隨著Cry1Ac和Cry2Ab轉(zhuǎn)雙價(jià)基因棉花在美國、澳大利亞、南非、墨西哥和菲律賓等國家的商業(yè)化種植,其生態(tài)安全性也成為人們關(guān)注的焦點(diǎn),尤其是對(duì)棉田天敵和非靶標(biāo)害蟲的生態(tài)安全性。準(zhǔn)確及時(shí)的評(píng)價(jià)新型生物蛋白對(duì)非靶標(biāo)昆蟲的影響,可為轉(zhuǎn)雙價(jià)抗蟲棉花的安全性評(píng)價(jià)奠定基礎(chǔ)。本文運(yùn)用直接添加Bt蛋白到非靶標(biāo)昆蟲人工飼料和利用三級(jí)營養(yǎng)關(guān)系的間接檢測(cè)兩種方法,從生物學(xué)、蛋白傳遞和酶活動(dòng)力學(xué)指標(biāo),并結(jié)合田間非靶標(biāo)昆蟲數(shù)量的調(diào)查數(shù)據(jù),研究CrylAc和Cry2Ab蛋白對(duì)大草蛉、七星瓢蟲和綠盲蝽的影響。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1.運(yùn)用Bt蛋白與人工飼料混合的方法研究了CrylAc和Cry2Ab對(duì)大草蛉和綠盲蝽的直接生物學(xué)影響。大草蛉幼蟲取食含Bt蛋白飼料后發(fā)育時(shí)間、幼蟲體重、蛹重、成蟲體重、羽化率等生物學(xué)參數(shù)與對(duì)照相比均沒有顯著差異；取食含Bt蛋白的綠盲蝽發(fā)育時(shí)間顯著高于對(duì)照,綠盲蝽幼蟲取食含Cry2Ab、Cry1Ac+Cry2Ab飼料后,羽化率顯著低于對(duì)照,其他生物學(xué)參數(shù)間沒有顯著差異。結(jié)果表明Cry1Ac、Cry2Ab對(duì)大草蛉生長發(fā)育沒有直接影響,但Bt蛋白能減緩綠盲蝽幼蟲的發(fā)育,Cry2Ab對(duì)綠盲蝽的羽化...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
附表
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 轉(zhuǎn)基因作物全球種植概況
    1.2 抗性的產(chǎn)生和抗性治理
        1.2.1 Bt抗性的現(xiàn)狀
        1.2.2 抗性治理的措施
    1.3 轉(zhuǎn)基因抗蟲作物對(duì)非靶標(biāo)生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)原理與程序
        1.3.1 評(píng)價(jià)原理
        1.3.2 評(píng)價(jià)程序
    1.4 Bt植物對(duì)非靶標(biāo)生物的影響
        1.4.1 Bt植物對(duì)非靶標(biāo)植食者的影響
        1.4.2 Bt植物對(duì)非靶標(biāo)天敵的影響
    1.5 本文研究內(nèi)容、研究目的與意義
        1.5.1 研究內(nèi)容
        1.5.2 研究目的與意義
第二章 Cry1Ac和Cry2Ab對(duì)大草蛉和綠盲蝽的直接生物學(xué)影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試?yán)ハx
        2.1.2 供試蛋白
        2.1.3 供試飼料
        2.1.4 Cry1Ac和Cry2Ab蛋白對(duì)大草蛉的生物學(xué)影響
        2.1.5 Cry1Ac或Cry2Ab對(duì)綠盲蝽的生物測(cè)定
        2.1.6 Cry1Ac和Cry2Ab蛋白對(duì)綠盲蝽的生物學(xué)影響
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 Cry1Ac和Cry2Ab對(duì)大草蛉的生物學(xué)影響
        2.2.2 不同濃度梯度的Cry1Ac或Cry2Ab對(duì)綠盲蝽的影響
        2.2.3 Cry1Ac和Cry2Ab對(duì)綠盲蝽的生物學(xué)影響
    2.3 討論
第三章 Cry1Ac和Cry2Ab通過獵物-棉鈴蟲對(duì)大草蛉和七星瓢蟲的生物學(xué)影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試?yán)ハx
        3.1.2 供試蛋白
        3.1.3 大草蛉和七星瓢蟲的三級(jí)營養(yǎng)關(guān)系生物測(cè)定
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 Cry1Ac和Cry2Ab蛋白通過獵物-棉鈴蟲對(duì)大草蛉生物學(xué)影響
        3.2.2 Cry1Ac和Cry2Ab蛋白通過獵物-棉鈴蟲對(duì)七星瓢蟲生物學(xué)影響
    3.3 討論
第四章 檢測(cè)Cry1Ac和Cry2Ab蛋白在昆蟲體內(nèi)的含量
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試?yán)ハx
        4.1.2 供試試劑
        4.1.3 樣品處理
        4.1.4 Cry1Ac檢測(cè)步驟
        4.1.5 Cry2Ab檢測(cè)步驟
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 直接取食實(shí)驗(yàn)中大草蛉幼蟲和成蟲體內(nèi)Cry1Ac和Cry2Ab蛋白的含量
        4.2.2 直接取食實(shí)驗(yàn)中綠盲蝽成蟲體內(nèi)Cry1Ac和Cry2Ab蛋白的含量
        4.2.3 大草蛉三級(jí)營養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中Cry1Ac和Cry2Ab蛋白的表達(dá)情況
        4.2.4 七星瓢蟲三級(jí)營養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中Cry1Ac和Cry2Ab蛋白的表達(dá)情況
    4.3 討論
第五章 昆蟲接觸Cry1Ac和Cry2Ab后體內(nèi)主要酶活性變化
    5.1 材料和方法
        5.1.1 試驗(yàn)材料
        5.1.2 相關(guān)試劑的配制
        5.1.3 酶提取液的制備
        5.1.4 類胰蛋白酶活性測(cè)定
        5.1.5 類胰凝乳蛋白酶活性測(cè)定
        5.1.6 氨肽酶活性測(cè)定
        5.1.7 谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性的測(cè)定
        5.1.8 提取液中總可溶性蛋白含量測(cè)定
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 直接取食實(shí)驗(yàn)中大草蛉幼蟲和成蟲的酶活性變化
        5.2.2 直接取食實(shí)驗(yàn)中綠盲蝽成蟲的酶活性變化
        5.2.3 三級(jí)營養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中大草蛉成蟲的酶活性變化
        5.2.4 三級(jí)營養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中七星瓢蟲成蟲的酶活性變化
    5.3 討論
第六章 田間調(diào)查轉(zhuǎn)基因棉田主要昆蟲的種群動(dòng)態(tài)
    6.1 材料與方法
        6.1.1 供試棉花
        6.1.2 調(diào)查方法
        6.1.3 調(diào)查昆蟲種類
    6.2 結(jié)果與分析
        6.2.1 轉(zhuǎn)基因棉田中棉鈴蟲的種群動(dòng)態(tài)變化
        6.2.2 轉(zhuǎn)基因棉田中棉蚜的種群動(dòng)態(tài)變化
        6.2.3 轉(zhuǎn)基因棉田中棉盲蝽的種群動(dòng)態(tài)變化
        6.2.4 轉(zhuǎn)基因棉田中草蛉的種群動(dòng)態(tài)變化
        6.2.5 轉(zhuǎn)基因棉田中瓢蟲的種群動(dòng)態(tài)變化
    6.3 討論
第七章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號(hào)：3816118