氫氧化細(xì)菌作為一類依賴于豆科植物共生固氮所釋放的H2而生長的細(xì)菌,具有極高的研究價(jià)值。加大氫氧化細(xì)菌的研究力度,必將豐富生物固氮學(xué)的內(nèi)容。本文采集大豆根際土壤,按照稀釋涂布法分離氫氧化細(xì)菌,利用氣相色譜儀檢測菌株氧化氫能力來篩選氫氧化細(xì)菌,再通過菌株形態(tài)特征、生理生化試驗(yàn)以及16S r DNA鑒定篩選出的菌株的種屬。同時(shí),對篩選出來的菌株的促生特性進(jìn)行了測定,用Salkowski reagent法和雙層CAS平板法分別測定菌株分泌IAA和產(chǎn)鐵載體的能力。本文還采用高通量測序技術(shù)對不同生育期對大豆根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)多樣性的影響進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:利用氣體循環(huán)培養(yǎng)體系來電解水產(chǎn)生H2,和泵入的空氣形成混合氣體,調(diào)節(jié)電流大小,使得混合氣體的中H2的濃度為832 ppm,使得通入混合氣體的流速為280 m L/min。利用涂布平板法將按濃度梯度稀釋的土壤懸液涂布于礦質(zhì)鹽培養(yǎng)基上進(jìn)行菌種分離,通過分離純化共分離出菌株75株。利用氣相色譜法對分離出來的菌株進(jìn)行氧化氫能力的測定,經(jīng)測定后篩選出14株氧化氫能力強(qiáng)的菌株:菌株01-8,菌株1-15,菌株1-17,菌株3-17,菌株3-18,菌株5-...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語對照表
第一章 緒論
    1.1 研究背景
    1.2 根際促生菌(PlantGrowth–PromotingRhizobacteria,PGPR)
    1.3 根際促生菌的促生機(jī)制
    1.4 生物固氮與氫肥理論
    1.5 氫氧化細(xì)菌
        1.5.1 氫氧化細(xì)菌概念
        1.5.2 氫氧化細(xì)菌的分離
        1.5.3 氫氧化細(xì)菌的篩選
        1.5.4 氫氧化細(xì)菌的分類
        1.5.5 氫氧化細(xì)菌的應(yīng)用研究
    1.6 土壤微生物多樣性的研究方法
    1.7 研究內(nèi)容、目的、意義
        1.7.1 研究目的
        1.7.2 研究內(nèi)容
        1.7.3 研究意義
第二章 大豆根際氫氧化細(xì)菌的分離鑒定
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 樣品采集
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑和儀器
        2.1.3 培養(yǎng)基
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 氫氧化細(xì)菌的分離與純化
        2.2.2 菌株氧化氫能力的測定
        2.2.3 菌株的鑒定
        2.2.4 菌株分泌IAA能力的測定
        2.2.5 菌株產(chǎn)鐵載體測定
        2.2.6 數(shù)據(jù)處理
    2.3 結(jié)果分析
        2.3.1 菌株氧化氫能力測定
        2.3.2 菌株形態(tài)學(xué)鑒定
        2.3.3 菌株生理生化鑒定
        2.3.4 16SrDNA菌種鑒定
        2.3.5 分泌IAA能力結(jié)果
        2.3.6 產(chǎn)鐵載體能力結(jié)果
    2.4 討論
        2.4.1 氫氧化細(xì)菌的分離、純化
        2.4.2 氫氧化細(xì)菌的篩選
        2.4.3 氫氧化細(xì)菌的鑒定
        2.4.4 菌株產(chǎn)IAA能力的測定
        2.4.5 菌株產(chǎn)鐵載體能力測定
第三章 不同生育期對大豆根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 土壤樣品
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 土壤采集與樣品信息
        3.2.2 土壤總DNA提取
        3.2.3 16SrRNAV3+V4區(qū)的PCR擴(kuò)增及測序
        3.2.4 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 樣品序列數(shù)特點(diǎn)
        3.3.2 土壤細(xì)菌結(jié)構(gòu)群落分析
        3.3.3 樣品間復(fù)雜度比較分析
        3.3.4 群落多樣性分析
        3.3.5 PCoA分析
        3.3.6 組間樣品差異分析
    3.4 討論
第四章 問題與展望
    4.1 研究中存在的問題與改進(jìn)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果



本文編號：3768551