發(fā)布時間：2023-01-15 18:37

　　煙粉虱MED隱種入侵我國后迅速擴散至全國各個省市,且逐漸取代MEAM1隱種和本地近緣種占據(jù)優(yōu)勢地位,而本地種Asia Ⅱ 1隱種僅分布在我國中南部局部地區(qū)。MED隱種能成功入侵不同區(qū)域并迅速定殖危害,其中一個重要的原因是其對不同溫度條件具有快速的適應(yīng)能力,表觀遺傳修飾是其快速應(yīng)對逆境溫度的一個重要途徑。本研究以表觀遺傳因子染色質(zhì)重塑復(fù)合物為切入點,圍繞煙粉虱“響應(yīng)溫度脅迫的染色質(zhì)重塑調(diào)控機制”這一科學(xué)問題,首先克隆本地種Asia Ⅱ 1隱種與入侵種MED隱種染色質(zhì)重塑因子ISWI和SWI/SNF家族的核心亞基iswi、brm1及brm2基因的序列全長;然后比較短時溫度脅迫下兩個隱種這3個基因表達(dá)模式的差異;進(jìn)一步通過RNAi檢測敲低靶基因后其耐熱性與耐寒性表型的變化,以明確這3個基因在兩個隱種耐溫性差異中的功能;最后利用溫度偏好測試儀檢測干擾iswi基因后兩個隱種的溫度偏好行為是否發(fā)生變化,進(jìn)而揭示兩個隱種對溫度的行為反應(yīng)是否與iswi基因相關(guān)。主要結(jié)果與結(jié)論如下:（1）煙粉虱染色質(zhì)重塑因子的克隆及序列分析克隆獲得煙粉虱Asia Ⅱ 1與MED隱種染色質(zhì)重塑因子iswi、brm1與br... 

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
主要符號對照表
第一章 緒論
    1.1 表觀遺傳學(xué)與溫度適應(yīng)性的研究概況
        1.1.1 表觀遺傳學(xué)簡介
        1.1.2 表觀遺傳學(xué)與溫度適應(yīng)性的研究概況
    1.2 染色質(zhì)重塑概述
        1.2.1 染色質(zhì)重塑復(fù)合物的分類
        1.2.2 染色質(zhì)重塑因子的作用機制
        1.2.3 染色質(zhì)重塑與溫度適應(yīng)性的研究概況
    1.3 煙粉虱與溫度適應(yīng)性的研究概況
        1.3.1 煙粉虱概述
        1.3.2 煙粉虱與溫度適應(yīng)性的研究概況
    1.4 研究思路
        1.4.1 立題依據(jù)
        1.4.2 研究內(nèi)容
第二章 煙粉虱染色質(zhì)重塑因子的克隆與序列分析
    2.1 試驗材料
        2.1.1 供試?yán)ハx
        2.1.2 主要儀器與試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 總RNA的提取
        2.2.2 cDNA的合成
        2.2.3 MED和 Asia Ⅱ1 隱種染色質(zhì)重塑因子中間片段的獲得
        2.2.4 PCR產(chǎn)物的純化與測序
        2.2.5 MED和 Asia Ⅱ1 隱種染色質(zhì)重塑因子序列分析
    2.3 結(jié)果分析
        2.3.1 MED和 Asia Ⅱ1 隱種iswi基因序列及結(jié)構(gòu)分析
        2.3.2 MED和 Asia Ⅱ1 隱種iswi基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.3.3 MED和 Asia Ⅱ1 隱種brm1 基因序列及結(jié)構(gòu)分析
        2.3.4 MED和 Asia Ⅱ1 隱種brm2 基因序列及結(jié)構(gòu)分析
        2.3.5 MED和 Asia Ⅱ1 隱種brm1與brm2 基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
    2.4 討論
第三章 煙粉虱染色質(zhì)重塑因子在不同溫度脅迫下表達(dá)譜分析
    3.1 試驗材料
        3.1.1 供試?yán)ハx
        3.1.2 主要儀器與試劑
    3.2 試驗方法
        3.2.1 溫度脅迫處理
        3.2.2 熒光定量PCR檢測基因表達(dá)模式
        3.2.3 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果分析
        3.3.1 溫度脅迫下MED和 Asia Ⅱ1 隱種iswi基因表達(dá)分析
        3.3.2 溫度脅迫下MED和 Asia Ⅱ1 隱種brm1 基因表達(dá)分析
        3.3.3 溫度脅迫下MED和 Asia Ⅱ1 隱種brm2 基因表達(dá)分析
    3.4 討論
第四章 染色質(zhì)重塑因子在煙粉虱溫度耐受性中的功能分析
    4.1 試驗材料
        4.1.1 供試?yán)ハx
        4.1.2 主要儀器與試劑
    4.2 試驗方法
        4.2.1 dsRNA的合成
        4.2.2 dsRNA的飼喂
        4.2.3 檢測RNAi后基因的表達(dá)水平
        4.2.4 表型觀察
        4.2.5 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果分析
        4.3.1 飼喂dsRNA后基因的表達(dá)水平
        4.3.2 干擾iswi基因后MED和 Asia Ⅱ1 隱種溫度耐受性分析
        4.3.3 干擾brm1 基因后MED和 Asia Ⅱ1 隱種溫度耐受性分析
        4.3.4 干擾brm2 基因后MED和 Asia Ⅱ1 隱種溫度耐受性分析
    4.4 討論
第五章 Iswi基因在煙粉虱溫度偏好行為中的作用
    5.1 試驗材料
        5.1.1 供試?yán)ハx
        5.1.2 主要儀器與試劑
    5.2 試驗方法
        5.2.1 dsRNA的合成
        5.2.2 dsRNA的飼喂
        5.2.3 溫度偏好試驗
    5.3 結(jié)果分析
    5.4 討論
第六章 全文結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
        6.1.1 煙粉虱染色質(zhì)重塑因子的克隆及序列分析
        6.1.2 煙粉虱染色質(zhì)重塑因子在不同溫度脅迫下表達(dá)譜分析
        6.1.3 染色質(zhì)重塑因子在煙粉虱溫度耐受性中的功能分析
        6.1.4 Iswi基因在煙粉虱溫度偏好行為中的作用
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]中國煙粉虱地理分布、種群遺傳結(jié)構(gòu)及其次生內(nèi)共生菌多樣性研究[D]. 薛延韜.西南大學(xué) 2018
[2]沙蔥螢葉甲耐寒性及其機理的研究[D]. 李浩.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]二化螟越冬幼蟲耐寒性及其機理研究[D]. 張擁軍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3731365