化肥雖然能夠在很大程度上提高作物的產(chǎn)量,但是在長期且不合理的施用之下,就會導(dǎo)致一些很嚴重的后果,如破壞土壤結(jié)構(gòu),導(dǎo)致土壤退化,土壤肥力下降等,尤其是化肥對環(huán)境的污染已經(jīng)到了亟需治理的時候了。而與化肥相比,微生物肥料具有環(huán)境友好、資源節(jié)約、綠色安全等優(yōu)點。因此,微生物肥料的研究與推廣是符合當(dāng)前社會可持續(xù)發(fā)展的需要�；诖�,本文對施用于香蕉的多功能微生物肥料進行研究,以香蕉枯萎病病原真菌為靶標菌,分離篩選拮抗菌,并對拮抗菌的抑菌活性及抑菌機理進行研究;通過與其他功能菌的組合培養(yǎng),共同構(gòu)建防病促生的穩(wěn)定微生物功能群落,并對培養(yǎng)期間的群落穩(wěn)定性進行分析;單因素實驗確定培養(yǎng)條件的最優(yōu)區(qū)間,再通過均勻設(shè)計實驗得到最優(yōu)的發(fā)酵條件,提高菌肥的肥效;通過盆栽實驗,確定功能微生物群落對于香蕉苗的防病促生效果;通過高通量測序,對受到功能微生物影響的土壤微生物群落的多樣性及結(jié)構(gòu)分析,了解菌肥對土壤微生態(tài)的影響情況。本研究主要成果如下:(1)以香蕉園的土壤和發(fā)酵食品作為拮抗菌的分離試驗材料,得到131株細菌,以香蕉枯萎病病菌作為靶標菌,篩選出52株拮抗菌,以菌株4-z-3作為代表,發(fā)現(xiàn)其對八種植物病原菌都具有良...

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1. 綜述
    1.1 研究背景
    1.2 微生物肥料概述
        1.2.1 微生物肥料的定義
        1.2.2 微生物肥料的發(fā)展歷程及趨勢
        1.2.3 微生物肥料的分類與優(yōu)點
        1.2.4 微生物肥料的理論基礎(chǔ)
        1.2.5 微生物肥料的主要菌株類型
    1.3 香蕉枯萎病的防治研究及應(yīng)用進展
        1.3.1 香蕉枯萎病的簡介
        1.3.2 香蕉枯萎病的防治手段研究
    1.4 土壤微生物多樣性及其研究方法
        1.4.1 土壤微生物多樣性與植物抗病的關(guān)系
        1.4.2 土壤微生物多樣性的研究方法
    1.5 研究目的
    1.6 研究內(nèi)容
    1.7 研究的技術(shù)路線
2. 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 拮抗菌分離材料
        2.1.2 主要培養(yǎng)基
        2.1.3 本實驗使用的主要試劑
        2.1.4 PCR引物
        2.1.5 實驗儀器與設(shè)備
        2.1.6 數(shù)據(jù)分析軟件
        2.1.7 供試病原菌
        2.1.8 構(gòu)建群落的菌株信息
        2.1.9 實驗用抗生素
        2.1.10 盆栽實驗香蕉苗
        2.1.11 盆栽實驗所用的土壤
        2.1.12 盆栽實驗所用的復(fù)合肥
        2.1.13 盆栽實驗場地
    2.2 拮抗菌的分離與篩選
        2.2.1 拮抗菌的分離
        2.2.2 拮抗菌株的初篩
        2.2.3 拮抗菌株的復(fù)篩
        2.2.4 抑菌譜的測定
    2.3 拮抗菌的鑒定
        2.3.1 菌株的形態(tài)特征分析
        2.3.2 菌株的生理生化鑒定
        2.3.3 拮抗菌株的分子生物學(xué)鑒定
    2.4 抗菌物質(zhì)的初步提取
    2.5 掃描電鏡分析抑菌作用機理
    2.6 透射電鏡分析抑菌作用機理
    2.7 粗提物對病原真菌細胞壁的影響
    2.8 功能菌株的拮抗共生實驗
    2.9 菌株天然耐藥性的檢測
    2.10 菌株的抗生素標記
    2.11 功能菌群發(fā)酵穩(wěn)定性分析
    2.12 培養(yǎng)條件的單因素優(yōu)化
    2.13 功能強弱的測定
    2.14 均勻設(shè)計實驗優(yōu)化培養(yǎng)條件
    2.15 均勻?qū)嶒炛械墓δ軓娙醯臏y定
    2.16 盆栽實驗
    2.17 盆栽實驗測定項目與方法
        2.17.1 菌肥防控效果統(tǒng)計
        2.17.2 菌肥對香蕉苗農(nóng)藝性狀的影響
        2.17.3 菌肥對土壤理化性質(zhì)的影響
    2.18 菌肥對土壤微生物群落的影響
    2.19 數(shù)據(jù)處理
3. 結(jié)果與分析
    3.1 拮抗菌的分離與篩選
    3.2 抑菌譜的測定結(jié)果
    3.3 拮抗菌的鑒定
        3.3.1 菌株的形態(tài)特征分析
        3.3.2 菌株的生理生化鑒定
        3.3.3 菌株的16S rDNA序列鑒定
    3.4 抗菌物質(zhì)的初步提取
    3.5 掃描電鏡分析抑菌作用機理
    3.6 透射電鏡分析抑菌作用機理
    3.7 粗提物對病原真菌細胞壁的影響
    3.8 菌株拮抗共生實驗
    3.9 菌株的天然耐藥性
    3.10 菌株的抗生素標記
    3.11 功能菌群發(fā)酵穩(wěn)定性分析
    3.12 培養(yǎng)條件的單因素優(yōu)化
        3.12.1 初始pH值對菌肥功能的影響
        3.12.2 轉(zhuǎn)速對菌肥功能的影響
        3.12.3 接種量對菌肥功能的影響
        3.12.4 碳氮比對菌肥功能的影響
        3.12.5 培養(yǎng)時間對菌肥功能的影響
    3.13 均勻試驗優(yōu)化培養(yǎng)條件
    3.14 不同處理對香蕉苗防病促生的影響
        3.14.1 不同處理的香蕉苗的病情指數(shù)和防控效果
        3.14.2 不同處理對香蕉苗的葉片葉綠素含量的影響
        3.14.3 不同處理對香蕉苗的株高的影響
        3.14.4 不同處理對香蕉苗的生物量的影響
        3.14.5 不同處理對香蕉苗的葉片的影響
        3.14.6 不同處理對香蕉苗的莖粗的影響
    3.15 不同處理對土壤理化性質(zhì)的影響
        3.15.1 不同處理對土壤全氮含量的影響
        3.15.2 不同處理對土壤速效鉀含量的影響
        3.15.3 不同處理對土壤有效磷含量的影響
        3.15.4 不同處理對土壤有機質(zhì)含量的影響
    3.16 不同處理對土壤微生物群落的影響
        3.16.1 OTU分析和稀釋曲線
        3.16.2 不同處理對土壤微生物群落組成的影響
        3.16.3 不同處理土壤微生物群落的主成分分析
        3.16.4 不同處理的土壤微生物聚類分析
        3.16.5 不同處理的土壤微生物多樣性變化分析
        3.16.6 不同處理的土壤微生物組間差異顯著性分析
4. 討論
    4.1 拮抗菌的分離篩選及鑒定
    4.2 拮抗菌的抑菌機理
    4.3 穩(wěn)定群落的構(gòu)建
    4.4 菌肥培養(yǎng)條件優(yōu)化
    4.5 盆栽試驗
    4.6 不同處理對土壤微生物群落的影響
5. 結(jié)論
6. 不足和展望
參考文獻
附錄
致謝



本文編號：3763301