發(fā)布時(shí)間：2023-05-03 20:09

　　作為普遍使用的氨基甲酸酯類殺蟲劑-西維因,由于地表徑流和不規(guī)范使用,致使其廣泛的殘留與分布,威脅到生物體的生長(zhǎng)發(fā)育與生態(tài)環(huán)境的平衡,造成的不良影響已不可忽視。西維因具有一定遺傳毒性和雌激素效應(yīng)。內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的作用機(jī)制分為受體介導(dǎo)和非受體介導(dǎo)。受體介導(dǎo)作用是指外源性雌激素通過(guò)模仿或拮抗內(nèi)源性激素,與內(nèi)源性激素受體結(jié)合,引發(fā)生物學(xué)反應(yīng)干擾機(jī)體正常內(nèi)分泌系統(tǒng)。非受體介導(dǎo)作用是指西維因通過(guò)影響內(nèi)分泌激素的合成、運(yùn)輸、轉(zhuǎn)化和代謝等過(guò)程干擾機(jī)體的內(nèi)分泌系統(tǒng)。本試驗(yàn)以雄性尼羅羅非魚為研究對(duì)象,探討不同濃度下西維因的暴露對(duì)羅非魚血清中內(nèi)分泌相關(guān)激素水平、組織的DNA損傷以及內(nèi)分泌激素合成途徑中相關(guān)基因表達(dá)水平的影響,為分析和評(píng)價(jià)西維因的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的非受體介導(dǎo)作用機(jī)制和遺傳毒性提供科學(xué)依據(jù)。羅非魚暴露于不同劑量下的西維因(0.16mg/L、0.8mg/L、2mg/L)為期29天,酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清中黃體生成素(LH),卵泡刺激素(FSH),三碘甲狀腺原氨酸(T3),甲狀腺素(T4),雌二醇(E2)、睪酮(T)、卵黃蛋白原(VTG)、皮質(zhì)醇(COR)水平,結(jié)果顯示：0.8mg/L劑量組各激素水平隨暴...

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號(hào)及縮略語(yǔ)說(shuō)明
第一章 綜述
    1 引言
    2 西維因概述
        2.1 西維因的性質(zhì)及來(lái)源
        2.2 西維因的毒性
    3 環(huán)境內(nèi)分泌污染物的干擾效應(yīng)
    4 西維因的環(huán)境內(nèi)分泌干擾效應(yīng)
    5 西維因內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的非受體介導(dǎo)作用機(jī)制
        5.1 環(huán)境內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的兩種作用機(jī)制
        5.2 類固醇激素的合成途徑
        5.3 西維因?qū)︻惞檀技に睾铣赏緩降挠绊?br>    6 單細(xì)胞凝膠電泳(SCGE)概述
    7 本課題的立題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
第二章 西維因暴露對(duì)羅非魚內(nèi)分泌相關(guān)酶活性的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.4 ELISA法測(cè)定內(nèi)分泌相關(guān)酶活性
            2.4.1 血清中黃體生成素(LH)水平和卵泡刺激素(FSH)水平的測(cè)定
            2.4.2 血清中三碘甲狀腺原氨酸(T3)水平和甲狀腺激素(T4)水平的測(cè)定
            2.4.3 血清中雌二醇(E2)水平和睪酮(T)水平的測(cè)定
            2.4.4 血清中卵黃蛋白原(VTG)水平和皮質(zhì)醇(COR)水平的測(cè)定
        2.5 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 LH和FSH水平變化趨勢(shì)
        3.2 T3和T4水平變化趨勢(shì)
        3.3 E2和T水平變化趨勢(shì)
        3.4 VTG和COR水平變化趨勢(shì)
    4 討論
        4.1 西維因暴露與下丘腦-垂體-性腺軸相關(guān)酶水平變化的相關(guān)性
        4.2 西維因暴露與下丘腦-垂體-甲狀腺軸相關(guān)酶水平變化的相關(guān)性
    5 小結(jié)
第三章 西維因?qū)α_非魚內(nèi)分泌相關(guān)基因表達(dá)的影響
    前言
    第一節(jié) 西維因暴露對(duì)羅非魚性腺組織中相關(guān)基因的表達(dá)影響
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.4 實(shí)驗(yàn)方法
                1.4.1 樣品采集
                1.4.2 總RNA提取
                1.4.3 RNA濃度與完整性的檢測(cè)
                1.4.4 反轉(zhuǎn)錄
                1.4.5 引物設(shè)計(jì)
            1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
                1.5.1 RT-PCR的反應(yīng)條件
                1.5.2 RT-PCR的計(jì)算法則
            1.6 統(tǒng)計(jì)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 RT-PCR檢測(cè)羅非魚精巢組織中3β-HSD1的表達(dá)
            2.2 RT-PCR檢測(cè)羅非魚精巢組織中11β-HSD2的表達(dá)
            2.3 RT-PCR檢測(cè)羅非魚精巢組織中17β-HSD8的表達(dá)
            2.4 RT-PCR檢測(cè)羅非魚精巢組織中20β-HSD的表達(dá)
            2.5 RT-PCR檢測(cè)羅非魚精巢組織中CYP19a的表達(dá)
            2.6 RT-PCR檢測(cè)羅非魚精巢組織中CYP19b的表達(dá)
        3 討論
    第二節(jié) 西維因暴露對(duì)羅非魚肝臟組織中相關(guān)基因表達(dá)的影響
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
            2.1 RT-PCR檢測(cè)羅非魚肝臟組織中3β-HSD1的表達(dá)
            2.2 RT-PCR檢測(cè)羅非魚肝臟組織中11β-HSD2的表達(dá)
            2.3 RT-PCR檢測(cè)羅非魚肝臟組織中17β-HSD8的表達(dá)
            2.4 RT-PCR檢測(cè)羅非魚肝臟組織中20β-HSD的表達(dá)
            2.5 RT-PCR檢測(cè)羅非魚肝臟組織中CYP19a的表達(dá)
        3 討論
        4 小結(jié)
第四章 西維因?qū)α_非魚精巢細(xì)胞DNA損傷的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.4 彗星試驗(yàn)
            2.4.1 制備單細(xì)胞懸浮液
            2.4.2 制片
            2.4.3 細(xì)胞裂解
            2.4.4 DNA解旋
            2.4.5 電泳
            2.4.6 中和
            2.4.7 固定
            2.4.8 染色
        2.5 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 精巢細(xì)胞DNA受損狀況
        3.2 西維因?qū)布?xì)胞DNA的損傷作用
    4 討論
    5 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
科研情況



本文編號(hào)：3807207