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保護性耕作土壤微生物與纖維素降解基因cbhI多樣性的研究

發(fā)布時間:2023-05-13 03:43
  保護性耕作是在傳統(tǒng)耕作方式基礎(chǔ)上的一種改進措施,是一種比較完美的耕作方式。通常以秸稈殘茬的覆蓋量來衡量是否是保護性耕作,若在30%以上則認(rèn)為是保護性耕作,主要包含秸稈覆蓋耕作、少耕、免耕、深松、防止坡地水土流失、合理利用水資源、農(nóng)藥及肥料、合理輪作輪耕等技術(shù)。保護性耕作可保護農(nóng)田,改善土壤結(jié)構(gòu),增加農(nóng)民收益,保護生態(tài)環(huán)境,為發(fā)展可持續(xù)農(nóng)業(yè)奠定了基礎(chǔ),因此,研究保護性耕作具有重要的意義。同時,纖維素降解茵在秸稈還田中秸稈的降解占主導(dǎo)地位。該試驗始于2006年玉米季,以是否耕作和是否秸稈還田兩種因素設(shè)置了4個處理,土壤樣品采集于2013年春季4月初。研究了四種不同處理對土壤酶活性,土壤細(xì)菌、真菌多樣性和纖維素降解菌cbhI功能基因多樣性的影響。主要研究結(jié)果如下:1)通過對四種不同處理的土壤樣品的有機質(zhì)、全氮、堿解氮、有效磷、速效鉀進行分析測定可知,在四種處理的土壤樣品中的全氮、有機碳、全磷、全鉀、堿解氮、速效磷、速效鉀含量均:CNTWNTS>CNTWTS,CNTWNT>CNTWT, CNTWNTS>CNTWNT,CNTWTS>CNTWT.其中CNTWNTS有其中的六...

【文章頁數(shù)】:83 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號與縮略語說明
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 保護性耕作研究背景及意義
        1.1 保護性耕作的定義
        1.2 保護性耕作在國外的起源與背景
        1.3 保護性耕作在國內(nèi)發(fā)展情況
        1.4 保護性耕作的優(yōu)缺點
        1.5 保護性耕作對土壤微生物多樣性的影響
    2 土壤微生物多樣性的研究進展
        2.1 土壤微生物多樣性
        2.2 土壤微生物多樣性研究方法
    3 纖維素降解基因研究進展
        3.1 纖維素酶
        3.2 纖維素降解基因
第二章 保護性耕作土壤理化性質(zhì)和幾種酶活的測定和比較
    1 材料與方法
        1.1 試驗區(qū)概況
        1.2 長期試驗設(shè)計及樣品采集
        1.3 土壤理化性質(zhì)測定
        1.4 常規(guī)稀釋涂布平板法計數(shù)
        1.5 土壤蔗糖酶的測定
        1.6 土壤過氧化氫酶的測定
        1.7 土壤纖維素酶的活性
    2 結(jié)果與分析
        2.1 土壤理化性質(zhì)
        2.2 土壤微生物計數(shù)
        2.3 土壤中蔗糖酶的活性
        2.4 土壤中過氧化氫酶的活性
        2.5 土壤中纖維素酶的活性
    3 討論
    4 小結(jié)
第三章 保護性耕作土壤中細(xì)菌和真菌群落多樣性的研究
    1 材料與方法
        1.1 取樣地點與方法
        1.2 土壤樣品的理化性質(zhì)及生物學(xué)特性
        1.3 菌株、培養(yǎng)基與試劑
        1.4 土壤總DNA的提取及純化
        1.5 土壤細(xì)菌多樣性的PCR-DGGE分析
        1.6 土壤真菌多樣性的PCR-DGGE分析
        1.7 大腸桿菌DH5a普通感受態(tài)細(xì)胞的制備
        1.8 PCR產(chǎn)物的TA克隆
        1.9 普通感受態(tài)細(xì)胞酶連產(chǎn)物轉(zhuǎn)化
    2 實驗結(jié)果及分析
        2.1 土壤總DNA提取與純化
        2.2 土壤細(xì)菌多樣性的PCR-DGGE分析
        2.3 土壤真菌多樣性的PCR-DGGE分析
    3 討論
    4 本章小結(jié)
第四章 保護性耕作土壤中纖維素降解基因cbhI基因多樣性的研究
    1 試驗材料與方法
        1.1 功能基因cbhI的PCR擴增
        1.2 感受態(tài)細(xì)胞的制備
        1.3 PCR產(chǎn)物的TA克隆
        1.4 普通感受態(tài)細(xì)胞酶連產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
        1.5 克隆文庫的構(gòu)建與保存
        1.6 轉(zhuǎn)化子的PCR擴增驗證
        1.7 cbhI基因文庫的RFLP分析
        1.8 cbhI基因文庫統(tǒng)計分析
    2 結(jié)果分析
        2.1 土壤cbhI基因的PCR擴增
        2.2 cbhI基因文庫酶切類型統(tǒng)計分析
        2.3 cbhI基因文庫庫容分析
        2.4 cbhI基因文庫多樣性指數(shù)分析
        2.5 cbhI基因文庫庫容分析
        2.6 cbhI基因文庫相似度比較
        2.7 cbhI基因測序分析和cbhI基因系統(tǒng)發(fā)育分析
    3 討論
    4 小結(jié)
全文總結(jié)
創(chuàng)新點
附錄 文中所用的培養(yǎng)基和試劑配方
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號:3815230

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