大草蛉(Chrysopa Pallens)是蚜蟲(chóng)等多種農(nóng)林業(yè)害蟲(chóng)重要的捕食性天敵昆蟲(chóng)。其分布廣、食量大、繁殖能力強(qiáng),在控制害蟲(chóng)種群、減少農(nóng)作物損失方面發(fā)揮重要作用。大量擴(kuò)繁是天敵昆蟲(chóng)應(yīng)用的基礎(chǔ)與前提,而揭示天敵昆蟲(chóng)的生殖生理則有助于開(kāi)發(fā)調(diào)控天敵昆蟲(chóng)繁殖的技術(shù)與方法,促進(jìn)天敵昆蟲(chóng)規(guī)�；a(chǎn)。大草蛉雄蟲(chóng)非常罕見(jiàn)地含有昆蟲(chóng)雌性生殖蛋白Vg,本文克隆了大草蛉雄蟲(chóng)Vg基因部分m RNA序列,并借助RNAi、石蠟切片、透射電鏡與轉(zhuǎn)錄組測(cè)序等技術(shù)探討了雄蟲(chóng)Vg基因表達(dá)對(duì)雄蟲(chóng)生殖腺發(fā)育、雄蟲(chóng)轉(zhuǎn)錄組,及交配后對(duì)雌蟲(chóng)壽命、生殖腺發(fā)育、產(chǎn)卵期、產(chǎn)卵量等繁殖指標(biāo)的影響,明確了大草蛉雄蟲(chóng)Vg基因在雄蟲(chóng)與雌蟲(chóng)生殖中的功能,并從雄蟲(chóng)生殖效應(yīng)的角度出發(fā),揭示了Vg基因的作用機(jī)理。主要分為三個(gè)部分:1.大草蛉雄蟲(chóng)Vg部分序列的克隆及表達(dá)分析克隆了雄蟲(chóng)Vg基因部分mRNA序列,并在轉(zhuǎn)錄水平上檢測(cè)了時(shí)空表達(dá)規(guī)律,發(fā)現(xiàn)Vg基因在雄蟲(chóng)不同發(fā)育階段的表達(dá)不具有顯著性差異,其在腹部表達(dá)量最高,是胸部的2.64倍,頭部的3.51倍數(shù)。此外,在蛋白水平上,整蟲(chóng)和腹部的Vg均由165 kD的大亞基和46 kD的小亞基組成;而頭部和胸部的...

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 大草蛉概述及其研究現(xiàn)狀
        1.1.1 大草蛉的生物學(xué)特性
        1.1.2 大草蛉在生物防治中的應(yīng)用
        1.1.3 大草蛉的分子生物學(xué)研究現(xiàn)狀
    1.2 昆蟲(chóng)卵黃原蛋白的研究進(jìn)展
        1.2.1 昆蟲(chóng)卵黃原蛋白的分子結(jié)構(gòu)
        1.2.2 昆蟲(chóng)卵黃原蛋白的表達(dá)研究
        1.2.3 昆蟲(chóng)卵黃原蛋白的功能研究
        1.2.4 大草蛉卵黃原蛋白的研究進(jìn)展
    1.3 RNA干擾技術(shù)概述
        1.3.1 RNAi的發(fā)現(xiàn)
        1.3.2 RNAi的作用原理與特點(diǎn)
        1.3.3 RNAi在昆蟲(chóng)中的應(yīng)用
        1.3.4 昆蟲(chóng)RNAi的方法
    1.4 本研究的目的意義及技術(shù)路線
        1.4.1 研究的目的意義
        1.4.2 研究的技術(shù)路線
第二章 雄蟲(chóng)Vg部分序列的克隆及表達(dá)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試?yán)ハx(chóng)
        2.1.2 菌株和質(zhì)粒
        2.1.3 主要試劑和藥品
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
        2.1.5 主要溶液配制
        2.1.6 Vg部分序列的克隆
        2.1.7 Vg部分序列的表達(dá)分析
        2.1.8 卵黃原蛋白分離
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 Vg部分序列的克隆結(jié)果
        2.2.2 Vg部分序列的表達(dá)分析
    2.3 討論
第三章 大草蛉雄蟲(chóng)Vg基因的功能研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試?yán)ハx(chóng)
        3.1.2 菌株和質(zhì)粒
        3.1.3 主要試劑和藥品
        3.1.4 主要儀器設(shè)備
        3.1.5 主要溶液配制
        3.1.6 dsRNA的制備
        3.1.7 RNA干擾
        3.1.8 石蠟切片觀察
        3.1.9 透射電鏡觀察
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 dsRNA的合成
        3.2.2 RNAi結(jié)果分析
        3.2.3 石蠟切片觀察結(jié)果
        3.2.4 透射電鏡觀察結(jié)果
    3.3 討論
第四章 RNAi后轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)初步分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試?yán)ハx(chóng)
        4.1.2 菌株和質(zhì)粒
        4.1.3 主要試劑和藥品
        4.1.4 主要儀器設(shè)備
        4.1.5 主要溶液配制
        4.1.6 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序樣本的準(zhǔn)備
        4.1.7 Vg基因的序列的確定和分析
        4.1.8 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序相關(guān)基因表達(dá)量變化的q-PCR驗(yàn)證
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析概述
        4.2.2 雄蟲(chóng)Vg序列的分析
        4.2.3 RNAi前后差異表達(dá)基因
    4.3 討論
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3816423