舞毒蛾Lymantria dispar L是一種危害性很大的世界性農(nóng)林害蟲。亞洲型舞毒蛾(Asian gypsy moth)由于雌成蟲能飛行擴散、危害寄主更加廣泛的特點,已成為國際檢疫性害蟲,對國際貿(mào)易產(chǎn)生很大影響。昆蟲的嗅覺在行為中發(fā)揮重要作用,目前舞毒蛾的嗅覺傳導(dǎo)機制尚未完全清楚,為了更好地研究舞毒蛾的監(jiān)測和防控技術(shù),了解舞毒蛾觸角化學(xué)感器及信息素結(jié)合蛋白(Pheromone binding proteins, PBPs)的功能,我們利用掃描和透射電子顯微鏡系統(tǒng)觀察了觸角化學(xué)感器的分布與超微結(jié)構(gòu)；采用免疫組織化學(xué)方法研究了LdisPBP1和LdisPBP2在觸角化學(xué)感器中的表達定位；通過生物信息學(xué)技術(shù)預(yù)鋇LdisPBPl和LdisPBP2的三維結(jié)構(gòu)模型與配體互作的可能位點；并在此基礎(chǔ)上通過定點突變和熒光競爭結(jié)合試驗驗證了LdisPBP1和LdisPBP2與配體互作的關(guān)鍵位點。主要研究結(jié)果如下： 1、舞毒蛾觸角化學(xué)感器的分布與超微結(jié)構(gòu) 通過掃描電鏡和透射電鏡的觀察,明確了舞毒蛾雌、雄蛾觸角上化學(xué)感器的分布與超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明雌雄兩性成蟲的觸角上均有4種類型的化學(xué)感器,分別為毛形感器、...

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞簡表
名詞解釋
摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 舞毒蛾的概況及重要檢疫意義
        1.1.1 舞毒蛾的分類
        1.1.2 舞毒蛾的寄主范圍
        1.1.3 舞毒蛾的地理分布
        1.1.4 舞毒蛾的經(jīng)濟重要性
        1.1.5 舞毒蛾的檢疫重要性
    1.2 昆蟲的化學(xué)通訊
        1.2.1 昆蟲的化學(xué)通訊信號
        1.2.2 昆蟲的化學(xué)感器
        1.2.3 昆蟲的化學(xué)——電信號傳導(dǎo)
    1.3 昆蟲參與化學(xué)通訊的主要蛋白
        1.3.1 氣味分子結(jié)合蛋白(OBPs)
        1.3.2 嗅覺受體蛋白(ORs)
        1.3.3 化學(xué)感受蛋白(CSPs)
        1.3.4 舞毒蛾化學(xué)通訊相關(guān)蛋白的研究進展
    1.4 研究目的與意義
    1.5 技術(shù)路線
2 舞毒蛾觸角化學(xué)感器的分布與超微結(jié)構(gòu)
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗材料與儀器
        2.1.2 實驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 錐形感器
        2.2.2 毛形感器
        2.2.3 腔錐形感器
        2.2.4 刺形感器
    2.3 討論
3 舞毒蛾P(guān)BPs在觸角化學(xué)感器中的免疫定位
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料與儀器
        3.1.2 實驗方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 LdisPBP1在雌、雄蛾觸角中的免疫定位
        3.2.2 LdisPBP2在雌、雄蛾觸角中的免疫定位
    3.3 討論
4 舞毒PBPs三維結(jié)構(gòu)模型與配體互作位點的預(yù)測
    4.1 實驗方法
        4.1.1 生物信息學(xué)軟件
        4.1.2 LdisPBP1、LdisPBP2的模擬定點突變
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 基于模擬定點突變的互作位點預(yù)測
        4.2.2 基于模擬分子對接的互作位點預(yù)測
    4.3 討論
5 舞毒蛾P(guān)BPs與配體互作的關(guān)鍵位點驗證
    5.1 材料與方法
        5.1.1 實驗材料與儀器
        5.1.2 LdisPBPs基因的克隆和載體連接
        5.1.3 LdisPBPs基因的定點突變和克隆
        5.1.4 LdisPBPs點突變蛋白的原核表達與純化
        5.1.5 LdisPBPs野生型蛋白與突變體蛋白的圓二色光譜
        5.1.6 突變體蛋白與配體化合物的熒光結(jié)合實驗
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 LdisPBPs基因的克隆和點突變
        5.2.2 LdisPBPs重組突變體蛋白的原核表達純化
        5.2.3 LdisPBPs突變體蛋白的結(jié)構(gòu)鑒定
        5.2.4 LdisPBPs突變體蛋白與熒光探針1-NPN的結(jié)合常數(shù)
        5.2.5 LdisPBPs突變體蛋白的結(jié)合特性
    5.3 討論
6 結(jié)論與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻
個人簡介
導(dǎo)師簡介
獲得成果目錄清單
致謝



本文編號：3804245