隨著Cry1Ac和Cry2Ab轉(zhuǎn)雙價基因棉花在美國、澳大利亞、南非、墨西哥和菲律賓等國家的商業(yè)化種植,其生態(tài)安全性也成為人們關(guān)注的焦點,尤其是對棉田天敵和非靶標害蟲的生態(tài)安全性。準確及時的評價新型生物蛋白對非靶標昆蟲的影響,可為轉(zhuǎn)雙價抗蟲棉花的安全性評價奠定基礎(chǔ)。本文運用直接添加Bt蛋白到非靶標昆蟲人工飼料和利用三級營養(yǎng)關(guān)系的間接檢測兩種方法,從生物學(xué)、蛋白傳遞和酶活動力學(xué)指標,并結(jié)合田間非靶標昆蟲數(shù)量的調(diào)查數(shù)據(jù),研究CrylAc和Cry2Ab蛋白對大草蛉、七星瓢蟲和綠盲蝽的影響。主要實驗結(jié)果如下： 1.運用Bt蛋白與人工飼料混合的方法研究了CrylAc和Cry2Ab對大草蛉和綠盲蝽的直接生物學(xué)影響。大草蛉幼蟲取食含Bt蛋白飼料后發(fā)育時間、幼蟲體重、蛹重、成蟲體重、羽化率等生物學(xué)參數(shù)與對照相比均沒有顯著差異；取食含Bt蛋白的綠盲蝽發(fā)育時間顯著高于對照,綠盲蝽幼蟲取食含Cry2Ab、Cry1Ac+Cry2Ab飼料后,羽化率顯著低于對照,其他生物學(xué)參數(shù)間沒有顯著差異。結(jié)果表明Cry1Ac、Cry2Ab對大草蛉生長發(fā)育沒有直接影響,但Bt蛋白能減緩綠盲蝽幼蟲的發(fā)育,Cry2Ab對綠盲蝽的羽化...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
附表
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 轉(zhuǎn)基因作物全球種植概況
    1.2 抗性的產(chǎn)生和抗性治理
        1.2.1 Bt抗性的現(xiàn)狀
        1.2.2 抗性治理的措施
    1.3 轉(zhuǎn)基因抗蟲作物對非靶標生物風(fēng)險評價原理與程序
        1.3.1 評價原理
        1.3.2 評價程序
    1.4 Bt植物對非靶標生物的影響
        1.4.1 Bt植物對非靶標植食者的影響
        1.4.2 Bt植物對非靶標天敵的影響
    1.5 本文研究內(nèi)容、研究目的與意義
        1.5.1 研究內(nèi)容
        1.5.2 研究目的與意義
第二章 Cry1Ac和Cry2Ab對大草蛉和綠盲蝽的直接生物學(xué)影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試昆蟲
        2.1.2 供試蛋白
        2.1.3 供試飼料
        2.1.4 Cry1Ac和Cry2Ab蛋白對大草蛉的生物學(xué)影響
        2.1.5 Cry1Ac或Cry2Ab對綠盲蝽的生物測定
        2.1.6 Cry1Ac和Cry2Ab蛋白對綠盲蝽的生物學(xué)影響
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 Cry1Ac和Cry2Ab對大草蛉的生物學(xué)影響
        2.2.2 不同濃度梯度的Cry1Ac或Cry2Ab對綠盲蝽的影響
        2.2.3 Cry1Ac和Cry2Ab對綠盲蝽的生物學(xué)影響
    2.3 討論
第三章 Cry1Ac和Cry2Ab通過獵物-棉鈴蟲對大草蛉和七星瓢蟲的生物學(xué)影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試昆蟲
        3.1.2 供試蛋白
        3.1.3 大草蛉和七星瓢蟲的三級營養(yǎng)關(guān)系生物測定
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 Cry1Ac和Cry2Ab蛋白通過獵物-棉鈴蟲對大草蛉生物學(xué)影響
        3.2.2 Cry1Ac和Cry2Ab蛋白通過獵物-棉鈴蟲對七星瓢蟲生物學(xué)影響
    3.3 討論
第四章 檢測Cry1Ac和Cry2Ab蛋白在昆蟲體內(nèi)的含量
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試昆蟲
        4.1.2 供試試劑
        4.1.3 樣品處理
        4.1.4 Cry1Ac檢測步驟
        4.1.5 Cry2Ab檢測步驟
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 直接取食實驗中大草蛉幼蟲和成蟲體內(nèi)Cry1Ac和Cry2Ab蛋白的含量
        4.2.2 直接取食實驗中綠盲蝽成蟲體內(nèi)Cry1Ac和Cry2Ab蛋白的含量
        4.2.3 大草蛉三級營養(yǎng)實驗中Cry1Ac和Cry2Ab蛋白的表達情況
        4.2.4 七星瓢蟲三級營養(yǎng)實驗中Cry1Ac和Cry2Ab蛋白的表達情況
    4.3 討論
第五章 昆蟲接觸Cry1Ac和Cry2Ab后體內(nèi)主要酶活性變化
    5.1 材料和方法
        5.1.1 試驗材料
        5.1.2 相關(guān)試劑的配制
        5.1.3 酶提取液的制備
        5.1.4 類胰蛋白酶活性測定
        5.1.5 類胰凝乳蛋白酶活性測定
        5.1.6 氨肽酶活性測定
        5.1.7 谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性的測定
        5.1.8 提取液中總可溶性蛋白含量測定
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 直接取食實驗中大草蛉幼蟲和成蟲的酶活性變化
        5.2.2 直接取食實驗中綠盲蝽成蟲的酶活性變化
        5.2.3 三級營養(yǎng)實驗中大草蛉成蟲的酶活性變化
        5.2.4 三級營養(yǎng)實驗中七星瓢蟲成蟲的酶活性變化
    5.3 討論
第六章 田間調(diào)查轉(zhuǎn)基因棉田主要昆蟲的種群動態(tài)
    6.1 材料與方法
        6.1.1 供試棉花
        6.1.2 調(diào)查方法
        6.1.3 調(diào)查昆蟲種類
    6.2 結(jié)果與分析
        6.2.1 轉(zhuǎn)基因棉田中棉鈴蟲的種群動態(tài)變化
        6.2.2 轉(zhuǎn)基因棉田中棉蚜的種群動態(tài)變化
        6.2.3 轉(zhuǎn)基因棉田中棉盲蝽的種群動態(tài)變化
        6.2.4 轉(zhuǎn)基因棉田中草蛉的種群動態(tài)變化
        6.2.5 轉(zhuǎn)基因棉田中瓢蟲的種群動態(tài)變化
    6.3 討論
第七章 全文結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡歷



本文編號：3816118