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異色瓢蟲(chóng)CYP4G79干擾后碳?xì)浠衔锼较陆狄鸬谋砥ず诨J降淖兓芯?/H1>
發(fā)布時(shí)間:2023-03-23 22:46
  昆蟲(chóng)的表皮是和外界環(huán)境直接接觸的重要結(jié)構(gòu),一方面能夠提供外形的支撐,同時(shí)還保護(hù)昆蟲(chóng)抵御外界的傷害。昆蟲(chóng)表皮組織的成分非常復(fù)雜,包括幾丁質(zhì),表皮蛋白和脂類(lèi)物質(zhì)(包括碳?xì)浠衔?等,一些昆蟲(chóng)的體表還能觀(guān)察到基于兒茶酚胺途徑代謝產(chǎn)生的黑色素斑紋。昆蟲(chóng)表皮碳?xì)浠衔镒鳛槠渲兄匾慕M分,和其他表皮物質(zhì)之間聯(lián)系的研究目前還比較少。CYP4G亞家族是細(xì)胞色素P450家族成員之一,參與到了昆蟲(chóng)碳?xì)浠衔锏暮铣蛇^(guò)程中,可通過(guò)改變其轉(zhuǎn)錄水平或酶活性引起碳?xì)浠衔锖康淖兓。異色瓢蟲(chóng)屬于鞘翅目瓢甲科,是一種完全變態(tài)昆蟲(chóng),對(duì)環(huán)境具有極強(qiáng)的適應(yīng)性,廣泛分布于中國(guó)的大部分地區(qū)。其成蟲(chóng)和蛹的表皮上的黑色素斑點(diǎn)規(guī)律性很強(qiáng),且會(huì)跟隨環(huán)境的變化而改變,形成多種色斑形式,在其調(diào)節(jié)體表溫度、躲避天敵等方面具有重要的作用。CYP4G79是目前在異色瓢蟲(chóng)體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的唯一一種CYP4G基因,其在蟲(chóng)體內(nèi)的功能需要進(jìn)一步的研究;谝陨系倪@些問(wèn)題開(kāi)展了一系列的實(shí)驗(yàn)。首先對(duì)CYP4G79基因進(jìn)行了時(shí)空表達(dá)分析并利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)檢測(cè)了目的基因被干擾后蛹表皮的碳?xì)浠衔锍煞值亩孔兓?探究RNAi對(duì)異色瓢蟲(chóng)表皮成分的影響...

【文章頁(yè)數(shù)】:86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
主要符號(hào)對(duì)照表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 昆蟲(chóng)表皮碳?xì)浠衔?br>        1.1.1 昆蟲(chóng)表皮
        1.1.2 表皮碳?xì)浠衔?br>        1.1.3 細(xì)胞色素P450
    1.2 黑化作用
        1.2.1 黑化的概念及基本功能
        1.2.2 昆蟲(chóng)表皮黑化途徑
    1.3 異色瓢蟲(chóng)的體色多樣性
    1.4 RNAi
        1.4.1 RNA干擾簡(jiǎn)介
        1.4.2 dsRNA的導(dǎo)入方法
    1.5 研究的目的意義與主要內(nèi)容
第二章 CYP4G79在異色瓢蟲(chóng)表皮碳?xì)浠衔锖铣芍械墓δ苎芯?br>    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 供試蟲(chóng)源
        2.2.2 主要試劑(配置)及儀器設(shè)備
        2.2.3 異色瓢蟲(chóng)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
        2.2.4 CYP4G79基因轉(zhuǎn)錄組分析
        2.2.5 CYP4G79基因的時(shí)空表達(dá)譜分析
        2.2.6 ds-CYP4G79 RNAi效率檢測(cè)
        2.2.7 異色瓢蟲(chóng)表皮碳?xì)浠衔锏奶崛∨c色譜分析
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.1 CYP4G79基因的時(shí)空表達(dá)譜分析結(jié)果
        2.3.2 ds-CYP4G79 RNAi效率檢測(cè)
        2.3.3 異色瓢蟲(chóng)表皮碳?xì)浠衔锏奶崛〖吧V分析結(jié)果
    2.4 討論
第三章 表皮碳?xì)浠衔飳?duì)異色瓢蟲(chóng)蛹表皮色斑形成的影響
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 供試蟲(chóng)源
        3.2.2 主要試劑(配置)及儀器設(shè)備
        3.2.3 蛹表皮黑斑及脂類(lèi)物質(zhì)的的分布特點(diǎn)探究
        3.2.4 不同程度RNAi基因下調(diào)情況及蟲(chóng)體存活率統(tǒng)計(jì)
        3.2.5 低強(qiáng)度RNAi后異色瓢蟲(chóng)蛹表型變化及黑化相基因的表達(dá)情況分析
        3.2.6 高強(qiáng)度RNAi后異色瓢蟲(chóng)蛹表型的變化
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.0 蛹表皮黑斑及脂類(lèi)物質(zhì)的的分布特點(diǎn)
        3.3.1 不同程度RNAi后基因下調(diào)情況及蟲(chóng)體存活率結(jié)果分析
        3.3.2 低強(qiáng)度RNAi后異色瓢蟲(chóng)蛹表型變化及黑化相基因的表達(dá)情況分析
        3.3.3 高強(qiáng)度RNAi后異色瓢蟲(chóng)蛹表型變化
    3.4 討論
第四章 CYP4G79的其他功能研究
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 供試蟲(chóng)源
        4.2.2 主要試劑(配置)及儀器設(shè)備
        4.2.3 不同濕度條件下蛹表型的觀(guān)察及CYP4G79基因的表達(dá)情況分析
        4.2.4 ds-CYP4G79 處理后蛹內(nèi)的水分含量測(cè)定
        4.2.5 ds-CYP4G79 處理后異色瓢蟲(chóng)蛹的表皮狀態(tài)觀(guān)察
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        4.3.1 不同濕度條件下蛹表型的觀(guān)察及CYP4G79基因的表達(dá)情況分析
        4.3.2 ds-CYP4G79 處理后蛹內(nèi)的水分含量分析
        4.3.3 ds-CYP4G79 處理后異色瓢蟲(chóng)蛹表皮的其他表型變化
    4.4 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 A 細(xì)胞色素 P450 命名法則
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào):3768901


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