接種不同菌劑對豬糞堆肥過程中氮損失的影響
        3.4.4 小結(jié)
    3.5 本章小結(jié)
第四章 接種不同菌劑對豬糞堆肥過程中抗生素去除、抗性基因削減和微生物群落結(jié)構(gòu)的影響
    4.1 實驗材料與方法
        4.1.1 供試材料
        4.1.2 微生物及接種制劑
    4.2 實驗方法
        4.2.1 實驗設(shè)置
        4.2.2 樣品采集和預處理
        4.2.3 抗生素的檢測方法
        4.2.4 DNA提取和抗性基因qPCR檢測方法
        4.2.5 16SrRNA測序
        4.2.6 統(tǒng)計分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 接種不同菌劑對豬糞好氧堆肥過程中抗生素去除的影響
        4.3.2 接種不同菌劑對豬糞好氧堆肥過程中抗性基因削減的影響
        4.3.3 接種不同菌劑對豬糞好氧堆肥過程中微生物群落結(jié)構(gòu)演變的影響
        4.3.4 細菌屬、抗生素抗性基因、移動遺傳因子、理化特性及抗生素殘留的皮爾遜相關(guān)性分析和典型相關(guān)分析
        4.3.5 好氧堆肥接種機理研究
    4.4 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文與研究成果
致謝



本文編號:3822745

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